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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
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PVDF膜有什么特性2024/07/12
PVDF膜是一種用于各種實驗室和工業(yè)應用的膜,用于過濾、分離和純化生物和化學樣品。PVDF代表聚偏二氟乙烯,它是一種具有高化學和熱穩(wěn)定性的合成聚合物,使其適用于廣泛的應用。PVDF膜通常用于蛋白質和核酸轉移、蛋白質印跡以及其他需要高蛋白質結合能力和低背景干擾的應用。PVDF膜材具有熱軟度高不易發(fā)生破裂、性價比高、制作周期短、施工速度快的優(yōu)點。近年來經過工藝及材料的不斷改進,其耐候性及防污性得到進一步提高,自潔性高的PVDF膜材的耐用年限可達15年以上,該材料目前是國內使用量較大的膜材。特性:PV
超濾離心管的使用方法2024/07/10
超濾離心管是一種采用優(yōu)化過濾結構的設計方式,減少濃差極化,降低了膜易污染堵塞機率,加快了離心速度,縮短了離心所需的時間;超濾離心管還可用的膜表面面積提供快速樣品處理。超濾離心管具體用法:(1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。(2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需
電泳緩沖液的特點是什么?2024/07/08
電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成,是電泳場中的導體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點:1.TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進行電泳。TAE的
固體樣本處理方法2024/07/04
固體樣本處理方法:固體樣本處理原則:稱取1g的固體樣本,用9g的合適緩沖液溶解,分泌蛋白可以直接離心取上清檢測,細胞內的蛋白,要先收集細胞,再用合適方法破碎,離心取上清測試。1、組織標本:切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。對于植物組織,不好勻漿的話,就用液氮研磨,將植物組織放在研缽中,加入適量液氮,充分研磨。
培養(yǎng)皿介紹及使用方法2024/07/02
培養(yǎng)皿是一種用于盛載液體培養(yǎng)液或固體瓊脂培養(yǎng)液進行細胞培養(yǎng)的玻璃或塑料圓形器皿。培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成,是用作培養(yǎng)細菌的化學器材,主要材質是玻璃或塑料。培養(yǎng)皿質地脆弱、易碎,因此在清洗及拿放時應小心謹慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿最好及時清洗干凈,存放在安全、固定的位置,防止損壞、摔壞。培養(yǎng)皿的分類根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細胞培養(yǎng)皿和細菌培養(yǎng)皿;根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿,但進口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。根據(jù)大小的不同通常可分為直徑為35mm,60mm,90mm
冰凍切片包埋劑制備注意事項2024/07/01
操作步驟1、冰凍制片組織常規(guī)取材。2、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分。3、在冷凍切片機里預冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑。4、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃),待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘。6、將組織托夾入切片夾頭,進行切片。7、切片完成后可將組織托置于室溫下3-5分鐘解凍后變軟,用水將包埋劑沖洗干凈。8、將組織放入包埋盒,浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進行組織固定。結果1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織,冷凍后包埋劑和組織變白,硬度
胎牛血清如何正確存放與解凍2024/06/24
一、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規(guī)定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。二、血清中絮狀沉淀
即用型透析袋與干型透析袋的區(qū)別2024/06/21
一、即用型透析袋即用型透析袋的制造過程沒有重金屬污染及硫化物,無需預處理,只需用去離子水清洗即可使用,滿足對截留分子量精確性和膜純度的應用。1.韌性膜材料,不易破損2.雜質含量極少,可無需預處理,只需用去離子水清洗即可使用3.孔徑標準均一4.對溶質的吸附性小5.可選分子量范圍廣100-3000006.多種扁平寬度可選7.生物技術膜,不含硫化物及金屬雜質二、普通干型透析袋1.PH穩(wěn)定范圍:5-92.污染物水平:硫化物3.化學兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4;還可與分子生物學
ELISA中必要的三個試劑2024/06/18
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)酶聯(lián)物(結合物)及標本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應終止液。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒,僅供應包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程。固相載體固相載體在ELISA測定
實驗中細胞爬片的準備及操作2024/06/17
細胞爬片的準備1、蓋玻片的選擇:爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用細胞爬片(價格比較昂貴)但是細胞貼壁牢固,拍出照片效果好。2、爬片的剪裁:可根據(jù)自己的需要,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小,置于6孔板、12孔板或24孔板。3、爬片的使用前處理:將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍。細胞爬片的操作1、胰酶消化細胞后計數(shù)重懸細胞于培養(yǎng)基中。2、加細胞前,根據(jù)玻片的大小,先在
如何使用細胞篩網2024/06/13
準備濾器:選擇合適的細胞篩網,并根據(jù)需要在濾器上加上濾紙,使其更容易使用。準備細胞懸液或培養(yǎng)基:將細胞懸液或培養(yǎng)基倒入容器中,并加入需要的藥物、酶、抗生素等。過濾細胞:將濾器輕輕地壓在溫和的細胞懸液或培養(yǎng)基中,讓其均勻地經過細胞篩網的孔。收集過濾的細胞:過濾后的細胞可以直接通篩網被收集或者用無菌的器具從容器中進行收集。細胞培養(yǎng):若需要培養(yǎng)篩選的細胞,則將其收集到未被污染的細胞培養(yǎng)基中,并按照培養(yǎng)基配方進行培養(yǎng)。此外,細胞篩網的使用還需注意以下幾點:1.細胞篩網的類型。細胞篩網通常分為單層和多層兩
