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2020
10-292020
10-27速率區(qū)帶離心法 |你的分離純化方法選對(duì)了嗎?
密度梯度離心(isodensitycentrifugationmethod)又稱為區(qū)帶離心。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可以同時(shí)使樣品中幾種或全部組分分離,具有良好的分辨率,分離效果好,可一次獲得較純組分。缺點(diǎn)是離心時(shí)間較長(zhǎng),需制備梯度液,操作要求高。按照離心分離原理,密度梯度離心又可分為速率區(qū)帶離心法(ratezonalcentrifugationmethod,R-Z)和等密度離心法(isopycniccentrifugationmethod)。速率區(qū)帶離心也可稱為等區(qū)密度離心,是根據(jù)樣品中不同組分粒子所具2020
10-272020
10-23如何應(yīng)對(duì)細(xì)胞株系開發(fā)數(shù)據(jù)挑戰(zhàn)
細(xì)胞株開發(fā)是眾多具有重大數(shù)據(jù)挑戰(zhàn)的工作流程之一。與任何篩選過程一樣,樣本通量帶來(lái)了數(shù)據(jù)量的挑戰(zhàn)。當(dāng)使用多種分析工具以不同格式生成不同類型的數(shù)據(jù)時(shí),這就變得更加具有挑戰(zhàn)性。這不僅需要在不同的孔板和孔之間移動(dòng)數(shù)據(jù),而且整個(gè)過程可能會(huì)延長(zhǎng)數(shù)月。在整個(gè)過程中,必須對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行追蹤,以確保進(jìn)入生產(chǎn)的任何細(xì)胞株都有必要的歷史數(shù)據(jù)(例如單克隆性的證明),并且為了報(bào)告需要,所有的數(shù)據(jù)都可以被方便地訪問。在這里,我們將描述在Biomeki7工作站(圖1)上自動(dòng)化細(xì)胞株開發(fā)如何克服與此工作流程相關(guān)的許多數(shù)據(jù)挑戰(zhàn)。圖12020
10-22還在為細(xì)胞數(shù)量和活率分析的可靠性和一致性煩惱嗎?
還在為細(xì)胞數(shù)量和活率分析的可靠性和一致性煩惱嗎?讓Vi-CELLBLU幫您消除這些困擾!現(xiàn)在生物藥的制備和生產(chǎn),基本離不開動(dòng)物細(xì)胞等表達(dá)系統(tǒng),特別是像CHO細(xì)胞作為宿主生產(chǎn)治療性單抗藥物,已經(jīng)在生物制藥企業(yè)普遍使用。上面左圖是Vi-CELLBLU測(cè)試CHO細(xì)胞的拍攝照片,右圖是癌細(xì)胞的拍攝照片(其中綠色為活細(xì)胞,紅色為死細(xì)胞,)而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞數(shù)量和活率地準(zhǔn)確檢測(cè),將直接影響細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化、生產(chǎn)條件的改變甚至終生物藥產(chǎn)品的質(zhì)量,特別是對(duì)于直接作為藥物的治療細(xì)胞,譬如CAR-T細(xì)胞,這2020
10-222020
10-192020
10-192020
10-19小貝講堂之離心常用術(shù)語(yǔ) - 離心力和相對(duì)離心力
小貝講堂之離心常用術(shù)語(yǔ)–離心力和相對(duì)離心力在生命科學(xué)研究中,離心是一種*的技術(shù)手段,更是實(shí)驗(yàn)室中|常見的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。但是你真的了解這門技術(shù)嗎?你是否知道離心的原理,了解如何選擇合適的轉(zhuǎn)頭、離心管和離心方法呢?小貝離心課堂重新開課,帶你玩轉(zhuǎn)離心機(jī),快來(lái)加入我們吧!離心原理學(xué)習(xí)一門技術(shù)勢(shì)必要先從了解其原理開始。我們可以通過簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來(lái)理解離心的基本原理。首先我們來(lái)觀察在重力作用下顆粒的沉降:抓一把沙子和泥土的混合物放到裝有水的容器里搖勻,然后把容器置于桌上,觀察到在地球引力作用下大量的顆粒立即沉淀到容2020
