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保存溫度
2-8℃避光
注意事項
1.有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。
2.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
顯微鏡
儀器準備
1. 37℃溫箱
2. 移液器
3. 冰箱
4. 冰盒
試劑準備
1. 10%福爾馬林固定液
2. 蒸餾水
3. 系列乙醇
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1. 切片脫蠟應盡量干凈。
2. 酸性乙醇的分化時間應根據切片薄厚,組織的類別和新舊而定。
3. 磷鉬酸的作用一方面是使染上紅色的膠原纖維被分化成無色或淡紅色,而肌纖維纖維素等仍呈先鮮紅色;另一方面對膠原纖維又起媒染作用,使膠原纖維與苯胺藍液較易結合。
4. 苯胺藍液染色后用弱酸溶液處理,目的是除去原漿內的藍色,使染色鮮艷和清晰。如Zenker液固定的組織,弱酸溶液處理可延長至5分鐘。
5. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
使用方法
操作步驟(僅供參考)
1. 組織固定于10%福爾馬林固定液,常規脫水包埋。切片厚4um,常規脫蠟至水;
2. 切片入試劑A,37℃溫箱內2小時進行媒染或室溫過夜。
3. 流水沖洗至黃色消失。
4. 試劑B染色2-3分鐘,水洗。
5. 試劑C染色2-3分鐘,水洗。
6. 試劑D分化數秒,流水沖洗10分鐘。
7. 試劑E染色10分鐘,蒸餾水沖洗。
8. 試劑F磷鉬酸溶液處理10分鐘。
9. 傾去試劑F,不用水洗,直接滴加試劑G苯胺藍染色5分鐘。
10. 試劑H弱酸處理2分鐘。
11. 95%乙醇快速脫水,無水乙醇脫水3次,每次5-10秒。
12. 二甲苯透明3次,每次1-2分鐘。
13. 中性樹膠封片。
14. 結果觀察。

結果:
膠原纖維: 藍色;
肌纖維、胞漿、纖維素、紅細胞、角蛋白: 紅色;
細胞胞核: 藍褐色。

參考文獻
1. Yuyan Lu, et al.
Valsartan attenuates pulmonary hypertension via suppression of mitogen activated protein kinase signaling and matrix metalloproteinase expression in rodents
Molecular Medicine Reports 2017

2. Fei Hou, et al.
Attenuation of liver fibrosis by herbal compound 861 via upregulation of BMP-7/Smad signaling in the bile duct ligation model rat
Molecular Medicine Reports 2016

3. Huikuan Gao, et al.
Sequential changes in autophagy in diabetic cardiac fibrosis
Molecular Medicine Reports 2015
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