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原代細胞、細胞株與細胞系的解釋與選擇2023/06/07

從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。原代細胞生長緩慢，一般認為，原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。原代細胞是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單

細胞選擇標準參考，養細胞必看！2023/06/07

經常聽到不少小伙伴抱怨——細胞養不出來，實驗難以進行，其實這也正常，細胞身嬌體貴難養活，養好細胞實屬不易，細胞沒養好，多半是你沒有給你心愛的細胞建造一個溫暖宜居的“房子”。首先，什么是細胞培養?細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個bi不可少的過程，細胞培養本身就是細胞的大規?？寺?。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術bi不可少的環節，而且細胞培養本

標準品的命名規律及注意事項2023/06/07

標準品的命名規律：1、工作標準品shou次標定的批號取四位數，前兩位為代表標準品標定的年份，后兩位為流水號，例：2010年第一次標定批號為1001，第二次使用新制備的樣品進行標定批號則為1002。2、若同一批次重新標定則在原批號加后綴，例如1001-1，第二次復標則為1001-2，依次類推。3、內部基準標準品按上述原則載加P，例如P1001。無特殊規定時，有效期及復標期如下：1、如無特殊情況，工作標準品的含量每半年復標一次或另取新生產的樣品標定。當標準品暫不使用時，復標周期可能超過規定周期，在使

標準物質在化學計量和測量中的作用2023/06/07

隨著全球經濟一體化步伐加快，食品安全、生物、環保等領域的檢測技術飛速發展，對于測量結果可靠性需求也不斷增加。標準物質作為分析測量過程中的“化學砝碼”，可實現準確一致的測量，保證量值有效傳遞。那究竟什么樣的物質才可稱為標準物質？標準物質的定義及特點國家質檢總局1987年發布的《標準物質管理辦法》指出“標準物質是指用于統一量值的標準物質”。2012年實施的計量技術規范JJF1001-2011《通用計量術語及定義》中對標準物質則有了更清晰的定義：“標準物質又稱參考物質（ReferenceMateria

大腸桿菌菌株的分型及區別簡介2023/06/06

1：DH5a菌株DH5a是一種常用于質?？寺〉木辍.coliDH5a在使用pUC系列質粒載體轉化時，可與載體編碼的β－半乳糖苷酶氨基端實現α－互補?？捎糜谒{白斑篩選鑒別重組菌株?；蛐停篎-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3)菌株該菌株用于高效表達克隆于含有噬菌體T7啟動子的表達載體（如pET系列）的基因。T7

微生物檢驗必須掌握的三大耐藥機制2023/06/06

你知道什么是微生物檢驗嗎?你對微生物檢驗了解嗎?下面是遠慕生物為大家帶來的關于微生物檢驗必須要知道的三大耐藥機制的知識，一起了解下吧。一、產生滅活抗生素的各種酶1、β—內酰胺酶(β-lactamase)β—內酰胺類抗生素都共同具有一個核心β—內酰胺環，其基本作用機制是與細菌的青霉素結合蛋白結合，從而抑制細菌細胞壁的合成。產生β—內酰胺酶是細菌對β-內酰胺類抗菌藥物產生耐藥的主要原因。細菌產生的β-內酰胺酶，可借助其分子中的絲氨酸活性位點，與β—內酰胺環結合并打開β—內酰胺環，導致藥物失活。迄今為

溶液的酸堿度pH值為何如此重要？2023/06/06

在日常工業過程中，我們都需要測試水質的pH值，即酸堿度。大家都知道弱堿性的水是健康的，什么是弱堿性呢，也就是在25度下，pH在7.1-7.5之間的水就是弱堿性的水。什么是pH值呢，pH值即氫離子活度的負對數，zui簡單的方法是用pH試紙來檢測，但這種方法不準確，因此現在都用pH電極來檢測，不僅方便，還能快速現場檢測。pH測試的重要性主要體現在以下幾個方面：化學反應速度pH值會影響溶液的化學反應速度，比如在pH值5時，氫氟酸對玻璃的腐蝕性就沒有那么強?；瘜W藥品的溶解度試劑在水中的溶解度也跟溶液的酸

