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上海一研生物科技有限公司
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兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作步驟及保存方法2019/07/31
兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作步驟1、編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)。2、加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4、配液:將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體
人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒幾項問題解析2019/07/24
人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使用了
豬皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作步驟注意事項2019/07/17
豬皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作步驟注意事項:1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定
小鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒操作注意事項及處理要求2019/07/10
小鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒操作注意事項:(1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。(2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。(3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。(6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸
大鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒問題解析2019/06/26
大鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使用了過期的顯
雞β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒幾點注意事項2019/06/19
雞β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒說明書選用注意:1.根據可能影響試劑盒質量的因素,從固相材料的來源、包被抗體或抗原的性質、顯色底物、測定模式這幾個方面來判斷該試劑盒是否符合要求效期。2.同行對有關試劑盒的使用效果:①個別的使用效果;②綜合的使用評價。雞β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒說明書的注意事項:1.實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免孔與后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗
猴β淀粉樣蛋白142(Aβ142)ELISA試劑盒問題解析2019/06/12
猴β淀粉樣蛋白142(Aβ142)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使
大鼠ELISA試劑盒制備的詳細步驟及質量注意2019/06/05
大鼠ELISA試劑盒制備的詳細步驟:1)、抗原表位的計算機挑選;2)、抗原的制備;3)、血清的采集;4)、間接ELISA方法的樹立;5)、間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;6)、試劑盒的穩定性驗證;ELISA試劑盒質量,您需注意:一、合理安排檢丈量,避免反響板過多形成洗板等待時間長。二、顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不biguo期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必。三、加樣時保持顯色劑不外流,A、B液應避免接觸金屬器械,加終止液時應避免產生氣泡。四、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸
引物是決定PCR 結果的關鍵,下列原則有助于引物的合理設計2019/05/28
PCR技術具有操作簡便、省時、靈敏度高特異性強和對原始材料質量要求低等優點,但由于所用的TaqDNA聚合酶缺乏5'—3'核酶外切酶活性,不能糾正反應中發生的錯誤核苷酸摻入,估計每9000個核苷酸會導致一個摻入錯誤,不過InnisM·A發現,錯誤摻入的堿基有終止鏈延伸的作用傾向,使得錯誤不會擴大。PCR技術應用廣泛,不可能有這樣一套條件滿足所有的實驗,但本實驗所介紹的方法可適應于大多數DNA擴增反應,即使有的不適應,至少也確定了一個共同的起點,在此基礎上可以作多種變化。不過下列因素在實驗應用時應予
NLRP3在肺部炎癥及大鼠肺纖維化形成密切相關2019/05/22
肺纖維化是間質性肺炎中*常見的一種,高發于老年人群,以胸膜下肺基底部分布為主,HRCT上可表現為數量不等、范圍有限的磨玻璃影及網格影[1]。近年來研究發現,肺組織損傷可導致組織蛋白酶及ROS大量釋放,誘導炎癥小體(NLRP3)高表達,參與慢性炎癥形成。本實驗采用大鼠氣管滴注博來霉素制作肺纖維化模型,探討NLRP3在博來霉素致大鼠肺纖維化中的表達及作用機制。1資料與方法1.1一般資料健康清潔級Wistar大鼠60只(雌雄各半),6周齡,體重180~220g,由哈爾濱醫科大學實驗動物學部提供。主要試
ELISA實驗正面解析血清學反應的幾項特點2019/05/15
