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DNA甲基化實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/16
DNA甲基化實驗DNA甲基化是指生物體在DNA甲基轉移酶(DNAmethyl-transferase,Dnmts)的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應。DNA甲基化通常抑制基因表達,去甲基化則誘導了基因的重新活化和表達,這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實現對基因表達的調控。DNA甲基化實驗DNA甲基化是指生物體在DNA甲基轉移酶(DNAmethyl-transferase,Dnmts)的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉
原位末端凋亡(TUNEL)實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/16
原位末端凋亡(TUNEL)實驗一、實驗介紹TUNEL技術可對組織或細胞中凋亡小體或單個凋亡細胞進行染色,能準確反映細胞凋亡最典型的生物化學和形態特征。凋亡細胞內內源性核酸內切酶被激活而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點,利用脫氧核苷酸末端轉移酶將標有標記物(如di高辛,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉移到3-OH末端,再用免疫組化法或免疫熒光檢測凋亡細胞。二、特點及適用范圍組織學、胚胎學、生物學、病理學教學與科研。三、TUNEL細胞凋亡檢測實驗步驟(熒光)組織脫水-組織透明-浸
尼氏染色實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/16
尼氏染色實驗一、實驗介紹FrannaNissl(1860-1919)1892年創立了Nissl染色法,以發現Nissl小體和Nissl變性而聞名。各種神經細胞內都含有尼氏體,但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態的變化而變化,尼氏體是神經元內蛋白質合成的重要部位,當神經元受到刺激后,胞體內的尼氏體會明顯減少。二、特點及適用范圍組織學、胚胎學、生物學、病理學教學與科研。三、染色實驗步驟組織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫
堿性磷酸酶染色實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/16
堿性磷酸酶染色實驗一、實驗介紹堿性磷酸酶染色,又稱Alp染色,是用于檢測骨細胞、腎、肝堿性磷酸酶的染色方法,使堿性磷酸酶呈黑色,細胞核呈淺藍色,這是成熟成骨細胞的標志性酶;也可用于肝炎和腎炎的檢測。二、特點及適用范圍組織學、胚胎學、生物學、病理學教學與科研。三、石蠟切片堿性磷酸酶染色實驗步驟組織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫蠟-ALP染色-封片-鏡檢。四、實驗結果展示五、送樣運輸要求:樣本放置于5倍樣本體積的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。切勿固定時間過長,切勿
甲苯胺藍染色實驗報告科研實驗技術服務介紹2024/10/16
甲苯胺藍染色實驗報告一、實驗介紹甲苯胺藍是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個發色團,一個是胺基,一個是醌型苯環,來構成色原顯色。染料除有發色團外,還要有能使色原對組織及其他被染物產生親和力的原子團即助色。助色團能促使染料產生電離成鹽類,幫助發色團對組織產生染色力,使切片上的組織細胞著色。甲苯胺藍不僅含有兩個發色團,還含有兩個助色團,為堿性染料,甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。二、特點及適用范圍組織學、胚胎學、生物學、病理
ELISA檢測科研實驗技術介紹2024/10/12
ELISA檢測酶聯免疫吸附測定enzymelinkedimmunosorbentassay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。ELISA檢測一、實驗介紹酶聯免疫吸附測定enzymelinkedimmunosorbentassay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。二、實驗目的與原理ELISA目的是檢測血清、尿液、細胞上清等
載體構建實驗科研實驗技術服務2024/10/12
載體構建實驗一、實驗介紹載體構建即是構建含外源DNA的質粒,為把DNA分子運送到受體細胞中去,必須尋找一種能進入細胞、在裝載了外來的DNA片段后仍能照樣復制的運載體。理想的運載體是質粒(plasmid),在基因工程中,常用人工構建的質粒作為載體。二、實驗目的構建含外源DNA的質粒,使外源DNA在受體細胞中過量表達。三、服務內容及流程四、實驗結果展示載體構建實驗一、實驗介紹載體構建即是構建含外源DNA的質粒,為把DNA分子運送到受體細胞中去,必須尋找一種能進入細胞、在裝載了外來的DNA片段后仍能照
實時熒光定量PCR實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/12
熒光定量PCR檢測在PCR反應體系中加入熒光染料,利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化,根據內參基因和目的基因的Ct值對起始模板進行相對定量分析。具有操作簡便、快速高效、高通量、高敏感性等特點。實時熒光定量PCR實驗一、實驗介紹在PCR反應體系中加入熒光染料,利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化,根據內參基因和目的基因的Ct值對起始模板進行相對定量分析。具有操作簡便、快速高效、高通量、高敏感性等特點。二、實驗目的檢測目的基因的差異性
粘附實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/11
粘附實驗一、實驗介紹:細胞黏附性是維持組織結構穩定性的基本條件,也是細胞運動和調節功能的基本因素,并對細胞增殖、分化具有一定的影響。通常分為兩類:即細胞與細胞黏附、細胞與基質黏附;機體內許多細胞,如上皮細胞需要固定在某處發生功能,另一些細胞,如白細胞活躍運動,就需要不斷的調節細胞黏附。細胞的黏附性改變,在腫瘤的轉移也發揮重要作用。惡性腫瘤具有從原發瘤及在體內擴散的能力,提示這些細胞之間的相互識別及相互之間黏附機制發生了改變。二、實驗目的:檢測細胞的粘附性,主要用于分析藥物、基因改變或培養條件改變
細胞系培養科學實驗技術服務介紹2024/10/11