細菌鑒定的酶類試驗介紹2023/06/06

細菌鑒定的酶類試驗是細菌的生化反應中酶類的存在與否等生化特性，這些反應能夠導致反應體系的PH值變化或產生顯色物質，加入合適的酸堿指示劑或顯色劑就可以反映出來。氧化酶試驗氧化酶（細胞色素氧化酶）是細胞色素呼吸酶系統的最終呼吸酶。具有氧化酶的細菌，首先使細胞色素C氧化，再由氧化的細胞色素C使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物。試驗方法1）菌落法：直接滴加氧化酶試劑于被檢菌菌落上；2）濾紙法：取潔凈濾紙一小塊，蘸取菌少許，然后加氧化酶試劑；3）試劑紙片法：將濾紙片浸泡于氧化酶試劑中制成試劑紙片，取菌涂

分離培養基上菌落的生長現象2023/06/05

分離培養基上菌落的生長現象1.觀察菌落：菌落的各種特征包括大小、形狀、突起、邊緣、顏色、表面、透明度和粘度等。根據細菌菌落表面特征不同，可將菌落分為三型：（1）光滑型（S型）菌落（2）粗糙型（R型）菌落（3）粘液型（M型）菌落2.血瓊脂上的溶血α溶血：又叫草綠色溶血，菌落周圍血培養基變為綠色環狀；紅細胞外形完整無缺。β溶血：又稱wan全溶血，紅細胞的溶解在菌落周圍形成一個wan全清晰透明的環。γ溶血：即不溶血，菌落周圍的培養基沒有變化；紅細胞沒有溶解或無缺損。雙環：在菌落周圍wan全溶解的暈圈外

增殖培養基的成分組成介紹2023/06/05

培養基的成分包括:碳源、氮源、礦物質,以及其他必需物質。這些成分通過生物反應過程，生成生物物質、生物化工產品，并放出CO2、H2O和熱量。培養基的成分還可以由發酵過程中所需的元素出發，如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要時還有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Mo、B等。在發酵過程中某些生物本身不能合成的物質，如氨基酸、維生素或核苷酸等，必要時亦作為營養物質加入到培養基中。碳源具有雙重作用。生物在產生生物物質或生物化工產品過程中，它不僅為其提供碳源，也為其提供

微生物的三種傳統檢測方法介紹2023/06/05

傳統檢測有三種方法：1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特征?？梢酝ㄟ^顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷，得到的微生物往往并不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。3、鑒別培養基，根據微生物的代

液體細菌培養實驗操作步驟2023/06/05

以光合細菌培養方法為例光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的制備，接種和培養管理四個步驟。（一）容器、工具的消毒參考、此處從略。（二）培養基的制備1．培養用水如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配制。如果培養的光合細菌是海水種，則用天然海水配制培養基，注意在海水中加入磷元素時，不能用磷酸氫二鉀，應用磷酸二氫鉀，不然會產生大量沉淀。2．滅菌和消毒菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通

細胞培養實驗中對支原體污染的預防措施2023/06/02

細胞培養實驗室發生支原體污染的風險較高。支原體天然存在于周圍空氣（氣溶膠形式）、人的體表（攜帶和隱藏）以及未徹di消毒的器物表面，而細胞培養基中由于含有血清，營養豐富，很容易導致支原體的快速繁殖。支原體的污染肉眼不易察覺，直到嚴重的階段才會出現培養基變色、細胞異常等情況。支原體可造成細胞代謝改變，基因表達譜發生變化，從而嚴重干擾實驗進程。因此，在細胞培養過程中，定期監測是否存在支原體污染，及時預防支原體污染是每個科研人員的工作之一。為防止支原體污染細胞，可采取以下措施：1、保持無菌技術：始終在無

遠慕簡述幾種原代細胞傳代方法2023/06/02

原代細胞是指從機體的組織（如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等）經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。一股認為，培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細抱培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞瘍變、細胞工程等問題的研究。那么關于原代細胞的傳代培養，我們應該怎么做呢?一股有以下兩種方法：一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白鱷或與EDTA混合液）輕輕接動

普通細菌培養鑒定操作規程簡介2023/06/02

1檢驗目的做疾病的病原學診斷，查找于疾病有關的病原菌以及了解與疾病的關系，指導臨床治療及預后和流行病學的調查。2原理人體很多部位與外界相通，存在棲息菌群，但不致病，當菌群失調或分離到致病菌則具有臨床意義；另外機體某些部位是無菌的，如檢出則視為致病菌。并排除采樣及操作污染。3標本要求（1）標本類型：，骨髓，腦脊液，胸水，腹水，尿液，等；痰液，前列腺液，膿液，組織分泌物或穿刺液等。（2）標本采集：見標本采集手冊（3）標本儲存和運輸：室溫放置，室溫運輸并立即送檢。人泌尿生殖道標本如白帶前列腺液等需臨床

