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浙江聯碩生物科技有限公司
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細胞收到后要怎樣處理?2020/06/30
收到細胞株包裹時,請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養,或立即冷凍保存(置于–70°C,隔夜后,移到liqN2)。冷凍細胞解凍程序:1.根據細胞說明書來配置培養基,不同的細胞株適應的培養基不同,請務必按細胞需求來配置。絕大多數的細胞均無法立即適應不同的基礎培養基或不同的血清種類,所以當細胞換成你們自己的培養基生長狀態變差或者速度變緩的時候,不要著急,可以靜養一段時間。給細胞一個適應的時間,不要一日看三回,操之過急;如實驗確實緊張,可以使用中喬新舟細胞株*培養基,
關于抗原抗體的生物活性2020/06/28
抗原抗體的主要功能從而有效地鏟除侵入機體內的微生物、寄生蟲等異物,中和它們所開釋的毒素或鏟除某些自身抗原,使機體堅持正常平衡,但有時也會對機體形成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的發生,對人體可形成危害。(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子差異,就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外發生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助
關于細胞樣的保存2020/06/12
一、操作步驟:1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上,用培育基培育,時間通過預試驗確定;2、細胞長好后,用洗刷液洗2分鐘×3次,室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min,蒸餾水洗刷;3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞,(干燥后-20℃冰凍保存2周以上)4、雜交前將固定的細胞進行如下處理;順次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脫水每次5min,用二甲苯洗刷,除掉殘留脂質順次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,進行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;5、在37℃用胃蛋
胎牛血清與新生牛血清的區別在哪里?2020/06/09
胎牛血清與新生牛血清的三大區別1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們在未發育*的胎牛的心臟進行穿刺取血,完成采血的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集自已經出生一段時間的小牛,而且它們的發育相對于胎牛而言更加*。2、組份與比例不同雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細胞生長因子和促貼附因子等組份并不相同,而且兩者之間的激素還有其他活性物質的比例也不同。另外,胎
淺談酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試驗辦法2020/06/05
酶聯免疫測定是將抗原抗體反響的高度特異性和酶的催化作用相結合,開展建立一種非放射性符號免疫分析辦法。因為ELISA具有靈敏度高、特異性強,酶免疫試劑的性質比較穩定,操作辦法簡潔快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優點,在醫學根底理論研究,病毒學和生物化學查驗等工作中應用十分廣泛。該法需將純化的抗原包被在固相載體,與必定稀釋度的待側血清反響,然后與酶符號的第二抗體(抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物)反響,酶可催化色原反響,在酶標測定儀必定波長下進行比色,測定吸光度。ELIS
關于細胞培養牛血清種類2020/06/01
一、組份與比例不同胎牛與小牛血清組份與比例不同,兩者所含的促細胞成長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同,用處與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才干成長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。二、血清的成份這幾種血清的成份,總體沒有什么顯著不同,只是有一些成分與其生存環境有關,如抗體很等少。此外,因成長發育的需求,有些成分在小牛出世后會發作一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的不同。有一點能夠必定,胎牛血清中的部分功用蛋白與
八連排、96深孔板,大量現貨!2020/05/26
八連排LANSOPCR八聯排管●0.2ml聯排管透明,適用于用于熒光定量PCR等檢測。LANSOPCR八聯排管蓋●管蓋與管相配套,具有出色的密封性。有凸蓋和平蓋兩種選擇,其中平蓋適合于實時PCR。LANSOPCR八聯排管帶蓋●管蓋相連,更便利,滿足不同的實驗目的提供更多選擇。96深孔板●高純度聚丙烯制造,材料符合USPVI,化學穩定性高,可以高溫滅菌,適合多道移液器以及自動化設備●錐形圓底孔設計,確保樣品低殘留●數字表示,防止孔與孔之間混淆●符合SBS規定,可穩定疊高●密封性可靠:孔板上部平整均
ELISA檢測試劑盒有哪些免疫測定?2020/05/19
ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發作氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴,避免發作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液
無菌操作的技術和注意事項2020/05/15
1、玻璃器皿的消毒和清潔⑴新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應用熱肥皂水洗刷,流水沖洗,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經清水洗凈后應注入濃鹽酸少許,慢慢轉動,使鹽酸布滿容器內壁數分鐘后傾出鹽酸,再用水沖洗。⑵污染玻璃器皿的處理①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產生泡沫,然后用清水沖洗至無肥皂為止。然后用少量蒸餾水沖洗。②細菌培養用的試管和培養皿可先行集中,用1kg/c
