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化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數據分析2019/07/29

化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數據分析熒光定量PCR（qPCR）是實驗室常用的一種技術，該技術可以應用于基因表達分析、基因分型、病原體檢測、SNP分析等。qPCR實驗操作簡單，原理易懂，但面對一堆凌亂的數據，如何進行結果分析成了頭疼的問題，今天小翊將帶你學會如何化繁為簡，輕松獲得可以發表SCI的數據！qPCR常用的分析方法有相對定量和定量，需根據不同的實驗設計進行選擇。本期我們關注的是qPCR常見的應用—基因表達分析，一般選擇相對定量法。1.實驗設計假設目前需要研究光誘導對擬南芥AtSUC2

活細菌/死細菌染色試劑盒2019/07/22

產品信息產品名稱產品編號規格儲存價格Live&DeadBacterialStainingKit活細菌/死細菌染色試劑盒40274ES60100T4℃避光保存3683.00產品描述試劑盒內含兩種熒光染料DMAO和EthD-III，可分別將活細菌和死細菌染上綠色和紅色。其中DMAO是一種綠色核酸熒光染料，可染色活細菌和死細菌。EthD-III是一種紅色核酸熒光染料，僅染色細胞膜受損的死細菌。將DMAO和EthD-III混合使用染色時具有完整細胞膜的細菌呈現綠色，而具有受損細胞膜的細菌呈現綠色和紅色。

新品推薦|反轉、高質量cDNA，用Yeasen第三代逆轉錄酶預混液2019/07/17

新品推薦|反轉、高質量cDNA，用Yeasen第三代逆轉錄酶預混液你的逆轉錄，交給YEASEN三代逆轉錄酶來守護！Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)是基于翊圣Hifair®ⅢReverseTranscriptase而開發的即用型預混液。該產品可耐受高達65℃的反應溫度，適合具有復雜二級結構的RNA模板的逆轉錄；同時增強了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉錄。產品帶基因組DNA去除成分，適

活死細菌、細胞檢測——探尋生命的奧秘2019/07/17

活死細菌、細胞檢測-----探尋生命的奧秘背景介紹真核生物（哺乳動物細胞）和原核生物（細菌）細胞增殖和細胞死亡間平衡對維持細胞有機的發育與生命的維持至關重要，如果出現失衡將導致各種疾病的發生。活死狀態是研究生物增殖生長的常見研究目的，例如；對于真核活死細胞主要通過分析細胞質膜完整性與細胞內酯酶活性，經過特定儀器觀察判斷，為研究細胞狀態提供了一種方便的方法，同時分析活細胞與死細胞，用于評估細胞的活力。可以應用于大多數的真核哺乳動物細胞，但不適用于真菌和酵母。主要對于藥物研究、毒性判定、細胞生長狀態

揭秘各種主流二代測序儀，無瓜攻略2019/07/10

揭秘各種主流二代測序儀，無瓜攻略隨著基因領域研究的不斷深入，自sanger測序實現對堿基信息的可讀取后，更高通量的需求使得二代測序在基因組測序、臨床檢測和生物制藥等領域展現出的潛力。對于剛入行的小伙伴，面對各式各樣的測試平臺好奇又迷茫，Roche454、Illumina、ThermoFisher，以及國產MGI平臺等，這么多測序儀，他們的特點是什么？背后的發展歷程是怎樣的？今天小翊借花獻佛，梳理了目前主流的二代測序平臺，讓我們了解二代測序這十幾年的發展歷程。表1二代測序部分儀器展示備注：圖片來源

脂蛋白—研究代謝運輸的助手2019/06/25

脂蛋白—研究代謝運輸的助手背景介紹脂蛋白（lipoproteins），與蛋白質結合在一起形成的脂質-蛋白質復合物。脂蛋白中脂質與蛋白質之間沒有共價鍵結合，多數是通過脂質的非極性部分與蛋白質組分之間以疏水性相互作用而結合在一起。通常用溶解特性、離心沉降行為和化學組成來鑒定脂蛋白的特性。YEASEN（翊圣生物）致力于為診斷試劑公司和廣大科研用戶提供高品質的低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白（HDL）。產品應用常規脂蛋白的應用乙酰化脂蛋白的應用氧化性脂蛋白的應用相關產品（一）低密度脂蛋白低密度脂蛋白

qPCR文庫定量專題2019/06/20

HieffNGS®LibraryQuantificationKitforIllumina®——千真萬確，精益求精產品簡介本產品是用于lllumina®平臺高通量測序文庫濃度定量的試劑盒，提供定量所需的DNA標準品、qPCRMasterMix、定量擴增引物和參比染料ROX。其中，DNA標準品包含經梯度稀釋的六份450bp的雙鏈DNA//片段溶液，濃度為20pM-0.0002pM；擴增引物對根據NGS文庫接頭序列P5和P7設計，可保證特異性擴增雙端接頭完整的文庫分子；qPCRMasterMix是基于

