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BY-0633 A7R5大鼠胸大動脈平滑肌細胞系

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A7R5大鼠胸大動脈平滑肌細胞系
A7R5大鼠胸大動脈平滑肌細胞系在血管生物學與心血管疾病研究領域意義重大,憑借其典型的大動脈平滑肌細胞特性,成為探究血管收縮舒張機制、動脈粥樣硬化發病原理及篩選血管活性藥物的重要實驗模型,為血管相關研究提供了可靠的細胞工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源于大鼠胸主動脈平滑肌組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態在增殖期多為長梭形或帶狀,呈平行排列或漩渦狀生長,胞質豐富,可見明顯的肌絲結構,細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,傳代后 24 小時貼壁率約 94%。核心參數表現穩定:倍增時間約 36 小時,連續傳代 40 次后仍保持正常染色體核型;血管平滑肌特異性標志物如 α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、鈣調蛋白(Calponin)等表達陽性,經免疫熒光檢測陽性率達 95%,細胞純度達 96% 以上;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,保障實驗結果的準確性。
科研應用價值:在血管收縮機制研究中,A7R5 細胞對去甲shen上腺素、血管緊張素 Ⅱ 等血管活性物質反應敏感,經 10??M 去甲shen上腺素處理后,細胞內鈣離子濃度在 30 秒內升高 2.8 倍,收縮率達 45%,可模擬體內血管平滑肌的收縮過程,為解析鈣信號調控的收縮通路提供理想模型。動脈粥樣硬化研究方面,該細胞在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導下,會出現泡沫細胞樣變,膽gu醇酯含量增加 3.2 倍,單核細胞趨化蛋白 - 1(MCP-1)分泌量上升 2.5 倍,能很好地模擬動脈粥樣硬化早期的細胞病理變化,助力抗動脈粥樣硬化藥物的篩選。此外,在高血壓研究中,高濃度血管緊張素 Ⅱ 可使該細胞增殖活性增強,Ki67 陽性率提高 2.1 倍,可用于探究高血壓狀態下血管平滑肌細胞的異常增殖機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,添加 1% 抗生素混合液預防污染,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基應每 3 天更換一次,確保營養充足。傳代時,先吸去舊培養基,用 PBS 清洗細胞 2 次,加入消化液,37℃孵育 3-5 分鐘,待細胞邊緣回縮、間隙增大后,加入含血清的培養基終止消化,輕輕吹打制成細胞懸液,按 1:3-1:5 的比例接種到新的培養瓶中,每 4-5 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 之間。凍存時,選用含 20% 胎牛血清和 10% DMSO 的 DMEM 培養基作為凍存液,將細胞濃度調整為 1×10?-5×10?個 /ml,分裝到凍存管后,經程序降溫盒梯度降溫至 - 80℃,次日轉入液氮長期保存。復蘇時,將凍存管從液氮中取出,迅速放入 37℃水浴中融化,離心去除凍存液后,接種到含新鮮培養基的培養瓶中,24 小時后更換培養基。

A7R5 大鼠胸大動脈平滑肌細胞系以其穩定的生物學特性、明確的功能特征及廣泛的應用場景,在血管疾病基礎研究和臨床轉化中發揮著重要作用,為推動心血管領域研究的發展提供了有力支持。

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