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HepG2細胞培養(yǎng)攻略2022/09/30

HepG2細胞培養(yǎng)攻略HepG2細胞來源于一個15歲白人的肝癌組織。該細胞分泌多種血漿蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細胞能大容量培養(yǎng)，乙肝表面抗原陰性，對G418有抗性，對人生長激素有刺激反應(yīng)。HepG2細胞廣泛應(yīng)用于遺傳毒理學(xué)試驗、外源性生物性異物的細胞毒性、乙型肝炎病毒感染機制、病毒培養(yǎng)等方面的研究。由于其與肝細胞具有相同的生物學(xué)活性，還被用于胰島素抵抗的研究。細胞名稱：人肝癌細胞細胞簡稱：HepG2種屬來源：人組織來源：肝疾病特征：肝癌細胞形態(tài)：上皮細胞樣

COLO320-GFP-puro(LV5-NC)細胞培養(yǎng)方法2022/09/22

COLO320-GFP-puro(LV5-NC)細胞培養(yǎng)方法簡介：產(chǎn)品名稱：COLO320-GFP-puro(LV5-NC)培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁+懸浮生長支原體污染一直是細胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“

小鼠淋巴瘤細胞YAC-1培養(yǎng)技巧2022/09/22

小鼠淋巴瘤細胞YAC-1培養(yǎng)技巧培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：懸浮凍存細胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時大量水分會進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。如圖2所示

LNCAP細胞培養(yǎng)小技巧2022/09/22

LNCAP細胞培養(yǎng)小技巧簡介:細胞名稱：人前列腺癌細胞LNCaPcloneFGC培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長LNcapcloneFGC，人前列腺癌細胞，1977年從一名患有前列腺癌的50歲男性的左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中建立，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移；文獻中描述細胞對雄激素敏感。該細胞培養(yǎng)期間會遇到那些問題或者特殊需求呢？1、生長速度緩慢。2、培養(yǎng)一段時間發(fā)現(xiàn)聚團了怎么辦？3、使用的培養(yǎng)瓶是否需要特殊處理或者采用一些特殊的培養(yǎng)瓶呢？想

細胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意哪些問題？2022/09/22

細胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意哪些問題？#1細胞培養(yǎng)步驟一般包括：解凍、培養(yǎng)、分盤、凍存。基本上都遵循這個步驟，細胞轉(zhuǎn)染過程，我們往往發(fā)生在步驟3，在做細胞功能性實驗時，往往在步驟2，解凍和凍存就是細胞的儲藏和分離的過程。#2首先我們要獲得細胞，一般受大家比較認(rèn)可的細胞庫有1962年ATCC建立的CELLLINES、中科院、DSMZ等機構(gòu)。#3細胞解凍要求37度快速解凍，另外就是注意不同細胞的培養(yǎng)條件。#4同規(guī)格培養(yǎng)器皿所需要的細胞生長密度也不同，如下圖：#5細胞生長會產(chǎn)生各種代謝廢物，造成培養(yǎng)液PH變

什么是細胞系？2022/09/22

什么是細胞系？1、細胞系（細胞株）細胞系是來自多細胞生物體的細胞群體，其通常不會無限增殖，但是由于突變，逃避了正常細胞的衰老，從而可以持續(xù)分裂的一種細胞的集合。因此，細胞可以在體外長時間生長。細胞系是研究多細胞生物體的生物化學(xué)和細胞生物學(xué)的非常重要的工具，例如信號通路、腫瘤殺傷、細胞增殖、細胞周期、突變分析、基因表達、蛋白表達、細胞分化等等。此外，永生化的細胞系也已經(jīng)在生物技術(shù)中得到應(yīng)用，比如建立新來源、新突變的細胞系。2、克隆細胞株從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，

耐藥株是怎樣煉成的？2022/09/22

耐藥株是怎樣煉成的？近年來，惡性腫瘤（癌癥）已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。為什么癌癥容易復(fù)發(fā)，很難治愈呢？因為絕大部分抗腫瘤藥物，最終都逃不過腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性的命運，導(dǎo)致癌癥繼續(xù)發(fā)展。對于腫瘤細胞耐藥的產(chǎn)生原因仍然處在研究之中，如何改善腫瘤細胞對化療藥物耐藥依然是目前研究的熱點和難點。01什么是耐藥性？化療是治療惡性腫瘤的方法中有效的手段之一，指用化學(xué)藥物的方法殺死腫瘤細胞。常用的藥物包括細胞增殖的抑制劑、DNA損傷修復(fù)途徑的抑制劑，如阿霉素（adriamycin）、紫杉

