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BY-1256 RH-35大鼠肝癌細胞系

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RH-35大鼠肝癌細胞系
RH-35大鼠肝癌細胞系作為源自大鼠肝癌組織的惡性上皮細胞模型,因具備顯著的侵襲轉移能力和穩定的肝內成瘤特性,在肝癌轉移機制、腫瘤微環境互作及抗轉移藥物研發中具有重要價值,成為探究肝細胞癌惡性進展的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠化學誘導性肝癌,經原代培養和克隆化篩選建立。細胞形態呈上皮樣,以多邊形為主,部分呈梭形,胞體大小不均(直徑約 15-25μm),胞質內可見脂滴樣結構,約 15% 細胞呈現多核現象,細胞核畸形明顯,核仁增大且數量達 2-4 個。生長方式為貼壁生長,呈雜亂無章的堆疊狀排列,接觸抑制wan全消失,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數表現出高侵襲性肝癌細胞特征:倍增時間約 36 小時,連續傳代 50 次后增殖能力無明顯衰減;染色體核型為超二倍體(染色體數 44-46 條),存在 11 號染色體長臂擴增現象;肝癌標志物甲胎蛋白(AFP)陽性率達 94%,細胞角蛋白 18(CK18)陽性率 91%,白蛋白表達量僅為正常肝細胞的 20%;Transwell 實驗中穿膜細胞數是 CBRH-7919 細胞的 2.3 倍,體外劃痕愈合率 48 小時達 85%;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在轉移機制研究中,RH-35 細胞經轉化生長因子 -β(TGF-β)處理后,上皮間質轉化(EMT)標志物 E - 鈣粘蛋白表達量下降 62%,波形蛋白表達量增加 3.8 倍, RhoA GTP 酶活性增強 4.2 倍,可模擬肝癌細胞從原發灶脫離的分子過程,為解析肝內轉移級聯反應提供理想模型。
藥物篩選領域,該細胞對基質金屬蛋白酶抑制劑反應敏感,經 GM6001 處理后,侵襲能力下降 65%,肝內轉移灶形成率降低 58%,適用于抗轉移藥物的活性評估。在腫瘤微環境研究方面,該細胞與肝星狀細胞共培養時,結締組織生長因子(CTGF)分泌量增加 5 倍,膠原蛋白合成量提升 4.3 倍,可用于探究肝癌 - 基質細胞互作介導的轉移前微環境形成機制。
此外,將該細胞經脾靜脈注射構建肝轉移模型,2 周后肝內轉移灶數達 8-12 個 / 只,轉移率 100%,顯著高于皮下接種模型,為體內評估抗轉移藥物提供精準模型。
培養與保存規范:推薦使用含 12% 胎牛血清的 MEM 培養基,添加 1% 谷an酰胺、0.1mM 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次,維持細胞密度在 30%-70% 以保持高侵襲活性。傳代時,采用細胞刮除法收集貼壁細胞,經 PBS 輕柔洗滌后吹打分散,傳代比例 1:4-1:6,每 2-3 天傳代一次,避免細胞密度過高導致 EMT 表型逆轉。
凍存液配方為培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,細胞濃度調整為 8×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 90% 以上,3 代內可恢復原有轉移能力。運輸采用 T-75 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置 6 小時再更換培養基,鏡檢確認細胞無聚團現象后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作需符合生物安全二級防護要求。
RH-35 大鼠肝癌細胞系以其突出的轉移潛能、穩定的惡性表型及對微環境的高響應性,在肝癌轉移研究領域具有不可替代的價值,為開發阻斷肝內轉移的新型治療策略提供了可靠的細胞平臺。

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