10-19小貝講堂之離心常用術(shù)語(yǔ) - 沉降系數(shù)
離心課堂之常用術(shù)語(yǔ)–沉降系數(shù)沉降系數(shù)迄今為止,離心工作的重點(diǎn)的就是生物顆粒的制備,所以了解顆粒的沉降特性是至關(guān)重要的。沉降系數(shù)是生物大分子極其重要的物理參數(shù),通過它可以了解生物大分子的相對(duì)分子量、分子形狀和水化程度等。早在1940年,Svedberg和Pedersen發(fā)展了用分析超速離心技術(shù)來(lái)測(cè)量生物大分子的沉降系數(shù)和分子量,直至目前分析超速離心方法仍然是測(cè)定生物大分子沉降系數(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)。Svedberg在實(shí)驗(yàn)過程中定義了沉降系數(shù)(S,Svedberg):s就是單位離心加速度的作用下顆粒移動(dòng)的速度2020
10-162020
10-152020
10-14【離心課堂】轉(zhuǎn)頭效率K因子與離心時(shí)間
轉(zhuǎn)頭的k值轉(zhuǎn)頭的k值(又稱k因子或k系數(shù))用以衡量轉(zhuǎn)頭的沉淀效率。所有的離心機(jī)廠家在轉(zhuǎn)頭出廠時(shí)都計(jì)算了制備型轉(zhuǎn)頭的k值,轉(zhuǎn)頭k值通過在轉(zhuǎn)頭運(yùn)行至|高轉(zhuǎn)速、離心管裝滿樣品時(shí)計(jì)算得到的,其計(jì)算公式如下:(1)?k–轉(zhuǎn)頭的k值rmax–大半徑,指旋轉(zhuǎn)軸到離心管底端的垂直距離rmin–小半徑,指旋轉(zhuǎn)軸到離心管頂端的垂直距離ω–角速度由于(2)將公式(2)代入公式(1)可得到以下轉(zhuǎn)頭k值的計(jì)算公式:(3)由上得出轉(zhuǎn)頭k值是與轉(zhuǎn)頭的|高轉(zhuǎn)速和形狀有關(guān)。|高轉(zhuǎn)速*一樣的轉(zhuǎn)頭,離心管與軸的角度越小,也就是rma2020
10-102020
10-10液體處理專家如何自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化捕獲測(cè)序文庫(kù)制備
目標(biāo)區(qū)域捕獲測(cè)序技術(shù),是根據(jù)已知特定基因組區(qū)域序列設(shè)計(jì)寡核苷酸探針,通過雜交將目標(biāo)區(qū)域捕獲富集進(jìn)行二代測(cè)序。其針對(duì)目標(biāo)區(qū)域深度測(cè)序,增加了檢查靈敏度和準(zhǔn)確性。既滿足研究需求,又降低測(cè)序成本,在科研、臨床中均備受關(guān)注。液體處理專家貝克曼庫(kù)爾特推出Biomek自動(dòng)化捕獲測(cè)序方案,幫助您實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化的捕獲測(cè)序。由自動(dòng)化工作站進(jìn)行基因捕獲,可以減少手工操作時(shí)間,提高工作效率,增加結(jié)果的重復(fù)性和均一性。Biomek工作站可實(shí)現(xiàn)從核酸提取,文庫(kù)構(gòu)建,定量混樣到捕獲的整體實(shí)驗(yàn)流程。Figure1.捕獲測(cè)2020
09-232020
09-162020
09-15速度!12分鐘Pooling 384個(gè)NGS文庫(kù)
Pooling是測(cè)序文庫(kù)上機(jī)前的臨門一腳。經(jīng)過數(shù)小時(shí)乃至幾天的實(shí)驗(yàn),初始樣品終于變成濃度、片段大小都符合質(zhì)控指標(biāo)的library嗷嗷待測(cè)。Pooling實(shí)驗(yàn)通常由兩位操作者協(xié)作。根據(jù)表單信息將文庫(kù)歸一化到一定濃度,再將想要合并測(cè)序的文庫(kù)混合,耗時(shí)耗力。事實(shí)上Pooling*可以不需要密集的吸液移液操作,不需要這么多時(shí)間和精力投入,甚至就不需要移液器和吸頭。采用Echo聲波移液系統(tǒng),12分鐘即可完成384個(gè)文庫(kù)pooling1,而手工完成歸一化和pooling需耗時(shí)長(zhǎng)達(dá)3小時(shí)。Echo通過聚焦聲波2020
08-282020
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