細胞系培養一、實驗介紹細胞培養:是指將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養的方法。二、實驗目的體外培養細胞。三、實驗步驟四、實驗結果展示五、送樣運輸要求:1凍存細胞凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。2活細胞使用T25瓶,瓶蓋無孔。生長狀態良好的細胞,細胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內舊培養基,添加新培養基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面
細胞系培養科研實驗技術服務介紹2024/10/11
細胞系培養一、實驗介紹細胞培養:是指將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養的方法。二、實驗目的體外培養細胞。三、實驗步驟四、實驗結果展示五、送樣運輸要求:1凍存細胞凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。2活細胞使用T25瓶,瓶蓋無孔。生長狀態良好的細胞,細胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內舊培養基,添加新培養基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面
細胞克隆形成實驗科學實驗技術服務介紹2024/10/11
細胞克隆形成實驗一、實驗介紹細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。二、實驗目的1)通過對細胞處理后在細胞培養板上的克隆形成能力來提示處理后細胞的群體依耐性及增殖能力。2)評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;3)評價細胞在體內成瘤性,癌細胞不一定都可以在體內成瘤,但若體外克隆能力越強,即
細胞劃痕的實驗科研實驗技術服務介紹2024/10/11
細胞劃痕實驗一、實驗介紹:當細胞長到融合成單層狀態時,在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域,即為“劃痕”,劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合。通過對不同時期劃痕區域細胞狀態的觀察,對細胞的遷移能力進行判斷。細胞遷移是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質的梯度后而產生的移動。免疫反應、炎癥反應、癌癥轉移等過程中都涉及細胞遷移。二、實驗目的:細胞劃痕實驗是研究細胞遷移能力的體外實驗。三、實驗步驟:四、結果展示:五、送樣運輸要求:1凍存細胞凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存
流式細胞技術科研實驗技術服務介紹2024/09/24
流式細胞技術應用簡介流式細胞技術(flowcytometry,FCM)是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。流式細胞術是單克隆抗體及免疫細胞化學技術、激光和電子計算機科學等高度發展及綜合利用的高技術產物。技術原理流式細胞儀使懸浮在液體中分散的經熒光標記的細胞或微粒逐個通過樣品池,同時由熒光探測器捕獲熒光信號并轉換成分別代表前向散射角、側向散射角和不同熒光強度的電脈沖信號,經計算機處理形成相應的點圖,直方圖和加三維結構圖像進行分析。用于FCM的樣本是單細胞懸液,可以是血液、懸浮細胞培
CRISPRCas9技術科研實驗技術服務介紹2024/09/24
CRISPRCas9技術應用簡介簡單來講,CRISPR/Cas9是一種分子生物學技術,通過這種技術科研人員可以對細胞和生物體內的基因進行編輯。所謂的基因編輯就是通過某種生物手段和技術,對生物體內的遺傳物質進行修改。基于原核生物的獲得性免疫系統研發出的CRISPR/Cas9技術只包含兩種重要的成分,一種是行使DNA雙鏈切割功能的Cas9蛋白,而另一種則是具有導向功能的sgRNA(singleguideRNA)。當細胞內同時表達sgRNA和Cas9蛋白時,Cas9蛋白通過與sgRNA結合,靶向到目的
免疫印跡(Western blot)檢測科研實驗技術服務介紹2024/09/24
免疫印跡(Westernblot)檢測應用簡介蛋白質免疫印跡法(WesternBlot),簡稱WB,是指通過SDS-PAGE膠將不同分子量的蛋白質分離開,然后將目標蛋白轉移到載體(PVDF)膜上,利用抗原抗體的特異性結合,用特異性的一抗結合目標蛋白,用HRP標記的二抗結合一抗,再加以ECL發光液顯色,檢測組織或者細胞內某種或者某些特異性蛋白質的表達。蛋白質免疫印跡是做蛋白質分析的一種常規技術,常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析,還可以用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-R
co-ip檢測科研實驗技術服務介紹2024/09/24
co-ip檢測應用簡介Co-IP主要用于檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用,是IP實驗的一種擴展,基于IP反應的潛力,在樣品溶液中捕獲和純化主要目標(抗原等)及通過天然相互作用與靶標結合的其他的大分子。此外,還可以利用Co-IP來確定在不同條件下的蛋白質相互作用。技術原理免疫共沉淀是利用抗原和抗體的特異性結合以及細菌的ProteinG或A能特異性地結合到免疫球蛋白的Fc片段的方法。其基本原理是在細胞裂解液中加入感興趣蛋白的抗體,孵育后再加入與抗體特異結合的結合于磁珠的ProteinG或A,若細胞中存
CHIP 檢測科研實驗技術服務介紹2024/09/24
CHIP檢測應用簡介核酸和蛋白質是組成生命的主要生物大分子,兩者的相互作用是構成生命活動的生長、繁殖、運動、遺傳和代謝等生命活動的基礎。研究蛋白質和核酸間的相互作用是人們探索生命現象奧秘的關鍵,CHIP檢測實驗是應用于蛋白與核酸互作關系的重要參考。技術原理CHIP實驗在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。實驗方法技
ELISA 檢測科研實驗技術服務介紹2024/09/20
ELISA檢測應用簡介酶聯免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。技術原理采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑)②酶標記的抗原或抗體(標記物)③酶作用的底物(顯色劑)測量時,抗原(抗體)先結合在固
基因提取科研實驗技術服務介紹2024/09/20
基因提取應用簡介DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。在DNA提取過程中應做到:1、根據不同研究需要,保證結構的相應完整性;2、盡量排除其它大分子成分的污染(蛋白質、多糖及RNA等);3、保證提取樣品中不含對酶有抑制作用的有機溶劑及高濃度的金屬離子。下面結合不同的研究對象列出幾種相應的DNA提取方法。技術原理原核生物的基因是連續不間隔的,直接用限制酶從DNA切取就可得到目的基因,再PCR擴增后就
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