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2017
11-17

WB試驗之如何選擇內參抗體
檢測某一個基因的表達產物或者要比較表達產物量的相對變化，方法是westernblot。而WesternBlot試驗中比較這些的前提條件是等量的細胞上樣，這樣才有比較的基礎。而人為的操作會產生一定的誤差，這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參來校正。因此選擇一個合適的內參抗體來校正上樣誤差是非常重要的。所以嚴謹的WesternBlot實驗設計中需要有良好的參照體系，后續的實驗結果分析才具有說服性。在WesternBloting實驗中，可能內參即是內部參照(InternalControl)
2017
10-10

預制膠—讓您的WB省時省力更省心
Westernblotting是一個步驟繁多的實驗，每一步都會對zui后的結果產生影響，電泳過程是其中關鍵重要的一步。好的電泳能讓目的條帶整齊，結果圖讓人眼前一亮。要做好電泳也并非易事，凝膠質量在其中扮演著重要作用。電泳的支持介質為聚丙烯酰胺凝膠，該凝膠的聚合由丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺單體在自由基的催化下完成。常用的催化聚合方法有兩種，分別為化學聚合法和光聚合法，實驗室配制凝膠通常為化學聚合。在聚合過程中，TEMED催化過硫酸銨產生自由基引發丙烯酰胺單體聚合，同時甲叉雙丙烯酰胺與丙烯酰胺鏈間產生
2017
09-21

MAPK級聯激活
絲裂原活化蛋白激酶MAPK（mitogen-activatedproteinkinase）是信號從細胞表面傳導到細胞核內部的重要傳遞者，其調節轉錄因子和相關酶的活性，參與細胞增殖、分化、轉化及凋亡的調節，并與炎癥、腫瘤等多種疾病的發生密切相關。MAPK是一組能被不同的細胞外刺激，如細胞因子、神經遞質、激素、細胞應激及細胞黏附等激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。該通路的基本組成是一種從酵母到人類都保守的三級激酶模式，包括MAPK激酶激酶（MAPkinasekinasekinase，MKKK）、MAPK
2017
09-05

抗體相關問題FAQ
1.如何保存和分裝抗體？對于許多抗體而言，分裝為小等份在-20℃或-80℃下凍存是*的保存條件。抗體保存應避免反復凍融，分裝可以zui大限度減少凍融對抗體造成的損壞，還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。但是每份不應該少于10uL。分裝的體積越小，抗體的濃度受蒸發和管壁吸附的影響就會越大。大部分情況下，抗體在4℃條件下能夠保存1-2周。但有部分特例。為了防止微生物污染，可在抗體中加入適當濃度的NaN3。如果要用抗體對活細胞進行染色或處理，或者要用抗體進行體內研究，則不能使用含NaN3的抗體制
2017
05-31

WB/IHC/Elisa實驗封閉劑的種類及選擇
封閉的原理：固相載體表面(如elisa板，NC膜或者PVDF膜上等)有很多孔洞，通過電轉或包被，膠上的蛋白被轉移到了膜上，或抗原/抗體固定在板上，蛋白以機械填補(堆積)和吸附的方式結合于表面。蛋白塞進了表面的很多孔洞里面，但蛋白并不是連續的，有很多空隙，而且比如說樣品孔之間也有空隙，這些孔洞并沒有填進東西，而抗體也是蛋白，也會被吸附在空的洞里，這樣就會有很多非特異性的信號。封閉液中的蛋白可以與表面上的空白空洞位置結合，同樣以機械填補(堆積)和吸附覆蓋的方式結合在膜上，因為有“填補”和“覆蓋”蛋白
2017
05-02

胎牛血清（FBS）的選購寶典
胎牛血清血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品質zui高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui
2017
04-26

研究發現提高CRISPR-CAS9效率的小分子化合物
CRISPR/Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御，可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。CRISPR/Cas9系統通過將入侵噬菌體和質粒DNA的片段整合到CRISPR中，并利用相應的CRISPRRNAs（crRNAs）來指導同源序列的降解，從而提供免疫性。【CRISPR/Cas9研究史】來自美國伊利諾伊大學厄巴納-香檳分校的微生物學教授BillMetcalf和博士后研究員DiptiNayak記錄了在古生菌（Archaea，也譯作古細菌，或古菌）中使用CRISPR-Cas9
2017
04-24

