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2022
02-15

如何保證HPLC 色譜柱有效工作？
引入HPLC色譜柱的樣品通常多種多樣且復雜，這些樣品可能含有許多與HPLC條件不兼容的成分。在沒有適當的樣品制備或樣品預處理的情況下注入此類樣品可能會導致色譜柱堵塞。比如殘留的蛋白質和高疏水性化合物（如脂質）在反相分離過程中也可能不會*洗脫出來，它們往往會慢慢吸附到分析色譜柱上并引起問題。不兼容的樣品稀釋劑和流動相也會導致堵塞問題。如果兩者不兼容，當將樣品引入流動相時，如果稀釋劑與流動相兩者對比極性太強，通常會出現樣品沉淀。流動相緩沖液通常用作HPLC中的流動相，重要的是在使用前過濾這些緩沖鹽。
2022
02-14

簡述hplc色譜柱與hplc的區別？
由于高效液相色譜具有速度快、分離效果好、靈敏度高等優點，因此應用越來越廣泛。HPLC色譜柱是HPLC系統的重要組成部分。使用時需謹慎使用，使用后必須進行保養，以免下次使用出現問題。色譜柱的頻繁更換是非常昂貴的，因此為了節約成本，需要更大程度的延長色譜柱的使用壽命。同時，必須小心維護色譜柱，以保持每次獲得結果時的準確性和一致性。深圳恒譜生總結了7個關于色譜柱的誤區，希望能延長使用壽命。誤區一：HPLC色譜柱不能反吹一般情況下，液相色譜柱的設計耐壓值遠高于ZUI大工作壓力。更換柱子時，反吹可以清除柱
2022
02-11

hplc色譜柱老化的問題如何解決？
在氣相分析過程中，hplc色譜柱是氣相色譜儀的“心臟”，在組分的定性和定量分析中起著至關重要的作用。今天我們來分享一下關于hplc色譜柱老化的問題。色譜柱老化，簡而言之，就是通過高溫烘烤柱子，用載氣將不穩定的固定相、可能存在的雜質和污染物帶出柱子，恢復柱效的過程。需要對色譜柱進行時效處理的條件有哪些？1、新購柱：對于新柱，在初次使用前，老化處理可以去除柱內鍵合不穩定的固定液或填充柱內殘留的溶劑，保證新柱性能的穩定性。2、對于長期閑置需要重新啟動的色譜柱，色譜柱老化可以去除色譜柱長期放置造成的污染
2022
02-10

疏水相互作用色譜（HIC）
經常做蛋白質純化分離實驗的色譜工作者，對于疏水色譜（Hydrophobicinteractionchromatography，簡寫HIC）肯定不陌生，血清蛋白、膜結合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等化合物純化都需要用HIC色譜法。HIC在是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同，用流動相洗脫時，各組分遷移速度不同而達到分離的目的。疏水相互作用色譜法具有對蛋白質的回收率高，蛋白質不失活，蛋白質變性可能性小等優點。疏水作用色譜固定相的非極性比較弱，流動相多采用高濃度鹽緩沖液進行梯度洗脫。溫和的分離條件
2022
01-22

高效液相色譜故障排除
泄漏是HPLC分析中的常見問題。為了最大限度地減少系統中的泄漏，請盡量選擇相同制造商的硬件。如果安裝不兼容的接頭，分離過程中可能會出現問題，重復連接可能最終導致接頭泄漏。如果需要更換，請使用適當的適配器并在實驗之前檢查所有連接是否泄漏。色譜柱篩板堵塞是另一個常見的HPLC故障問題，想要從一開始就盡量減少此問題，請使用柱前過濾器和色譜保護柱。恒譜生的液相在線過濾器和保護柱預柱能夠過濾掉流動相中的污染物，保護色譜柱免受樣品溶液中析出沉淀物的危害。平時要清潔進樣口，首先斷開并反轉色譜柱，將其連接到泵（
2022
01-18

如何生成真實的液相色譜分析結果？
作為一名液相色譜工作者，您最關心的還是生成真實實驗數據，這些數據可以在任何其他實驗室的相同條件下被普遍接受和重現。如果忽視*的規范，即使使用最復雜的工具也無法達到目的。系統適用性是在化學分析中生成有效數據的關鍵。液相色譜法，是從事制藥、食品、法醫學、聚合物、生命科學和環境研究的實驗室中應用廣泛的技術。數以千計的高效液相色譜儀在制藥行業的研發和質量控制實驗室工作，每天都會產生大量數據，這有助于開發安全有效的藥物。在根據此類數據做出決策之前，HPLC系統應滿足系統適用性的要求至關重要。什么是系統適用
2022
01-12

