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2021
11-24

細胞培養的小常識——體內、外細胞的差異和分化
現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體；細胞工程中更是離不細胞培養，雜交瘤單克隆抗體，*是通過細胞培養來實現的，既使是現在飛速發展的基因工程抗體也離不開細胞培養。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經過細胞培養過程才能實現，發酵工程和酶工程有的也與細
2021
11-23

血清的使用與儲存：正確的使用及保存血清，使血清發揮應有的作用
使用前處理：大部分血清在使用前必須滅活處理，即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補體成分，避免補體對細胞產生毒性作用。血清經過滅活也會損失一些對細胞有利的成分，如生長因子，因此也有人提出血清不經滅活直接用于培養，這樣做的前提是確認血清中不含補體成分。對于一些品質高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經滅活直接用于細胞培養。儲存條件：血清一般儲存于－20℃，同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清后，首先要滅活處理，然后分裝成小包裝，儲存于－20℃，使用前融化。融化時最好現置于4℃。融化后的血清在4℃
2021
11-23

血清質量的鑒定一般包括哪幾個方面
理化性質：如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內毒素等。蛋白含量包括血清總蛋白含量（不低于35-45g/L）、球蛋白含量（應小于20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一項非常重要的指標，血清中球蛋白主要是抗體，球蛋白含量越低血清質量越高。血紅蛋白也是越低越好。微生物檢測：包括細菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對支原體、病毒的檢測，支原體是一種很小的微生物，可通過孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光學顯微鏡下難于察覺，細胞也能生長繁殖，但會影響實驗結果。檢測支原體的方法很
2021
11-22

細胞培養的天然培養基-血清
天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期，體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養基所替代。目前廣泛使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是不可少。一、血清(serum)細胞培養的發展，培養基的質量又是關鍵，而培養基的主要成份中動物血清對細胞的生長繁殖發揮著重要甚至是難以替代的作用。在動物血清的應用中牛血清又是最為廣泛的
2021
11-22

支原體常規檢測方法匯總（之一）
養細胞的小伙伴，最怕遇到的，大概就是細胞污染了。這細菌和真菌污染好辨別，處理起來雖然麻煩，但也不是毫無辦法。相比起來，支原體污染才是防不勝防。顯微鏡很難捕捉到它們的身影，與細胞共存在同一培養體系下，還跟細胞搶吃搶喝。可憐弱小又無助的細胞根本不是支原體的對手，只能茍延殘喘，狀態一代不如一代，導致實驗結果出現偏差。多數情況下，發現細胞疑似支原體污染，直接丟掉然后清理環境即可。但在一些特殊實驗，比如：細胞保種、抗體藥生產、疫苗生產或是細胞治療過程中，則需要對細胞例行支原體檢測，以確保細胞的純凈。支原體
2021
11-18

常用培養器皿及清洗消毒
細胞培養需要大量消耗性物品，如玻璃器皿、金屬器皿、塑料、橡膠制品、布類、紙類等，因此掌握清洗、消毒知識，學會清洗、消毒方法是從事細胞培養工作必須的。一、清洗離體條件下，有害物質直接同細胞接觸，細胞對任何有害物質十分敏感，極少殘留物都可以對細胞產生毒副作用。因此，新的或重新使用的器皿都必須認真清洗，達到不含任何殘留物的要求。（一）玻璃器皿的清洗一般經過浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四個步驟。1、浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡，軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗，然后用5％鹽
2021
11-18

帶您了解細胞培養的無菌環境
培養環境無毒和無菌是保證細胞生存的首要條件。當細胞放置于體外培養時，與體內相比細胞丟失了對微生物和有毒物的防御能力，一旦被污染或自身代謝物質積累等，可導致細胞死亡。因此在進行培養中，保持細胞生存環境無污染、代謝物及時清除等，是維持細胞生存的基本條件。一、無菌室無菌室的結構：一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。無菌室的消毒和防污染：為保持無菌狀態，經常消毒是必要的，通常采用每日（使用前）紫外照射（1－2小時），每周甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時）和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒
2021
11-17