快速型DNA建庫試劑盒2019/06/20

HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKit——快速型DNA建庫試劑盒產品描述HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKitforIllumina®是針對lllumina®高通量測序平臺專業開發設計的轉座酶法建庫試劑盒。適用于1ng/50ng的基因組DNA、cDNA、擴增子（500bp）等樣本的建庫。與常規分步法建庫相比，僅需10min即可完成DNA片段化、末端修復和接頭連接過程，顯著縮短建庫時間，并獲得優異的測序質量。產品原理在Tran

5 min了解DNA磁珠的前世今生2019/06/14

磁珠是高通量測序過程*產品，通過磁顆粒活性基團在一定條件下可與核酸結合和解離的原理，將樣本中目的片段分離。可實現對核酸樣本的高通量自動化操作，廣泛應用于基因測序以及分子診斷領域。背景篇磁珠的發明構想初來自于挪威科技大學的化學家JohnUgelstad，他在1976年以聚苯乙烯為主要材料，制作出均勻磁化的球體粒子。1979年Vogelstein等報道在高濃度典化鈉存在的條件下，玻璃粉末作為吸附劑用于從瓊脂糖凝膠中提取DNA片段，而后基于硅膠和其他具有親水性表面載體的固相核酸純化技術廣泛發展起來。而

Benzonase Nuclease 核酸酶2019/06/12

核酸酶，又稱廣譜核酸酶，英文名稱BenzonaseNuclease，一種來源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內切酶，可在鏈內任意核苷酸間進行切割，將核酸*消化成3-8個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸，能夠在非常廣泛的條件下降解所有形式的（雙鏈，單鏈，線狀，環狀，天然或變性）DNA和RNA。隨著技術的不斷進步，科學家對于效率的要求越來越高，在消耗同樣的時間和精力下，他們更愿意選擇快速，的方法。傳統核酸去除主要是超聲法和DNase/RNase酶法，因為對應的實驗周期長、去除效率低，

NGS文庫構建產品選擇指南2019/05/30

NGS文庫構建產品選擇指南YEASEN與NGS高通量測序是對傳統測序技術的革命性創新，大力推動了科學技術的發展。Yeasen長期以來一直對高通量測序技術保持高度關注。自2009年成立以來，公司致力于分子酶的創新開發，結合自身多年分子酶研發經驗，集結了在基因組學和生物信息學等領域有豐富經驗的科研人員組建了高通量測序研發團隊，成功推出了高通量測序上游樣本文庫制備的完整產品線。不僅可以提供的建庫試劑盒，同時還可以根據客戶的需求定制開發測序相關產品。廣泛應用于醫學檢測、科學研究等各個領域。公司注重產品品

qPCR進階攻略——帶你玩轉儀器設置！2019/05/20

熒光定量PCR實驗是分子實驗室常用的一項技術。持續關注小翊的應該都掌握了高質量cDNA的獲取方法，引物設計指南以及反應體系的配制技巧（還未get的小伙伴戳文末鏈接），然而上機時，發現和別人的反應條件不一致卻又不敢動儀器？本期小翊將帶你玩轉qPCR儀器的設置！目前市面上的qPCR儀器種類五花八門，但基本上儀器的設置都相對一致。我們以ABI7500為例進行介紹。反應板設置實驗目的選擇：我們將實驗命名為“Yeasen”，進行“Quantitation：ΔΔCt”實驗。實驗方法選擇：如選用SYBRGre

測序數據不好？是不是建庫出了問題？！2019/05/17

HB190313測序數據不好？是不是建庫出了問題？！——從測序數據看文庫構建高通量測序中的文庫構建指的是在DNA兩端連接特定的接頭從而使其符合測序平臺要求的過程，在高通量測序過程中，文庫質量直接影響終測序數據的質量，打個比方，如果文庫上機測序的濃度很低，樣本在FlowCell上擴增所形成的DNA樣本簇就會很少，測序數據量也將減少，這就可能導致測序失敗，所以我們說文庫的質量控制和質量評估也是NGS中的關鍵步驟。文庫如何質控？評估文庫質量的方法有哪些？n文庫質控：文庫在上機之前都有會進行質量檢測，質