人淋巴細胞分離液操作protocal
LymphocyteSeparationMedium（human,Ficoll-Paque）是一種無菌的、即用型的Ficoll-泛影酸鈉，能夠簡單快速的從少量或大量的人外周血、骨髓和臍帶血中高產和高純度的提純淋巴細胞的一種即用型密度梯度介質。Ficoll-PaquePLUS內毒素水平非常低，小于0.12EU/ML，分離所得的細胞中95%左右為單個核細胞，細胞存活率大于90%，回收率為60%左右。貨號產品名稱規格abs930aLymphocyteSeparationMedium（human,Fic
2017
04-19

新發現！“神藥”雷帕霉素或能抗衰老和延長壽命
雷帕霉素簡介雷帕霉素（Rapamycin，RAPA，RPM），又名Sirolimus，屬大環內酯類抗生素，是一種新型大環內酯類免疫抑制劑。雷帕霉素的分子式為C51H79NO13，CAS:53123-88-9;分子量:914.18，為白色固體結晶，熔點為183-185℃，親脂性，溶解于甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑，極微溶于水。起初雷帕霉素被研究作為低毒性的抗真菌藥物，1977年發現雷帕霉素具有免疫抑制作用，1989年開始把RAPA作為治療器官移植的排斥反應的新藥進行試用，1999年作為器官移植抗排斥
2017
04-17

小分子化合物庫--“明星”激動劑、抑制劑
Absin®是您身邊的生化試劑專家和科研百寶箱!愛必信(Absin)—專業全面的生化試劑供應商!可提供60萬生化試劑,10萬抗體,努力打造高品質生命科學產品的!愛必信重要的產品線之小分子激動劑抑制劑！Absin®的小分子化合物庫產品涵蓋多個熱門研究領域，如：癌癥、心血管系統、內分泌系統、代謝、神經系統、疼痛及炎癥、表觀遺傳學、GPCR、激酶、微生物學、干細胞、泛素等，涉及生物醫藥研究和開發的各個領域，包括腫瘤發生、抗感染、自身免疫性疾病、糖尿病、帕金森氏病、AD等。涵蓋了PI3K/Akt/mTO
2017
04-10

小分子激動劑抑制劑之細胞凋亡通路
細胞凋亡為一種程序性細胞死亡（PCD），通常表現為有不同的形態特征和能量依賴的生物化學機制。細胞凋亡的作用機制是高度復雜和精密的，是一個能量依賴的級聯式反應。研究表明，有兩種主要的細胞凋亡途徑：死亡受體途徑（外源性）和線粒體途徑（內源性）。現有證據表明，這兩個途徑相互影響。細胞凋亡參與實現細胞行使其功能的各種過程，包括細胞正常的新陳代謝、免疫系統的功能實現、激素依賴性萎縮、胚胎發育和化學誘導的細胞死亡。細胞凋亡的紊亂（無論是過少或過多）是許多人類疾病包括神經病變性疾病，缺血性損傷，自身免疫性疾病
2017
04-01

愛必信(Absin)梯度凝膠優點介紹
梯度凝膠電泳不是在單一濃度（孔徑）的凝膠上進行，而是形成梯度凝膠。從凝膠頂部到底部丙烯酰胺的濃度呈梯度變化。凝膠梯度是通過梯度混合器形成的，高濃度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液濃度呈梯度下降，因此在凝膠的頂部孔徑較大，而在凝膠的底部孔徑較小。梯度凝膠電泳也通常加入SDS，并有濃縮膠。電泳過程與SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳基本類似。與單一濃度的凝膠相比，梯度凝膠有幾個優點：①首先，梯度凝膠比單一濃度凝膠的分離范圍更寬，可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質。單一凝膠電泳對于分子量超過其分離
2017
03-31

ECL發光液使用說明
ECL顯色原理：魯米諾在免疫測定中既可用作標記物，也可用作過氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和魯米諾，在HRP（辣根過氧化物酶）的作用下，發出熒光來。產品描述：ECL化學發光超敏顯色試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體及其關聯的抗原。其原理是，蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒
2017
03-30

中性粒細胞呼吸爆發定量檢測試劑盒簡介
中性粒細胞（PMNs）的吞噬作用在抵御細菌、真菌等病原微生物感染過程中發揮重要作用。吞噬作用過程包括幾個主要階段：趨化，黏附，內吞，胞內氧依賴性（呼吸爆發）和氧非依賴性的殺傷。正常條件下細菌感染后，機體PMNs被激活，PMNs吞噬和氧化功能增強是機體重要的天然免疫防御機制。因此通過觀察PMNs的活化狀態可以幫助了解機體細菌感染的狀況。愛必信（Absin）提供的試劑盒采用流式細胞儀（FMC）檢測PMNs功能，用PMA作為刺激劑，以二氫若丹明作為熒光底物。中性粒細胞受刺激后產生反應性氧化物，氧化二氫
2017
03-30