細胞培養的基本原理與技術
現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體；細胞工程中更是離不細胞培養，雜交瘤單克隆抗體，*是通過細胞培養來實現的，既使是現在飛速發展的基因工程抗體也離不開細胞培養。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經過細胞培養過程才能實現，發酵工程和酶工程有的也與細
2021
11-17

細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。二、取材在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首ci培養稱為原代培養。理論上講各種動物和
2021
11-16

支原體qPCR檢測試劑盒的特點及操作步驟
特點1.內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。3.高靈敏度，最di檢測限可達到≤10CFU/ml。4.有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。5.有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。操作步驟第1步：樣本處理a.細胞培養上清b.生物藥或需遵循藥典的樣本說明：①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測
2021
11-16

DIY外泌體專用血清的常用方法
外泌體大家應該都很熟悉。1983年，在綿羊網織紅細胞中發現了現在生物學研究領域炙手可熱的“小網紅”——一種特殊囊泡結構，并與1987年正式被命名為“exosome”。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。為細胞間通訊的重要媒介，它像一個信使，為細胞與胞外環境傳遞信息，保障機體的正常工作。越來越多的科研人員投入到外泌體的研究中，根據PubMed統計顯示，最近幾年，外泌體研究呈爆炸增長。外泌體的研究離不開細胞培養。以腫瘤相關外泌
2021
11-15

帶您了解微載體培養技術
一、微載體培養應用此技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前*的最有發展前途的一種動物細胞大規模培養技術，其兼具懸浮培養和貼壁培養的優點，放大容易。目前微載體培養廣泛用于培養各種類型細胞，生產疫苗、蛋白質產品，如293細胞、成肌細胞、Vero細胞、CHO細胞。使用較多的反應器有兩種：貝朗公司的BIOSTAT?B反應器，使用雙槳葉無氣泡通氣攪拌系統；NBS公司的CelliGen、CelliGe
2021
11-15

如何大程度降低血清中的病毒風險？
科研實驗中，細胞的體外培養一直是一個重要環節。細胞要養好，就要用好血清，如Ausbian®特級胎牛血清，它適合各種細胞培養，尤其適合難養細胞，如：干細胞、肝細胞，神經細胞，原代培養、細胞融合、轉染細胞等。細胞培養的路上，有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的平皿之中，細胞點點，引無數英雄競掛東南枝。正所謂“萬事開頭難”，即便是細胞復蘇與保存這兩件看似簡單的事情，也能造成實驗汪內心無比巨大的陰影面積。好在小魚這里有本細胞培養秘籍，可讓細胞這個熊孩子*變為你的貼心小棉襖。我們都知道，血清是細胞培
2021
11-12

細胞培養那點事兒
細胞培養的路上，有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的平皿之中，細胞點點，引無數英雄競掛東南枝。正所謂“萬事開頭難”，即便是細胞復蘇與保存這兩件看似簡單的事情，也能造成實驗汪內心無比巨大的陰影面積。好在小魚這里有本細胞培養秘籍，可讓細胞這個熊孩子*變為你的貼心小棉襖。儲存條件-20°C凍存。胎牛血清首ci解凍后，應按單次習慣用量分裝，分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清，應在一周內用完。為保證細胞培養的最佳效果，血清和培養基的配置，應遵循“現用現配”原則。配好的培養液，應于一周內
2021
11-12

給實驗室新同學們的一些必讀知識
細胞（英文名：cell）并沒有統一的定義，比較普遍的提法是：細胞是生物體基本的結構和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成，但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現。一般來說，細菌等絕大部分微生物以及原生動物由一個細胞組成，即單細胞生物，高等植物與高等動物則是多細胞生物。細胞可分為原核細胞、真核細胞兩類，但也有人提出應分為三類，即把原屬于原核細胞的古核細胞獨立出來作為與之并列的一類。研究細胞的學科稱為細胞生物學。細胞體形極微，在顯微鏡下始能窺見，形狀多種多樣。主要由細胞核與細胞質構成，表面
2021
11-11