PBS緩沖液的配置方法及作用2024/06/11
PBS緩沖液,是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI,一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級解離,緩沖的PH值范圍很廣,而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2,以提供二價陽離子。01、配置方法分別稱取8g的NaCI、0.2g的KCI、1.44g的Na2HPO4、0.24g的KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,使用HCI調
影響ELISA試劑盒測定成果的解決辦法2024/06/06
一、類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)能夠與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致假陽性。解決辦法:1.用F(ab)2替代完好的IgG;2.標本用聯(lián)有熱變性(63℃,10min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用);3.檢測抗原時,能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。二、補體ELISA系統(tǒng)中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來,使C1q能夠將二者連接起來,
什么是細胞培養(yǎng)?2024/06/04
培養(yǎng)的細胞從哪里來?1.細胞株簡單說就是買的或送的。2.原代細胞組織或血液中提取的。一般細胞株可以連續(xù)傳代,而原代細胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。培養(yǎng)細胞的生長方式有哪些?1.貼壁生長必須貼附于支持物表面才能生長。見于各種腫瘤細胞等。(你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上,細胞也不會掉下來。2.懸浮生長于懸浮狀態(tài)下即可生長,不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系統(tǒng)腫瘤細胞等。每代貼附生長細胞的生長過程分為:1)游離期:細胞接種后在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài),也稱懸浮期。2)貼壁期:細胞貼附于(膠原、玻璃、塑料、其他細胞等)。3
即用型RC膜的使用方法2024/05/20
一、膜技術參數(shù):生物技術RC膜(再生纖維素),重金屬離子和硫化物含量為痕跡級別,干型,膜表面有甘油保護層,使用前用溫水(60℃以內)浸泡10分鐘左右后,再以蒸餾水沖洗干凈即可。RC膜擁有廣泛的化學兼容性,能承受弱酸弱堿或稀釋的強酸強堿,絕大部分的醇類物質。弱極性有機物或者稀釋過的強極性有機物,如DMSO,接觸強極性有機溶劑可能會損害RC膜。標準RC膜能適用pH值2-12以及溫度4-132°C之間。二、儲存條件:透析膜表面有甘油保護層,封放置于4-37°C之間環(huán)境。建議密封放在冰箱冷藏室4℃保存。
尖底離心管與圓底離心管的區(qū)別2024/05/16
尖底離心管和圓底離心管的主要區(qū)別在于它們的底部形狀和設計,這些差異影響了它們的使用范圍和性能。以下是兩者之間的主要區(qū)別:形狀:①尖底離心管的底部是尖銳的錐形,這種設計可以集中樣品的沉淀于底部,從而提高沉淀物在底部的濃度和純度。②圓底離心管的底部是圓形的,有助于平衡樣品的沉淀和防止樣品干燥。用途:①尖底離心管則更適合用于分離較大的固體,如細胞、組織等,以及在需要進行密度梯度收集的情況下。②圓底離心管通常用于沉淀較小的顆粒物或分離液體中的成分,以及在進行加熱或高速旋轉的實驗時,因為它們的密封性較好。
影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素有哪些2024/05/11
1.營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時,微生物被殺死的同時,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸和色氨酸也有相當數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應,造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質量。2.微生物的耐熱性細菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時間取決于把細菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時間。3.pH值pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時,微生
牛血清白蛋白在生化實驗中的作用2024/05/10
牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應用,接下來為大家介紹其中兩種作用。牛血清白蛋白測定蛋白濃度:按50:1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白標準)+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標準液加入96孔板的第1~8標準孔中,在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液,室溫放置2小時。用酶標儀測定蛋白濃度:測定A562,依標準曲線算出蛋白濃度。牛血清白蛋白SDS-PA
透析袋的使用技巧2024/04/29
1)除鹽透析時將高鹽的樣本加入透析袋中,夾緊,用你選擇的保存液進行透析,一般在2-8度透析過夜,中間要更換一到兩次透析液,另外透析液體積盡量大些。先把透析液放進容器中(容器的直徑小于透析袋長度),再將夾好的透析袋豎直放進去,這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的,幾乎整個透析袋都與透析液接觸,溶液的置換面積最大,置換速度最快。如果夾子很穩(wěn),那就夾好,先把透析液放進容器中(容器的直徑小于透析袋長度),再將夾好的透析袋豎直放進去,這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的,幾乎整個透析袋都與透析液接觸,溶液
ELISA和WB區(qū)別2024/04/24
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)用到了免疫學原理和化學反應顯色,待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細胞或組織培養(yǎng)上清液,因而沒有用到組織包埋、切片等技術,這是與免疫組化的主要區(qū)別,操作上開始需要將抗原或抗體結合到固相載體表面,從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復合物粘附在載體上,這就是“吸附”的含義。免疫組化和elisa所用到的原理大致相同,只是因為所檢測的樣品不同,從而在操作方法上有所不同。elisa多用于定量分析,其靈敏度非常高。Westernbolt(蛋白質印跡法)先要進行SDS-PAGE,
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