BY-0721 Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0721
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/9 11:30:12
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Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞系
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞系源自 BALB/c 小鼠骨髓瘤細胞系 P3X63Ag8 的突變株，因喪失抗體分泌能力且融合率高，成為單克隆抗體制備的核心工具細胞，在免疫學、腫瘤學及生物制藥領域應用廣泛。
該細胞系具有典型的骨髓瘤細胞形態與表型特征。顯微鏡下，細胞呈圓形或橢圓形，懸浮生長，部分細胞聚集成小團，核質比高，染色質疏松，可見 1-2 個明顯核仁，胞質較少且呈嗜堿性。免疫表型分析顯示，其表達 B 淋巴細胞分化抗原 CD19、CD20，但不表達免疫球蛋白重鏈和輕鏈，這一特性與其抗體分泌缺陷的表型一致，也正是這一特征使其在雜交瘤技術中不ke或缺 —— 與 B 淋巴細胞融合后，既能保留骨髓瘤細胞的無限增殖能力，又能借助 B 細胞的抗體合成基因，實現特異性單克隆抗體的持續分泌。
Sp2/0-Ag14 細胞的生長特性使其適合大規模培養。在含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基中，37℃、5% CO?條件下，細胞增殖迅速，傳代周期約 24-36 小時，對數生長期細胞活力可達 95% 以上。與其他骨髓瘤細胞系相比，其對培養環境適應性更強，在無血清培養基中仍能維持一定增殖能力，便于后期抗體純化工藝的優化。此外，該細胞系遺傳背景穩定，連續傳代 50 次后仍保持融合能力與缺陷型表型，為雜交瘤制備的穩定性提供了保障。
作為雜交瘤技術的 “黃金搭檔”，Sp2/0-Ag14 細胞的核心優勢在于高效融合能力與篩選標記。其攜帶次黃piao呤 - 鳥piao呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT）缺陷型突變，在 HAT（次黃piao呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶）選擇培養基中無法存活；而正常 B 淋巴細胞雖能利用 HAT 合成核酸，但體外存活時間有限。兩者融合形成的雜交瘤細胞，既繼承了骨髓瘤細胞的無限增殖能力，又獲得 B 細胞的 HGPRT 表達，可在 HAT 培養基中選擇性存活，這一機制使雜交瘤篩選效率大幅提升，顯著降低非特異性克隆的干擾。
在單克隆抗體制備流程中，Sp2/0-Ag14 細胞的應用貫穿關鍵環節。免疫后的小鼠脾臟 B 淋巴細胞與該細胞在聚乙二醇（PEG）或電融合技術介導下融合，經 HAT 培養基篩選后，通過有限稀釋法或流式分選獲得單克隆雜交瘤，再經 ELISA 檢測抗體效價與特異性，最終篩選出高效分泌目標抗體的細胞株。例如，在抗新guan病毒 Spike 蛋白單克隆抗體制備中，該細胞系與免疫小鼠的 B 細胞融合后，可快速獲得能特異性識別病毒抗原的雜交瘤，為診斷試劑與中和抗體藥物研發提供核心材料。
除抗體研發外，Sp2/0-Ag14 細胞在腫瘤機制研究中也有重要價值。其作為 B 淋巴細胞惡性轉化的模型，可用于探究骨髓瘤發病的分子機制 —— 研究發現，該細胞系中 NF-κB 信號通路持續激活，通過調控抗凋亡基因 Bcl-2、 Survivin 的表達維持細胞存活，這一機制與人類多發性骨髓瘤的病理特征高度相似，為開發 NF-κB 抑制劑提供了理想的篩選模型。
在生物制藥領域，Sp2/0-Ag14 細胞衍生的雜交瘤可通過懸浮培養或生物反應器大規模生產單克隆抗體，其分泌的抗體純度高、特異性強，廣泛應用于臨床診斷（如腫瘤標志物檢測）、靶向治療（如抗 CD20 單抗治療淋巴瘤）及基礎研究中的抗原檢測（如免疫熒光、Western blot）。近年來，通過基因工程改造該細胞系，使其表達人源化抗體恒定區，可降低鼠源抗體的免疫原性，推動單克隆抗體藥物的臨床轉化。
此外，該細胞系在免疫學基礎研究中也發揮作用。通過構建攜帶特定抗原基因的 Sp2/0-Ag14 細胞，可作為抗原呈遞細胞研究 T 細胞活化機制；或與 T 細胞共培養，觀察骨髓瘤細胞對免疫細胞功能的抑制作用，解析腫瘤免疫逃逸的分子策略，為免疫檢查點抑制劑的研發提供理論依據。
隨著細胞培養技術的進步，Sp2/0-Ag14 細胞的無血清懸浮培養體系日益成熟，結合基因編輯技術實現抗體表達量的定向提升，使其在單克隆抗體制備中的效率與產量持續優化，為生物制藥行業的發展提供了強大助力。
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