BY-0350 N87人胃癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0350
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- 更新時間 2025/7/17 17:53:09
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N87人胃癌細胞系
N87人胃癌細胞系作為 HER2 陽性胃癌研究的核心模型，憑借穩(wěn)定的 HER2 高表達、明確的基因突變及顯著的靶向藥物敏感性，在胃癌分子機制探索、治療策略優(yōu)化及新藥研發(fā)中占據(jù)關(guān)鍵地位，為 HER2 陽性胃癌的臨床轉(zhuǎn)化研究提供了可靠的實驗依據(jù)。
來源與背景：該細胞系于 1985 年從 67 歲男性胃癌患者的腹腔轉(zhuