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細(xì)胞污染防治方法2022/06/17: 細(xì)胞污染防治方法1.細(xì)菌污染細(xì)菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)的污染，主要由操作不慎或使用了滅菌不*的耗材與試劑引入。最常見(jiàn)的有枯草桿菌、大腸桿菌、假單胞菌及白色葡萄球菌。鏡下形態(tài)則為長(zhǎng)桿狀、短桿狀和顆粒狀等。左邊的就是比較典型的桿菌污染，一般桿菌會(huì)延軸向快速游動(dòng)，量少時(shí)培養(yǎng)基澄清。右圖是顆粒狀污染，一般培養(yǎng)基會(huì)渾濁或有白色沙狀沉淀。好氧菌增殖分裂迅速，感染24h內(nèi)即可使培養(yǎng)基渾濁；厭氧菌在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件下增殖緩慢，需要較長(zhǎng)時(shí)間才會(huì)觀察到渾濁現(xiàn)象。污染處理：由于國(guó)內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素使用泛濫，所以出現(xiàn)污

實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染防治2022/06/17: 實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染防治建立良好的規(guī)章制度對(duì)減少細(xì)胞污染會(huì)有很大的幫助。包括準(zhǔn)入制度、操作規(guī)范和日常管理制度。準(zhǔn)入制度：包括了人員的和物料的。人員需要進(jìn)行培訓(xùn)之后才能自己進(jìn)行操作，而且要符合穿戴要求才能進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，如白大褂、隔離服，口罩，手套等。而所需用到的物品，非一次性的物品應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌，而購(gòu)買的物品需要從正規(guī)的、可靠的渠道購(gòu)買。新買的細(xì)胞應(yīng)檢測(cè)驗(yàn)證后再使用。操作規(guī)范：對(duì)于常規(guī)操作最好制定規(guī)范，且實(shí)驗(yàn)室人員都要按操作規(guī)范進(jìn)行，不能隨意更改，同時(shí)也是培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)人員的良好操作習(xí)慣。比如，槍頭滴管吸完就不再

辟謠|中國(guó)品牌胎牛血清不等于新生牛血清2022/06/16: 對(duì)中國(guó)品牌的質(zhì)疑20多年生物領(lǐng)域快速發(fā)展，胎牛血清一直依賴進(jìn)口，國(guó)產(chǎn)血清通常只能提供新生牛血清，且對(duì)于科研客戶養(yǎng)多種細(xì)胞來(lái)講，新生牛往往無(wú)法滿足各種細(xì)胞的培養(yǎng)效果。因而國(guó)產(chǎn)血清被理解為新生牛血清，且質(zhì)量不穩(wěn)定。小牛出生2小時(shí)之內(nèi)不吃母乳的情況下采血，屬新生牛血清。中國(guó)品牌胎牛血清的崛起如：WINSERA為中國(guó)品牌胎牛血清，血源來(lái)自澳洲，中國(guó)內(nèi)蒙古等優(yōu)質(zhì)牧場(chǎng)，在國(guó)內(nèi)采用美國(guó)Hyclone進(jìn)口生產(chǎn)線加工生產(chǎn)。血清等級(jí)系列化，能滿足不同類型細(xì)胞的培養(yǎng)，得到了細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域?qū)＜覍W(xué)者的青睞，市場(chǎng)***在逐

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎 ? 如何處理?2022/06/14: 1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘??；(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除；(4)血清等級(jí)不足

胎牛血清和新生牛血清的有何區(qū)別，如何選擇？2022/06/14: 胎牛血清和新生牛血清的有何區(qū)別，如何選擇？?jī)烧咚拇偌?xì)胞因子、促貼附因子、IgG等其他活性物質(zhì)等組分與比例均有不同，進(jìn)口和部分國(guó)產(chǎn)胎牛血清通過(guò)心臟穿刺采血，而還有部分國(guó)產(chǎn)胎牛血清采自出生后8小時(shí)內(nèi)的胎牛血。Cell-Box采血工作人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)18個(gè)月以來(lái)的血源地篩選，通過(guò)一系列指標(biāo)檢測(cè)及試驗(yàn)對(duì)照，以極其苛刻的標(biāo)準(zhǔn)要求精選了國(guó)內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的血源地，并簽署了合作協(xié)定。每批次血清經(jīng)過(guò)批量混合后，連續(xù)3級(jí)0.1um精過(guò)濾制成。在定量灌裝后，又通過(guò)一系列的指標(biāo)檢測(cè)、多種細(xì)胞的培養(yǎng)測(cè)試和符合國(guó)際滅菌方法的工藝