遠慕分享：細菌鑒定的五種方法2023/06/02

1．生化鑒定是細菌鑒定中最重要的一種，主要是借助細菌對營養物質分解能力的不同及其代謝產物的差異對細菌進行鑒定，包括蛋白質分解產物試驗、觸酶試驗、糖分解產物試驗、氧化酶試驗、凝固酶試驗等。2．血清學鑒定適用于含較多血清型的細菌，常用方法是玻片凝集試驗，并可用免疫熒光法、協同凝集試驗、對流免疫電泳、間接血凝試驗、酶聯免疫吸附試驗等方法快速、靈敏地檢測樣本中致病菌的特異性抗原。用已知抗體檢測未知抗原（待檢測的細菌），或用已知抗原檢測患者血清中的相應抗細菌抗體及其效價。血清學鑒定操作簡單快速，特異性高，

實驗中使用培養箱需注意的技術細節2023/06/01

使用培養箱注意一些技術細節：（1）培養箱應由專人負責管理，操作盤上的任何開關和調節旋扭一旦固定后，不要隨意扭動，以免影響箱內溫度，CO2、濕度的波動，同時降低機器的靈敏度。（2）所加入的水必須是蒸餾水或無離子水，防止礦物質儲積在水箱內產生腐蝕作用。每年必須換一次水。經常檢查箱內水是否夠。（3）箱內應定期用消毒液擦洗消毒，擱板可取出清洗消毒，防止其它微生物污染，導致實驗失敗。（4）定期檢查超溫安全裝置，以防超溫。方法為按進監測報警按扭，轉動固定螺絲，直到超溫報警裝置響，然后關閉超溫安全燈。（5）如

影響免疫組化的因素及對策2023/06/01

一）免疫組化染色假陽性及其對策1、消除內源酶的影響在涉及免疫過氧化酶的各種染色中，均用過氧化物酶來標記抗體，酶的作用是催化底物，使顯色劑顯色，正常組織中也含有一定量的過氧化物酶，其同樣也能催化底物顯色，而影響免疫組化染色的特異性，因此在加入標記酶前應設法將其滅活，以保證染色反應的特異性。通常情況下，去除內源酶的方法是先用3%的過氧化氫溶液作用，但在含有豐富血細胞的標本中，由于血細胞中存在大量具有活性的過氧化物酶，能與過氧化氫產生強烈的反應，產生氣泡而破壞組織結構和細胞形態。在OCT包埋的冰凍切片

質粒克隆載體的設計和構建的原則說明2023/06/01

①選擇合適的出發質粒出發質粒也叫親本質粒，它應含有質粒克隆載體bi備的元件，如復制起始位點、選擇標記基因、克隆位點、啟動子和終止子等。②正確獲得構建質?？寺≥d體的元件一般采用限制性核酸內切酶切割出質粒DNA分子，獲得含有某種元件的DNA片段，還可以采用PCR技術從靶DNA中擴增出含某種元件的特異性DNA片段。③組裝合適的選擇標記基因構建的質粒克隆載體應該組裝什么樣的選擇標記基因，必須根據要轉化的受體細胞的特性來決定。④選擇合適的啟動子為了構建表達質粒的克隆載體，必須組裝合適的啟動子，當設計真核生

質粒轉化大腸桿菌實驗操作步驟2023/06/01

該實驗主要有兩個用途：1．重組質粒的鑒定。當質粒的重組或其它載體重組后，通常會發生質粒的重組失敗，包括質粒的自身環化。因而要求進行篩選，把重組成功的質粒找出來。在目前常用的質粒和其它載體中含有相應的抗生素抗性基因，一旦重組成功，質粒環化（包括自身環化），抗生素抗性基因表達，被轉化的大腸桿菌便具備抗相應抗生素的能力，可以含該抗生素的培養基中生長傳代，不然，重組失敗，大腸桿菌便不能抵抗該抗生素而死亡。2.為擴增質粒和其它載體作準備。由于大腸桿菌繁殖快，在適宜的條件下繁殖一代僅需要20~30分鐘，而且