色譜柱是什么？
色譜法是一種分離混合物中各組分的分析技術。色譜柱是色譜中使用的儀器的一部分。使用柱的五種色譜方法是氣相色譜（GC），液相色譜（LC），離子交換色譜（IEC），尺寸排阻色譜（SEC）和手性色譜。色譜的基本原理可以應用于所有五種方法，今天我們分享其中兩種方法——氣相色譜柱和高效液相色譜柱。氣相色譜柱在氣相色譜中，流動相是氣體。氣相色譜柱的長度通常在1至100米之間。氣相色譜法（GC）：液相固定相結合或吸附到毛細管柱的表面上，或結合到柱內填充的固體載體上。匹配分析物和固定相的極性兩者具有相似的極性，固
2022
01-12

高通量液相色譜中進樣的注意事項
近年來，為減少分析時間和提高分析通量而誕生的超高效液相色譜技術取得了令人矚目的發展。超高效液相色譜儀器能夠承受更高系統壓力和流速，并且分析速度和效率大大提升；檢測器模塊的改進和新的數據處理算法也有效提升信號采集的速率；現代色譜柱技術的發展，即使是很短的柱長也能提供足夠高效色譜分離效率，比如恒譜生液相色譜柱有30、50、75、100、150、200、250和300mm等多種長度。高效的分離技術歸功于液相硅膠色譜填料，通過恒譜生的先進的技術處理，金屬含量極低的99.9%超高純度球型多孔硅膠在孔徑、孔
2022
01-07

液相色譜柱柱壓突然升高的常見原因分析和解決辦法
液相色譜柱在工作的時候常見的就是色譜柱柱子壓力增高，如果液相色譜柱是在工作使用的過程中緩慢增加的話，那么屬于正常現象，如果色譜柱柱壓是突然一下子就增加了，我們先排除管路堵塞或者壓力傳感器故障除外，可能會是下面幾個原因：1、液相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染；2、液相色譜柱頭的填料被樣品污染；3、流動相PH值過大或過小使固定相結構破壞或溶解；4、液相色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結晶析出。針對以上四大原因，我們提出了以下四大解決方案：1、如確定是液相色譜柱頭的過濾篩板被污染
2021
12-29

淺析反相色譜柱使用和維護
反相色譜柱是我們應用廣泛的色譜柱類型，反相色譜柱鍵合相主要包括：C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對于以上色譜柱，我們在使用及維護的時候可以按照同樣的操作方式：1、在條件允許情況下，在使用前最好對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。2、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃。3、樣品最好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物，最好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如
2021
12-28

來看看色譜柱填料都有哪些種類
現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，首先必須對此有一定的認識和了解。下面將對幾種常見的色譜柱填料極其各種的性能做各一個簡要的介紹。（1）硅膠填料硅膠填料主要應用正相色譜及反相色譜柱中，正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團(NH2,APS)和氰基團（CN，CPS）的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱
2021
12-28

如何維護超高效液相色譜柱？
使用高效液相色譜(HPLC)來分析樣品被廣泛應用于藥物組分分析、食品添加劑測定和環境樣品測試等。由于液相色譜柱是許多實驗室的核心設備且成本高昂，因此保護柱子免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護良好的色譜柱還能產生一致且準確的數據，為可靠的分析結果提供支持。如何提高分析色譜柱性能？色譜柱性能取決于多種因素，包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔維護等。但是在使用過程中，并不是所有實驗條件都是理想條件。例如，某些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此，對于液相分析柱的預防性維護
2021
12-28

HPLC級溶劑在HPLC分析中的重要性
液相色譜儀除了日常維護保養外，使用高純度溶劑不僅能保護液相系統，也能增加結果的可靠性。HPLC級表示化學試劑的純度，是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度，制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級試劑。樣品在注入液相系統前，必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中，當樣品溶劑與流動相的洗脫強度有差異,尤其是前者的洗脫強度較強時，就會產生峰的變形及柱效的降低。解決該問題有效的方法是使用流動相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動相之間任何強度或粘度的不匹配，也可以
2021
12-21

HPLC、UHPLC 樣品制備時該注意些什么？
樣品過濾是制備色譜分析樣品的關鍵步驟。實驗前如果不過濾樣品會導致色譜柱篩板堵塞等問題，從而導致背壓增高和色譜柱性能下降。最終，這會增加花在色譜儀故障排除和維護上的時間，浪費時間也增加科研人員的工作量。對于大多數類型的樣品，過濾處理相對比較簡單。在進樣前用溶劑進樣口過濾器對流動相過濾。這一步也非常重要，用色譜過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質；未經過濾的溶劑或溶劑瓶中生長的微生物都會降低液相色譜柱和泵的性能。使用一段時間后需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。在食品和飲料行業分析時，一些濃糖漿、果肉
2021
12-21