ScienCell常見(jiàn)問(wèn)題解答2022/06/14: 問(wèn)：倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？答：倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期.代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng).問(wèn)：正常人類細(xì)胞能傳多少代？答：ScienCell不使用代數(shù)描述細(xì)胞的生長(zhǎng)潛能,因?yàn)槊恳晃豢蛻粲貌煌膫鞔壤?ScienCell研究室會(huì)在細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中標(biāo)注倍增次數(shù)。問(wèn)：非增殖細(xì)胞能傳代培養(yǎng)嗎？答：非增殖細(xì)胞不能進(jìn)行傳代培養(yǎng)，因?yàn)樗麄儾荒茉鲋?。非增殖?xì)胞包括：神經(jīng)元，小膠質(zhì)細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和其他一些細(xì)胞類型

細(xì)胞生長(zhǎng)變慢的原因？2022/06/10: 細(xì)胞生長(zhǎng)逐漸變慢是什么原因？細(xì)胞增殖變慢有以下原因：1.消化過(guò)度2.傳代過(guò)密3.細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良4.細(xì)胞頻繁傳代5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化6.細(xì)胞存在污染。培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%或10%CO2？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí)，則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。CO2培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔？定期(

細(xì)胞培養(yǎng)中的“黑點(diǎn)”2022/06/10: 培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn)，是污染嗎？首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染；如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒(méi)有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則，是否運(yùn)動(dòng)，是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則，做布朗運(yùn)動(dòng)，黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片（可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過(guò)度引起的），也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致，快速移動(dòng)，很可能是細(xì)菌污染。如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，不要細(xì)胞長(zhǎng)老了再傳代；掌握好消化時(shí)間

購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng)2022/06/10: 購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理？一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下，很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象，聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細(xì)胞，因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度

胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識(shí)2022/06/09: 胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識(shí)1）胎牛血清是品質(zhì)高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少；2）應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛，新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛；3）由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題，在保證質(zhì)量的前提下，胎牛血清的正確存放

ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題2022/06/06: ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題01問(wèn)：看說(shuō)明書(shū)里，如果樣本濃度高，可以不用稀釋，直接加原液。這個(gè)直接加血清原液，你們自己親自做過(guò)嗎？因?yàn)橹拔覀冇脛e家的，他們說(shuō)明書(shū)里，加樣是：10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們?nèi)绻绻麧舛雀?，可以加原液?jiǎn)?？他們說(shuō)可以，可能他們沒(méi)做過(guò)，說(shuō)可以。可我們做了，不可以。問(wèn)他們，又說(shuō)是可能離子濃度不夠。答：ELISA試劑盒檢測(cè)范圍是固定的，樣本是否稀釋是根據(jù)樣本實(shí)際濃度來(lái)選擇的，但前提條件樣本要落在檢測(cè)范圍內(nèi)，濃度高于檢測(cè)范圍，稀釋樣本達(dá)到檢測(cè)范圍內(nèi)，濃度低于檢測(cè)范圍，

ELISA試劑盒代測(cè)之固體樣本處理問(wèn)題2022/06/06: 固體樣本處理問(wèn)題01組織樣本操作流程：1、組織樣本必須保持鮮重，如果是凍存的組織，應(yīng)該室溫平行2小時(shí)以上，然后用生理鹽水沖洗干凈，再用濾紙把周圍的水分吸干，稱重！組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS（PH=7.2-7.4，濃度為0.01mol/L）勻漿的比例為1:10，相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后，離心取上清，離心轉(zhuǎn)數(shù)為5000轉(zhuǎn)，但不能超過(guò)5000轉(zhuǎn)，時(shí)間為15分鐘。4、實(shí)驗(yàn)中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣本處理方式土壤樣本處

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么 ? 如何處理?2022/06/06: 細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么?如何處理?1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘??；(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)

