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細胞傳代具體操作細節2015/09/24
通常情況下,我們一般將細胞分為兩類,一類是貼壁細胞,一類是懸浮細胞,很多客戶在給細胞傳代的時候,往往因為有些細節沒有注意好,導致細胞存活率低、狀態差、活性不好,今天我們來具體講下這兩類細胞傳代時的具體細節:一、貼壁細胞傳代1.提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。2.吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞。3.加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入
細胞復蘇的具體操作步驟2015/09/24
上一節我們講到細胞凍存的具體操作步驟,這一節我們來詳細了解下細胞的復蘇的操作步驟及要點:細胞復蘇操作要點:1、將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。2、將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。3、用75%酒精擦
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