NTC胎牛血清簡介2022/09/21

NTC胎牛血清品牌：Natocor產(chǎn)地：阿根廷介紹：內(nèi)毒素低，內(nèi)毒素≤10EU/ml為目前優(yōu)標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)于目前市面上絕大部分血清品牌(其他品牌≤50EU/ml),Natocor特級胎牛血清超低內(nèi)毒素的特點將各種對細胞培養(yǎng)的影響性降到低，以得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。（內(nèi)毒素會改變細胞外形、活化細胞并影響下游生物途徑反應(yīng)、抑制酵素活性、促進或抑制細胞分裂、影響細胞附著力等）可溯源，由國家頒發(fā)溯源證書。該血清可滿足疫苗生產(chǎn)級別要求。血清等級高，由歐洲專家委員會評價血清等級為高級別1級。0.1um三級過濾，γ射線

正常小鼠睪丸Sertoli細胞 TM42022/09/16

正常小鼠睪丸Sertoli細胞TM4培養(yǎng)條件：DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長凍存細胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時大量水分會進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受

小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞 OKT112022/09/16

小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞OKT11培養(yǎng)條件：IMDM+20%FBS+1%PS生長狀態(tài)：懸浮生長凍存細胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時大量水分會進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。如圖

小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc2022/09/16

小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標(biāo)記4T1+luc培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長凍存細胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時大量水分會進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷

HCT-116/L-OHP 人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細胞2022/09/15

HCT-116/L-OHP人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細胞支原體污染一直是細胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“個頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體

CT26.wt小鼠結(jié)腸癌細胞簡介2022/09/15

CT26.wt小鼠結(jié)腸癌細胞支原體污染一直是細胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“個頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體繁殖速度比細菌慢

COLO320-GFP-puro(GHRLOS過表達)細胞簡介2022/09/15

COLO320-GFP-puro(GHRLOS過表達)細胞支原體污染一直是細胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“個頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒

ECV-304 人臍靜脈內(nèi)皮細胞株2022/09/15

ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細胞株支原體污染一直是細胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“個頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體繁殖速度比細

GEMINI胎牛血清2022/09/13

GEMINI胎牛血清貨號：900-108美國GeminiBio是被FDA認(rèn)可的提供細胞培養(yǎng)用的生物產(chǎn)品和化學(xué)試劑的公司，產(chǎn)品包括人和動物的血清和其它用于細胞培養(yǎng)的相關(guān)產(chǎn)品，細胞因子重組蛋白等。Gemini公司，成立于1985年，位于加利福尼亞南部Calabasas市，1999年，遷至加利福尼亞北部Woodland市。Gemini公司在銷售的動物血清產(chǎn)品，全部來自于澳洲的子公司，血源主要為澳大利亞、新西蘭、巴拿馬、烏拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始終以“為客戶提供高質(zhì)量產(chǎn)品”為首要目標(biāo)，尤其在

體內(nèi)細胞培養(yǎng)及操作步驟2022/09/13

體內(nèi)細胞培養(yǎng)及操作步驟1、瘤細胞懸液接種（1）無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞。（2）在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液。（3）培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍。（4）計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107～108／ml。（5）常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml／部位，＞106細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些。（6）次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏

WinSera無外泌體血清的常見問題？2022/09/13

WinSera無外泌體血清的常見問題？能不能用無血清培液養(yǎng)，能不能用正常培液養(yǎng)到70%換無外泌體血清的培液？有些paper確實會使用無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞然后收上清分離外泌體，論壇中也有已經(jīng)發(fā)表文章的朋友使用該方法，該方法是使用含有外泌體的血清培養(yǎng)細胞到一定密度，然后吸去培液，PBS洗數(shù)次之后換無血清培液進行培養(yǎng)即可。但是目前很多高檔次的paper基本都是使用含無外泌體血清的培液進行細胞培養(yǎng)的，無外泌體血清可以按照之前hzangs的推文介紹的方法制備。如果你的無外泌體血清比較珍貴，也可以考慮先將細

小鼠結(jié)腸癌細胞穩(wěn)定表達熒光素酶 (CT26+luc)說明書2022/09/13

小鼠結(jié)腸癌細胞穩(wěn)定表達熒光素酶(CT26+luc)細胞介紹：CT26細胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導(dǎo)得到的未分化的小鼠結(jié)腸癌細胞，該細胞的一個克隆形成的細胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關(guān)抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細胞可以表達腫瘤相關(guān)抗原和beta半

怎么做好微生物污染的預(yù)防？2022/09/02

怎么做好微生物污染的預(yù)防？微生物污染在細胞培養(yǎng)中是非常常見的，也是令人頭大的一件事情。所以我們一定要將問題扼殺于搖籃之中，規(guī)范實驗中的各個步驟，確保細胞“寶寶”在無污染的情況下健康成長。1．實驗進行前，準(zhǔn)備好所需的試劑和器材。玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒：1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上；2)干烤消毒140℃2小時以上。2．培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗：將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后