大鼠ELISA試劑盒實驗正面解析血清學反應的特點原理:抗原和相應抗體之間在一定條件下可發生免疫學反應。在體外,抗體主要存在于血清中,因此抗原和抗體之間發生特異性結合的反應又稱為血清學反應(一)血清學反應的一般特點1、抗原抗體的結合具有特異性在血清學反應中,只有抗原(或抗體)和相應的抗體(或抗原)才能結合。2、抗原抗體是分子表面的結合抗原抗體發生結合后,復合物相當穩定,但是有可逆性。經分離后重新得到的抗原或抗體的性質仍不改變。3、抗原抗體按一定的分子比例結合只有在分子比例合適時才會出現可見反應。若
ELISA試劑盒基本實驗原理介紹(初級)2019/05/08
ELISA試劑盒基本原理介紹(初級)實驗原理用于免疫酶技術的酶有很多,如過氧化物酶,堿性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰膽堿酯酶,6-磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應,在呈色后須立刻測定,否則空氣中的氧化作用使顏色加深,無法準確地定量。辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個分子含有一個氯化血紅素(protonhemin)區作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血
大鼠細胞凋亡相關因子(Bcl-2)試劑盒操作程序總結2019/04/29
大鼠細胞凋亡相關因子(Bcl-2)試劑盒操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。大鼠細胞凋亡相關因子(Bcl-2)試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶
ELISA試劑盒點評的幾個步驟2019/04/24
ELISA試劑盒在試劑的挑選免疫檢測的原理均基于抗原抗體反應。因為該反應過程受多種因素的影響,如普遍存在基質效應、穿插反應等,因此檢測成果難以溯源,不同辦法、不同試劑之間乃至同一試劑不同批號間成果均缺乏可比性。試劑質量在很大程度上決議了檢測的水平,因此在引進新項目之前有必要對試劑進行嚴厲的點評。ELISA試劑盒的點評有以下幾個步驟:1)斷定展開該項意圖必要性2)了解該項目現有的檢測辦法和原理3)在了解試劑的組成基礎上挑選多家試劑盒進行比較4)判別規范參閱辦法或參閱物質5)機構的陳述如各級室間質量
人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/17
人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16U/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液8U/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液4U/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液2U/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1U/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白
測試原理和血紅蛋白測試機構的組成2019/04/12
而根據測試原理和血紅蛋白測試機構的組成,影響血紅蛋白測試的有一些主要因素,1、液路系統液路系統包括進液管、輸液管、泵管、電磁泵(或蠕動泵)及供電電路等部件。進液管臟、堵、裂隙會影響進液量,或吸入氣泡,嚴重影響測量。這時要清潔沖洗,除去堵塞,有裂隙漏氣要更換進液管。輸液管、泵管,主要是臟和堵或老化。臟堵要認真沖洗。對泵管,因為擠壓和摩擦容易發生粘連,或老化,嚴重的甚至磨破而漏氣,所以對泵管要及時檢查。損壞要及時更換。電磁泵(或蠕動泵)的故障主要是轉動不靈活,卡死不轉動,或供電電路故障。轉動不靈活或
elisa試劑盒實驗中培養基配置的基本過程2019/04/04
elisa試劑盒實驗中培養基配置的基本過程1.配制溶液向容器內加入所需水量的一部分,按照培養基的配方,稱取各種原料,依次加入使其溶解,zui后補足所需水分。對蛋白胨、肉膏等物質,需加熱溶解,加熱過程所蒸發的水分,應在全部原料溶解后加水補足。配制固體培養基時,先將上述已配好的液體培養基煮沸,再將稱好的瓊脂加入,繼續加熱至*融化。并不斷攪拌,以免瓊脂糊底燒焦。2.調節pH值用pH試紙(或pH電位計、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH進行調節,直到調節
定量分析抗體的常用方法有擴散法、酶聯免疫吸附法和火箭免疫電泳法2019/03/27
近幾年也將其應用到食品領域中來檢測某些食品中的生理活性物質。一、基本概念1、免疫:籠統地概括起來,免疫就是人和動物機體防御、排除外來物質(異物)進人體內,同時識別和清除體內死亡、變性物質和平定體內叛亂分子突變細胞,以保護和穩定自身的防護機制。2、抗原:抗原是指那些能夠誘導機體的免疫系統發生免疫應答,產生抗體和致敏效應淋巴細胞,并在體內外與之特異性結合,發生免疫反應的物質。3、抗體:是能與相應的抗原專一性結合的蛋白質分子,和機體其他生物大分子一樣是細胞的產物,分泌到體液中或表現在細胞表面上。4、抗
酶標記抗體的質量主要取決哪些呢2019/03/21
酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否,因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中常用的是酶標記抗體,它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質量的酶(如辣根過氧化物酶,簡稱HRP)國內已有商品供應。高質量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產率高、不影響結合物的活性和不混雜干擾性物質且操作簡便易行的方法。注意事項1.在具備高質量HRP的
菌種培養的重要性2019/03/14
“菌種培養通過冷凍技術處理后,細菌就會處于休眠狀態。如果要活化使用,則需通過相應的培養液進行活化,才能恢復活性。”辛玉華以格氏嗜鹽堿桿菌為例說,復活菌種所需的營養為:20%的氯化鈉,酪蛋白、氨基酸、pH值為9等,在適宜的溫度和培養基中,這些沉睡的細菌便會被重新喚醒?!拔覀冞x擇的菌種,一般要有潛在應用價值和豐富的生物多樣性。現在,越來越多的微生物被喚醒,并在各個領域一顯身手?!毙劣袢A說。菌保中心保藏的微生物是經過幾代人長期且持續累積來的,只有時間才能體現微生物資源保藏的價值。菌種保藏有雙重“保險”
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