燃情奧秘——愛的激動劑
春天了，應時節而生，今天的主題是——激動劑！噢，不，是愛情。你造嗎？所謂執子之手摘星攬月，所謂海誓山盟共此一生，多是由一些叫“愛情物質”的東西助力產生。有趣的研究報道指出：①只要讓腦中產生足夠多的Phenylethylamine（PEA，苯基乙胺），那么就會有“來電”的感覺，PEA能讓人感到一種極度興奮的感覺，使人覺得更加有精力、信心和勇氣。由于PEA的作用，人的呼吸加速，心跳加速，手心出汗，顏面發紅……（咳咳，就不多說了）。②當你頭腦中充滿Hydroxytyramine（Dopamine，多巴
2017
03-27

Western blot發光檢測中常見的問題及解決方法
免疫印跡試驗（Westernblot）是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法，被廣泛應用于蛋白表達水平的研究、抗體活性檢測和早期疾病診斷等多個方面。其中較為簡單也為大家所普遍接受的Westernblot顯色方法為底物化學發光法ECL。*，Westernblot的原理是蛋白質在電力場的作用下，由大到小的進行排列，利用電泳進行分離和富集。擁有抗原表位的蛋白質分子被抗體（一抗）特異性識別并與之結合。在此基礎上，酶或熒光標記的二抗識別并結合一抗，通過與底物反應顯色來觀察目的蛋白。West
2017
03-27

蛋白marker--WB實驗中的標尺
一、蛋白marker是什么？在WB實驗中，蛋白marker的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量無誤了，實驗結果才有說服力，除此之外，蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是westernblot實驗成功的必要條件之一。二、蛋白marker的分類總體來說，蛋白Marker可以分成未預染蛋白marker、預染marker二個級別。1.未染色（premixed）蛋白分子量標準未預染蛋白marker即寬分子量蛋白標準、高分子量
2017
03-24

中性粒細胞呼吸爆發定量檢測試劑盒
中性粒細胞（PMNs）的吞噬作用在抵御細菌、真菌等病原微生物感染過程中發揮重要作用。吞噬作用過程包括幾個主要階段：趨化，黏附，內吞，胞內氧依賴性（呼吸爆發）和氧非依賴性的殺傷。正常條件下細菌感染后，機體PMNs被激活，PMNs吞噬和氧化功能增強是機體重要的天然免疫防御機制。因此通過觀察PMNs的活化狀態可以幫助了解機體細菌感染的狀況。愛必信（Absin）提供的試劑盒采用流式細胞儀（FMC）檢測PMNs功能，用PMA作為刺激劑，以二氫若丹明作為熒光底物。中性粒細胞受刺激后產生反應性氧化物，氧化二氫
2017
03-23

SHP099－人類癌癥治療的新發現
2016年諾華生物醫學研究所在Nature上發表的一篇文章“AllostericinhibitionofSHP2phosphataseinhibitscancersdrivenbyreceptortyrosinekinases.”給癌癥治療提供一個新的方向！實驗證明SHP099在遇到一種“分子膠”一樣的新型藥物候選時竟然沉默啦！不僅如此，這些“分子膠”能在小鼠中殺死人類的癌癥細胞。事實上，這種“分子膠”其實是一種被稱為SHP099的抑制劑，它具有一個變構作用機制，它通過該機制在一個自抑制的構形中
2017
03-22

愛必信信號通路調節劑介紹
信號通路是指能將細胞外的分子信號經細胞膜傳入細胞內發揮效應的一系列酶促反應通路。這些細胞外的分子信號（稱為配體，ligand）包括激素、生長因子、細胞因子、神經遞質以及其它小分子化合物等。當配體特異性地結合到細胞膜或細胞內的受體（receptor）后，在細胞內的信號又是如何傳遞的呢？細胞內各種不同的生化反應途徑都是由一系列不同的蛋白組成的，執行著不同的生理生化功能。各個信號通路中上游蛋白對下游蛋白活性的調節（包括激活或抑制作用）主要是通過添加或去除磷酸基團，從而改變下游蛋白的立體構象完成的。所以

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