科研人員們：你用的血清夠安全嗎？
科研實驗中，細胞的體外培養一直是一個重要環節。細胞要養好，就要用好血清，如Ausbian®特級胎牛血清，它適合各種細胞培養，尤其適合難養細胞，如：干細胞、肝細胞，神經細胞，原代培養、細胞融合、轉染細胞等。血清可以為細胞生長提供必要的營養支持。大部分的細胞培養都需要用到血清。很多小伙伴日常的工作學習都在與這些動物血清打交道，那么你有沒有關注過這些產品的生物安全問題呢？血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本
2021
11-11

冰冷還是溫暖？你的感受由它決定！
憑借發現了溫度和觸覺的受體，DavidJulius與ArdemPatapoutian斬獲2021年諾貝爾生理學或醫學獎。觸覺使我們感受這個世界的最直接途徑之一：春風拂面、驕陽似火、秋日暖陽、冰天雪地……這些真切的感受都是觸覺帶給我們的。我們究竟是如何感受到，溫度或者壓力帶給我們的觸感上的變化？很長一段時間，科學家們并沒有給出一個明確的答案。而就在今年，諾貝爾獎的得主給了我們答案。今天我們就來一起討論一下，我們的身體，是如何感受這個世界的。辣椒素與TRPV1，辣椒素是辣椒的活性成分。它對哺乳動物包
2021
11-10

揭示多能干細胞維持基因組穩態新機制
多能干細胞是個體發育的基礎，也是再生醫學的重要種子細胞之一。由于發育地位特殊，多能干細胞基因組具高度穩態（如小鼠胚胎干細胞的基因組變異率僅為胚胎成纖維細胞的1/100）。盡管多能干細胞較分化細胞具更強的基因組穩態維持能力，大量擴增培養、持續的DNA復制及特殊的細胞周期往往導致基因組變異，破壞其分化潛能，并產生致瘤風險，成為多能干細胞走向臨床應用的首要障礙。研究多能干細胞維持基因組穩態的特殊機制，有助于解決應用中大量擴增培養產生的基因組變異難題，并能為體內胚胎發育失敗或缺陷研究提供新思路。中國科學
2021
11-09

跌宕三十年，干細胞療法的“前世今生”
近日，世界頂級藥企福泰制藥（Vertex）發布了關于同種異體干細胞療法VX-880治療I型糖尿病的最新臨床實驗數據，在接受VX-880治療的第90天，患者的胰島素生成功能恢復，每日胰島素需求量減少91％，同時血糖控制得到顯著改善，耐受性良好，這是證明干細胞療法可以恢復1型糖尿病患者的胰島細胞功能。這一新臨床研究成果重燃了人們對于干細胞療法的期望，面對如今沒有一款干細胞療法獲FDA批準的現狀，福泰制藥能否在干細胞領域拔得tou籌？干細胞療法又能否真正為人類所用，造福更多患者呢？帶著光環“出生”—承
2021
11-09

細胞培養——對實驗室的基本要求
細胞培養是一種無菌技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物和不受其他有害因素的影響。為防止微生物污染和有害因素的影響，細胞培養室要求環境清潔，空氣清新、干燥、無塵。細胞培養實驗室由無菌操作區、孵育區、制備區、儲藏區、清洗和消毒滅菌區6部分組成，這些區域的共同特點是房間要寬敞、明亮，地面要便于清潔、防滑，墻壁的質地光滑堅硬，儀器設備布局合理，方便操作，避免交叉干擾，陳設簡潔，便于清掃。一、無菌操作區無菌操作區是只限于細胞培養及其他無菌操作的區域，最好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。在一般環境的

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