分析規模和制備規模的HPLC有何不同？
HPLC一般指高效液相色譜，是一種多功能的分析方法，可對各種化合物進行分離和定量。它廣泛應用于生命科學領域的應用、藥物分析、食品分析、環境監測、精細化工產品分析等眾多領域。HPLC的技術都具有基本原理，比如樣品引入，色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測技術進行檢測。想了解制備型HPLC要先對分析型HPLC進行初步研究，兩種技術之間的基本區別是操作規模，下面將重點介紹區別：明確分析的目標在進行分析之前，你應該對分析目標有清楚的了解。你是希望獲得有關樣品成分純度的信息然后進行定性，還是希望能快
2021
12-14

液相色譜分析使用秘訣，你學會了嗎？
液相色譜儀是比較常用的實驗室儀器，但是即使是經驗豐富的人也容易忽略一些小細節，別小看這些被忽略的細節，很可能會影響你的色譜儀器或者是分析結果！一些小故障也是由于不注重細節產生的，色譜新手也需要注意！流動相一定要過濾！有些色譜操作者可能會想，我不是用的分析級的純水流動相嗎？為什么還要過濾呢？答案是：新制備好的流動相，在室內靜置幾天后，容易滋生細菌。特別是南方，夏季炎熱更容易滋生細菌污染了流動相！恒譜生建議：流動相即配即用，如果要用間隔時間比較久的流動相，一定要過濾！否則滋生細菌會堵塞色譜柱填料里的
2021
12-13

藥物溶出度儀過濾器該如何選擇？
藥物溶出度儀過濾器是藥物質量控制(QC)和藥物開發中藥物溶出測試的重要部件。當樣品從溶出容器中取出時，溶出度測試通過測量在特定時間點溶解的活性藥物成分(API)的量來確定藥物從劑型中釋放的速度。過濾在溶出度測試中起著關鍵作用，藥物溶出度儀過濾器的效率取決于未溶解的藥物顆粒大小，可以攪拌樣品促使藥物顆粒溶解。使用過濾器可以有效避免藥物顆粒進入管路系統，也能避免因取樣高度差異引起的實驗誤差。像恒譜生不銹鋼溶出度儀在線過濾器對樣品無吸附，這對藥物分析是非常重要的，并且恒譜生溶出度儀過濾頭采用新穎的全流
2021
12-09

反相高效液相色譜柱的使用注意事項
在使用反相高效液相色譜柱的過程中，操作是否得當，維護是否到位會直接影響色譜柱的使用壽命和效果，因此了解反相高效液相色譜柱使用與維護的注意事項十分重要。為盡可能減少日常中不正確色譜操作對反向液相色譜柱的損壞，以下收集了目前對反相高效液相色譜柱的適用與維護注意事項：1.反相高效液相色譜柱在進行安裝拆卸以及更換時，對接口處要擰緊但動作要輕，力量要適度，盡可能防止較強的機械振動，以避免安裝等步驟出現機床空隙。2.溫度和壓力的突然變化和機械震動會影響反向高效液相色譜柱的填充狀況，因此要控制好溫度以及壓力的
2021
12-08

色譜人看過來！HPLC和GC之間的相同點不可不懂！
在前幾期文章中，我們討論了HPLC和GC的不同之處—氣相色譜（GC）和高效液相色譜（HPLC）有何不同？（點擊可查看原文）在這期文章中我們將討論HPLC和GC之間相同的功能，再一次深入學習他們之間的共通性。1.基本原理相同分離混合物的成分，對其進行識別和定量是這兩種技術的共同基本目標。最大的相同點就是：它們都是利用物質在流動相和固定相中分配系數不同而分離的。2.流動相的作用HPLC和GC儀器使用時都需要用到流動相，流動相起著相同的作用：將需要檢測的組分以順序的方式運輸到檢測器。雖然它們按照相同的
2021
12-04

如何分析高效液相色譜圖？
高效液相色譜法中，對色譜圖分析是很重要的。你可以將色譜圖看成一個橫縱坐標為時間與數據的二維圖。固定相則是像海綿一樣的柱子，里面很多孔洞讓樣品流動，由于每個樣品物質的吸附能力不同，在色譜圖中會有不同的峰形。保留時間是樣品通過高效液相色譜柱所需要的時間，你在使用相同的流動相和色譜柱分析同一樣品時，出現的保留時間應該是固定的。如果保留時間不同可能是里面有雜質造成影響。在液相色譜分離過程中，容易出現色譜圖中未出峰、一個或者多個峰是負峰、寬峰、雙峰、拖尾峰等問題，我們稱之為鬼峰。鬼峰來源復雜且多樣，主要來

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