關于血清在細胞培養中的鑒別方法及作用2020/05/08
一、鑒別方法:血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則
動物血清如何做到質量保證的?2020/04/23
在細胞培育試驗中,血清一般作為基礎生長培育基的添加劑。而在試驗進程中是否挑選添加血清,主要依據基礎培育基化學成分,培育細胞的類型和培育系統而定。血清的質量大大的影響到試驗作用。一:血清的采集在出產進程中,全血運用無菌一次性塑料袋搜集,待凝聚后分離,搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控終血清產質量量的關鍵因素。只要初始質料符合咱們的規范時才干答應出產。二:產質量料的挑選在商場存在兩個胎牛血清規范:美國農業部規范(USDA)和歐洲規范。美國農業部規范,原始血清必須采自未發生瘋牛病(BSE)和口蹄疫
透析袋如何選擇與使用2020/04/21
一、透析透析就是利用小分子能夠通過,而大分子不能夠通過半透膜的原理,將大小分子量物質分開的一種實驗手段;在膜兩側存在濃度差時,溶質從高濃度的一側(通常是樣品置于透析袋中)擴散通過半透膜到低濃度的一側(透析溶液一側)直至膜兩邊濃度達到平衡。如下圖所示:利用透析分離物質的優缺點:優點:樣品回收率高;操作簡單,無需繁瑣準備工作;成本低廉,可一次性使用;分離條件溫和;無需監控缺點:耗時較長(24-48小時);要求較為明顯的樣品和雜質之間的分子量差(1-2個數量級)。二、三種不同類型的透析袋1、普通型透析
如何保存化學試劑2020/04/16
試驗中的化學試劑大多具有不穩定性,保存方法也因性質不同而不同,那試劑應如何保存呢?常用不穩定試劑的分類及保存要求:(1)易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。(2)易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。?(3)與二氧化碳反響的物質要密封包村。因為其相應的溶液較固體更易反響,所以更要留意密封保存。(4)易與氧氣作用的試劑,不宜長時間存放其水溶液;亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放;鉀,鈉,白磷更要選用液封方式。(5)化學試劑與水蒸氣,水發作反響的物質要密封,并遠離水源保
關于細胞傳代的操作2020/04/14
1.細胞吸除培育瓶內舊培育液。2.參加無菌pbs洗液(5-8mL)悄悄潤濕細胞,稀釋多余的培育基,之后吸走洗液,動作要輕,不可吹打到細胞。3.向瓶內參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許,以能覆滿瓶底為限。4.置溫箱中2~5分鐘,一旦鏡檢發現細胞質回縮,細胞間隙增大后,細胞變圓,比較松動后,當即終止消化。?5.參加該細胞對應的培育基6mL(T25培育瓶)或12mL(T75培育瓶)終止消化。6.用吸管通過吸取的培育基悄悄反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時應盡量以少的次數將細
細胞爬片制備詳細過程2020/04/10
一、爬片的準備1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用爬片;2.應用蓋玻片,可根據自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪,或者是口腔科的那種小沙輪,輕輕劃一下后,稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話,我一般不將蓋玻片切開,直接清潔后放入培養皿中,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標的染色。3.將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍,放
細胞凍存與復蘇操作步驟與注意事項2020/04/07
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時,細胞內和外環境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑,可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下,
細胞培養方法2020/04/02
1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,分裝成支置-20度保存;5.培養箱應
解析抗原抗體受那些要素影響2020/03/31
在常見實驗呢中,有很多不當操作情況下都會影響抗原—抗體反響的,以elisa試劑盒為例,為您解析這些要素別離來自哪里:抗原—抗體結合進程可分為兩個階段:一階段為特異性結合階段,此階段反響迅速,在數秒鐘至數分鐘內完成,但無可見反響;第二階段為可見反響階段,歷時數分鐘至數小時,此階段易受以下要素的影響。一、電解質抗原和抗體別離有對應的極性基團,能彼此吸附并由親水性變為疏水性。電解質的存在可使抗原—抗體復合物失掉電荷而凝聚,呈現可見反響。故免疫學實驗中多采用生理鹽水稀釋抗原或抗體。二、酸堿度抗原—抗體反
影響ELISA試劑盒試驗成果的要素2020/03/24
ELISA試劑盒,即酶聯免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,并具有操作簡潔、無放射性危害的優點,因此多年來廣泛應用于各高校、醫院、血站和科研機構的試驗室中。影響ELISA試驗的要素有如下三方面:一、試劑盒?1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質的反響靈敏度也高,試驗中空白對照OD值偏高或假陽性;2、酶結合物濃度過高,也會導致OD值假性增高。二、試驗儀器1、加樣器是否通過校正,酶免測定血
抗體特異性都有哪些斷定2020/03/20
抗體的特異性斷定抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的辨認才干。抗體的特異性高,它的辨認才干就強。衡量特異性一般以交叉反應率來標明。交叉反應率可用競賽克制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線,核算各自的結合率,求出各安閑IC50時的濃度,并按公式核算交叉反應率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,標明這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。拓展延伸:1.抗體的效價斷定不管是用于確診仍是用于醫治,制
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