這有一份FFPE樣本建庫的檔案，還不趕緊Pick?2019/05/17

這有一份FFPE樣本建庫的檔案，還不趕緊Pick?什么是FFPE？FFPE（Formalin-FixedａndParrffinEmbedded），即福爾馬林固定石蠟包埋樣本。由于這種處理方法能夠較長時間地保存組織或制備檢驗所需的組織標本，所以在臨床病理檢驗、腫瘤基因檢測中應用廣泛。在世界范圍內，大約有數十億份組織樣品保存在醫院或者組織樣品庫中，其中絕大多數是使用福爾馬林固定石蠟包埋的方法處理的樣品。FFPE樣本通常代表了珍貴且來源廣泛的生物醫學研究材料，為闡明疾病機制、回顧性研究等提供了寶貴的資

10 min ，get甲基化研究速成指南2019/05/16

什么是DNA甲基化DNA甲基化（DNAmethylation）是DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下改變遺傳表現。DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5'碳位共價鍵結合一個甲基基團。DNA甲基化的結果，一般是使甲基化位點的下游基因表達量變少。圖1：DNA甲基化原理圖為什么研究DNA甲基化DNA甲基化是早發現的基因表觀修飾方式之一，可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化在維持細胞正常功能、傳遞基因組印記、胚胎發育、腫瘤發生等方面發揮重要作

小分子化合物專題2019/05/15

小分子化合物專題一、信號通路信號通路是指當細胞里要發生某種反應時信號從細胞外到細胞內傳遞了一種信息，細胞要根據這種信息來做出反應的現象。信號通路（signalpathway）的提出早可追溯到1972年，不過當時被稱為信號轉換（signaltransmission）。1980年M.Rodbell在一篇綜述中提到信號轉導（signaltransduction），此后該概念就被廣泛使用了。信號通路是指能將細胞外的分子信號經細胞膜傳入細胞內發揮效應的一系列酶促反應通路。這些細胞外的分子信號（稱為配體，l

如何定量低豐度目的基因的表達2019/01/28

如何定量低豐度目的基因的表達（含詳細解決方法）有時候，qPCR實驗會成為阻礙你課題順利開展的強勢攔路虎！看似簡單的基因表達量差異驗證，當遇到低豐富表達的基因時，也許就舉步維艱。模板獲取困難導致的RNA提取量少或RNA質量不佳，即使選蕞佳的試劑、篩選出良好的引物，也有可能qPCR定量得到的內參基因CT值在18-20個cycle，而目的基因在31-35個循環。遇到這種情況，你是怎么解決的呢？qPCR在低豐度表達基因定量中的局限性基因的豐度是指基因在基因組中的拷貝數。可分為高豐度，中等豐度和低豐度。低

dsDNA HS Assay Kit for Qubit®數據測評2018/05/23

行走江湖靠的就是實力dsDNAHSAssayKitforQubit®數據測評——簡便、靈敏、準確、穩定dsDNAAssayKitforQubit®是Yeasen生物開發的專門用于Qubit®熒光儀或熒光酶標儀的試劑盒，線性范圍0.2-100ng，即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，也可以選擇性的檢測dsDNA，且耐受較高濃度的蛋白質、鹽類、洗滌劑等污染物。產品名稱產品編號規格儲存dsDNAHSAssayKitforQubit®12640ES60100T2-8℃dsDNAHSAssa

文獻 | Molecular Plant: 解密水稻半矮桿與應用之謎2018/05/23

文獻|MolecularPlant:解密水稻半矮桿與應用之謎倒伏是影響水稻高產穩產的主要限制因素之一。自20世紀60年代以來，以作物矮化育種為標志的“綠色革命”主要是利用赤霉素合成基因SD1的突變體，培育半矮稈性狀，提高作物（水稻）的抗倒伏能力，使水稻產量得到了大面積的顯著增加。經過多年研究，雖然在水稻中發現了超過60個基因可以導致半矮稈性狀，但這些基因除影響莖稈長度還影響其它農藝性狀，難以應用于培育抗倒伏品種。目前，SD1的突變仍然是培育水稻半矮稈性狀的主要基因。由于單一的可用基因，抗倒伏性狀

淺談DNA磁珠的作用原理2018/05/23

作為DNA分選磁珠的生產廠商，我們zui經常被客戶問到的問題就是：高通量測序（NGS）文庫制備時，DNA磁珠為什么可以用來純化和分選文庫？在這里我們整理相關的資料，對這個問題做簡單的闡述。分選磁珠的作用原理是基于一種固相載體可逆化固定（SPRI）的分離純化方法。磁珠體系中一般包含：磁珠、DNA、聚乙二醇（PEG）、以及鹽離子等，在一定濃度的PEG和鹽離子環境中，DNA可吸附到羧基修飾的高分子磁珠表面（即固相載體），該過程是可逆的，在適當條件下，結合的DNA分子可以被洗脫回收。納米級別的磁珠表面性