不同批次血清顏色為什么有差異？2022/05/30: 這是在胎牛血清使用過(guò)程中，常常出現(xiàn)的問(wèn)題，關(guān)于這個(gè)問(wèn)題的解答如下：1.血清中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過(guò)程中細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無(wú)關(guān)，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。國(guó)家藥典規(guī)定≤20mg/dL（注：1dL=100ml），也寫(xiě)作＜0.02%（w/v）。1.培養(yǎng)嬌貴原代細(xì)胞或干細(xì)胞，建議選用澳洲血源或新西蘭血源的FBS，由于國(guó)內(nèi)市場(chǎng)FBS品種繁多雜亂，其中，不乏水貨、假貨，極易混淆用戶的選購(gòu)視線。為節(jié)省用戶的寶貴時(shí)間及進(jìn)度，且應(yīng)選擇能提供正規(guī)進(jìn)口報(bào)關(guān)憑證

血清的運(yùn)輸過(guò)程有保障嗎？如果我的FBS到達(dá)時(shí)已經(jīng)部分解凍，還能使用嗎？2022/05/30: 血清在運(yùn)輸過(guò)程中，均采用全程干冰運(yùn)輸，但由于不可控因素（天氣、路途）已經(jīng)部分解凍，血清仍然可以使用，但是建議先將血清在2-8℃冷藏中充分解凍，之后通過(guò)輕微搖晃混勻后，再移至-20℃進(jìn)行凍存。1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫(yī)用冰箱。血清解凍時(shí)，應(yīng)從-80℃先轉(zhuǎn)移至-20℃再轉(zhuǎn)移至2-8℃依次過(guò)夜升溫解凍，待胎牛血清在2-8℃基本解凍后，再轉(zhuǎn)移至室溫（16℃-25℃）*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過(guò)程中，需要有規(guī)則的輕微搖晃，使之混勻，避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚致使產(chǎn)生絮狀物。血清

應(yīng)該如何儲(chǔ)存和解凍胎牛血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損 ?2022/05/30: 1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫(yī)用冰箱。血清解凍時(shí)，應(yīng)從-80℃先轉(zhuǎn)移至-20℃再轉(zhuǎn)移至2-8℃依次過(guò)夜升溫解凍，待胎牛血清在2-8℃基本解凍后，再轉(zhuǎn)移至室溫（16℃-25℃）*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過(guò)程中，需要有規(guī)則的輕微搖晃，使之混勻，避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚致使產(chǎn)生絮狀物。血清溶解后，若一次無(wú)法用完一瓶，可將血清分裝在無(wú)菌、無(wú)熱原的容器內(nèi)密封冷凍儲(chǔ)存。2.血清切勿直接從-20℃轉(zhuǎn)移至常溫以及37℃或56℃溫水浴解凍。溫差太大極易產(chǎn)生沉淀，在37℃放置太久，容易使血

培養(yǎng)基中添加了胎牛血清和抗生素后，可長(zhǎng)期保存嗎 ?2022/05/30: 培養(yǎng)基中添加了胎牛血清和抗生素后，可長(zhǎng)期保存嗎?1.已經(jīng)配制血清及抗生素的新鮮培養(yǎng)液，建議用戶盡快使用完，因?yàn)檠搴涂股刂幸恍┗镜臓I(yíng)養(yǎng)成分在解凍時(shí)也已經(jīng)開(kāi)始降解。1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫(yī)用冰箱。血清解凍時(shí)，應(yīng)從-80℃先轉(zhuǎn)移至-20℃再轉(zhuǎn)移至2-8℃依次過(guò)夜升溫解凍，待胎牛血清在2-8℃基本解凍后，再轉(zhuǎn)移至室溫（16℃-25℃）*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過(guò)程中，需要有規(guī)則的輕微搖晃，使之混勻，避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚致使產(chǎn)生絮狀物。血清溶解后，若一次無(wú)法用完一

胎牛血清常見(jiàn)問(wèn)題及申請(qǐng)?jiān)囉醚b活動(dòng)開(kāi)始啦~~2022/05/23: 一、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。*溶解后建議盡快使用，若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁?？偨Y(jié)：血清推薦在

ELISA試劑盒的注意事項(xiàng)2022/05/20: 注意事項(xiàng)1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但最好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸

ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧2022/05/17: ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。6.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置

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