BY-0283 HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0283
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/17 16:58:51
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HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系細胞系是研究乳腺上皮細胞轉化及病毒致癌機制的du特模型，以穩定整合 SV40 大 T 抗原基因、保留部分正常乳腺上皮表型及潛在轉化能力為核心特征，在乳腺上皮細胞永生化機制、病毒 oncogene 作用及乳腺癌早期發生研究中應用廣泛，為解析乳腺上皮細胞從正常到惡性轉化的早期事件提供了可靠實驗工具。
來源與背景：該細胞系于 1974 年從健康女性的乳腺組織中分離，通過整合猿猴病毒 40（SV40）的大 T 抗原基因實現永生化，是首ge被證實穩定表達 SV40 大 T 抗原的人乳腺上皮細胞系。與原發性乳腺癌細胞系（如 MCF-7）相比，其源自正常乳腺組織，經病毒基因修飾后既保留部分正常乳腺上皮特性，又具備永生化特征，尤其適合研究乳腺上皮細胞的永生化機制及病毒致癌基因的作用。作為連接正常乳腺上皮與惡性轉化的過渡模型，HBL-100 的建立填bu了乳腺上皮細胞永生化研究的空白，至今仍是探討病毒與乳腺癌關聯及上皮細胞轉化早期事件的重要參照。
細胞特性：形態上呈現典型的上皮樣特征，貼壁生長且排列緊密呈鋪路石樣，細胞呈多邊形，細胞質豐富，細胞核相對規則，核仁不明顯，核質比約 1:1.5，形態接近正常乳腺上皮細胞，但核分裂象略多于正常細胞。核心特性體現為SV40 大 T 抗原穩定表達，免疫印跡檢測顯示大 T 抗原持續高表達，該蛋白可與 p53、Rb 等抑癌蛋白結合并使其失活，這一特征是細胞永生化的關鍵；部分正常表型保留，表達乳腺上皮標志物 CK18、CK19，陽性率分別為 90%、85%，同時表達上皮細胞黏附分子 E - 鈣粘蛋白，維持一定的細胞間連接，與正常乳腺上皮細胞的表型差異較小；有限惡性潛能，體外培養倍增時間約 72-96 小時，克隆形成率約 25%，裸鼠皮下接種成瘤率僅 10%，且成瘤速度極慢，6 周腫瘤體積約 0.2±0.1 cm3，遠低于惡性乳腺癌細胞系，表明其惡性程度低，處于轉化早期階段。傳代時采用常規消化液處理，因貼壁牢固，需消化 5-6 分鐘，傳代比例 1:2-1:3，連續傳代 100 次后仍保持 SV40 大 T 抗原表達及上皮形態，未出現明顯惡性進展。
培養條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基，添加 1% 抗菌劑及 5μg/ml 胰島素，培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞對胰島素依賴明顯，去除胰島素后增殖速率下降 40%，細胞形態變得扁平。細胞密度維持在 30%-70%，過度匯合會導致細胞接觸抑制明顯，增殖停滯。對血清質量敏感，低質量血清可使細胞凋亡率從 5% 升至 20%，傳代時用含血清培養基終止消化，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復蘇后存活率可達 80% 以上，24 小時貼壁率超過 90%，細胞功能恢復正常。
檢測鑒定：經微生物篩查，無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染，符合實驗細胞質量標準。免疫細胞化學檢測顯示 CK18、CK19 陽性，ER、PR 陰性，與正常乳腺上皮細胞的激素受體表型一致。PCR 及測序證實 SV40 大 T 抗原基因穩定整合于細胞基因組，且無其他致癌基因的異常激活。染色體核型分析呈現近二倍體核型，存在少數染色體數目異常，但結構畸變較少，與正常乳腺上皮細胞的核型差異較小。功能驗證中，p53 蛋白檢測顯示其與大 T 抗原形成復合物，失去正常轉錄活性，證實大 T 抗原的功能活性。
應用領域：在永生化機制研究中，揭示 SV40 大 T 抗原通過滅活 p53 和 Rb 通路使乳腺上皮細胞突破增殖極限，為 “病毒蛋白 - 抑癌蛋白失活 - 永生化” 機制提供直接證據。在病毒致癌研究中，用于探索 SV40 大 T 抗原與乳腺上皮細胞惡性轉化的關聯，發現長期培養中該細胞系可自發出現染色體不穩定性，為病毒基因啟動轉化提供線索。在藥物篩選方面，作為評估化學致癌物誘導轉化的模型，研究顯示苯并芘處理可使細胞克隆形成率提升至 45%，部分細胞獲得更強的侵襲能力。此外，該細胞系可用于乳腺上皮細胞功能研究，如乳腺球蛋白的合成與分泌調控，為理解正常乳腺生理功能提供實驗基礎。
與其他乳腺細胞系相比，HBL-100 的優勢在于其du特的 “正常 - 永生化” 過渡特征及 SV40 大 T 抗原的穩定表達，能更真實地模擬乳腺上皮細胞轉化的早期階段。通過該細胞系的研究，已闡明多個調控乳腺上皮永生化的關鍵基因，為解析乳腺癌發生的早期機制及病毒致癌作用提供了扎實的實驗依據，持續推動乳腺腫瘤發生機制研究的發展。
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