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BY-1259 1/EJ 1-1大鼠纖維母細胞系

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1/EJ 1-1大鼠纖維母細胞系
1/EJ 1-1大鼠纖維母細胞系作為源自大鼠正常結締組織的成纖維細胞模型,因保留典型的纖維母細胞生物學特性及穩定的增殖分化能力,在創傷修復機制、組織纖維化病理及細胞外基質代謝研究中應用廣泛,成為探究成纖維細胞功能及相關疾病機制的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠皮下結締組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈典型長梭形,胞體細長,兩端尖細,類似紡錘狀,胞質均勻,可見細絲狀結構,細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰可見。生長方式為貼壁生長,呈平行排列或漩渦狀分布,具有明顯的接觸抑制現象,傳代后 24 小時貼壁率達 93%。核心參數表現出纖維母細胞特征:倍增時間約 50 小時,連續傳代 25 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,波形蛋白(Vimentin)陽性率達 98%,α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)在基礎狀態下陽性率低于 5%,結蛋白(Desmin)表達陰性;細胞外基質相關蛋白如 Ⅰ 型膠原蛋白、纖維連接蛋白分泌活躍,培養液中 Ⅰ 型膠原蛋白濃度達 120ng/mL;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體異常;無微生物污染,細胞純度達 96%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在創傷修復研究中,1/EJ 1-1 大鼠纖維母細胞展現出顯著的遷移和增殖響應。經血小板衍生生長因子(PDGF)處理 24 小時后,細胞遷移距離增加 65%,增殖活性提升 40%,Ⅰ 型膠原蛋白 mRNA 表達量增加 2.3 倍,可模擬創傷部位成纖維細胞的活化過程,為解析創傷愈合機制提供理想模型。
組織纖維化研究方面,該細胞在轉化生長因子 -β1(TGF-β1)刺激下,α-SMA 陽性率上升至 78%,呈現肌成纖維細胞表型,細胞外基質沉積量增加 3.2 倍,能很好地模擬纖維化過程中成纖維細胞的異常活化,助力肺纖維化、肝纖維化等疾病的病理機制研究。
藥物篩選領域,該細胞對抗纖維化藥物反應敏感,經特定藥物處理后,TGF-β1 誘導的膠原蛋白合成量下降 45%,α-SMA 表達量降低 52%,適用于抗纖維化藥物的活性評估。此外,通過構建該細胞與上皮細胞的共培養體系,可探究上皮 - 間質相互作用在組織修復中的調控機制,為創傷治療提供新的研究思路。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,添加 1% 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 3 天更換一次,以保證細胞獲得充足營養。傳代時,當細胞融合度達到 80%-85% 時進行操作,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入適量細胞解離液(不含yi酶成分),37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:3-1:4,每 4-5 天傳代一次,避免細胞過度融合影響其正常功能。
凍存液采用培養基、胎牛血清和 DMSO 按 7:2:1 的比例配制,將細胞濃度調整為 1×10?-3×10?個 /ml,分裝后經梯度降溫盒降至 - 80℃,24 小時后轉入液氮中保存。復蘇時,將凍存管從液氮中取出,迅速放入 37℃水浴中解凍,離心后更換新鮮培養基,復蘇后細胞存活率可達 88% 以上,2-3 代后即可恢復正常的生長和功能。運輸采用干冰運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需及時處理并觀察細胞狀態,確認細胞形態正常、無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁振動培養瓶,以防細胞形態改變。

1/EJ 1-1 大鼠纖維母細胞系以其穩定的生物學特性、典型的纖維母細胞功能及易于培養的優勢,在創傷修復與纖維化研究領域發揮著重要作用,為揭示相關疾病的發病機制和開發新型治療藥物提供了可靠的細胞模型。

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