BY-0561 HepG2.2.15表達HBV病毒的人肝細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0561
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- 更新時間 2025/7/2 11:15:27
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HepG2.2.15表達HBV病毒的人肝細胞系
HepG2.2.15表達HBV病毒的人肝細胞系的基礎(chǔ)上,通過轉(zhuǎn)染乙肝病毒(HBV)全基因組 DNA 構(gòu)建而成的特殊細胞模型。由于 HBV 具有嚴格的嗜肝性且缺乏合適的體外感染模型,HepG2.2.15 細胞系的成功建立,為乙肝病毒相關(guān)研究提供了關(guān)鍵平臺,極大地推動了乙型肝炎發(fā)病機制探索、抗病du藥物研發(fā)等領(lǐng)域的發(fā)展。
在生物學特性方面,HepG2.2.15 細胞保留了 HepG2 細胞貼壁生長的特性,光學顯微鏡下細胞呈多邊形或不規(guī)則形,細胞間連接緊密,細胞核大且深染,核仁明顯,細胞質(zhì)豐富,內(nèi)含大量線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器,以滿足細胞代謝和病毒復制需求。與親本 HepG2 細胞相比,HepG2.2.15 細胞能夠持續(xù)穩(wěn)定地表達 HBV 的多種抗原,包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝 e 抗原(HBeAg)以及核心抗原(HBcAg),并可分泌完整的 HBV 病毒顆粒,其病毒復制過程涵蓋了逆轉(zhuǎn)錄、病毒基因組整合等關(guān)鍵步驟,模擬了體內(nèi) HBV 感染肝細胞的過程。在代謝上,HepG2.2.15 細胞由于 HBV 感染的影響,糖代謝、脂代謝等多條代謝通路發(fā)生重編程,糖酵解途徑增強,葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白 GLUT1 表達上調(diào),同時脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達改變,為病毒的組裝和釋放提供物質(zhì)基礎(chǔ)。
從分子機制來看,HepG2.2.15 細胞中 HBV 的復制與調(diào)控涉及復雜網(wǎng)絡(luò)。HBV 共價閉合環(huán)狀 DNA(cccDNA)作為病毒轉(zhuǎn)錄的模板,在細胞核內(nèi)穩(wěn)定存在并持續(xù)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生前基因組 RNA(pgRNA)等多種病毒 RNA。pgRNA 進入細胞質(zhì)后,在病毒逆轉(zhuǎn)錄酶作用下逆轉(zhuǎn)錄為負鏈 DNA,隨后合成正鏈 DNA,形成子代病毒基因組。在此過程中,細胞內(nèi)的一些宿主因子對 HBV 復制起到關(guān)鍵作用,如肝臟富集轉(zhuǎn)錄因子可調(diào)控 cccDNA 轉(zhuǎn)錄;同時,HBV 編碼的蛋白也會反作用于宿主細胞,如 X 蛋白(HBx)可激活 NF-κB、MAPK 等信號通路,促進細胞增殖和抗凋亡,為病毒持續(xù)復制創(chuàng)造有利環(huán)境,同時也與肝癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)。此外,HepG2.2.15 細胞中干擾素信號通路常處于被抑制狀態(tài),這是 HBV 逃逸宿主免疫監(jiān)視的重要機制之一。
在科研與應(yīng)用領(lǐng)域,HepG2.2.15 細胞系成果豐碩。在乙肝發(fā)病機制研究中,以該細胞系為模型,通過基因編輯技術(shù)敲低或過表達特定宿主基因,可深入探究病毒與宿主細胞的相互作用機制。例如,研究發(fā)現(xiàn)敲低細胞表面的 HBV 受體牛磺膽酸鈉共轉(zhuǎn)運多肽(NTCP),可顯著抑制 HBV 感染,明確了 NTCP 在病毒入侵中的關(guān)鍵作用。在抗病du藥物研發(fā)方面,HepG2.2.15 細胞系是篩選新型抗 HBV 藥物的重要工具。通過檢測藥物對細胞內(nèi) HBsAg、HBeAg 分泌量、病毒 DNA 水平的影響,能夠評估藥物的抗病毒活性。如核苷(酸)類似物恩ti卡韋、替諾fu韋等藥物在 HepG2.2.15 細胞實驗中,可有效抑制病毒 DNA 合成,為臨床用藥提供了前期實驗依據(jù)。在乙肝疫苗評價中,HepG2.2.15 細胞可用于評估疫苗誘導的中和抗體對 HBV 感染的阻斷作用,通過將疫苗產(chǎn)生的抗體與細胞共同孵育,觀察病毒感染率變化,輔助篩選高效疫苗。
盡管 HepG2.2.15 細胞系應(yīng)用廣泛,但也存在局限性。它作為永生化的肝癌細胞衍生系,與正常肝細胞在基因表達和功能上存在差異,無法wan全模擬體內(nèi)真實的 HBV 感染微環(huán)境;且長期傳代培養(yǎng)后,病毒復制能力可能下降,影響實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。未來,結(jié)合類器官培養(yǎng)、3D 細胞培養(yǎng)技術(shù)以及單細胞測序等手段,優(yōu)化 HepG2.2.15 細胞模型,將助力乙肝研究取得新突破。
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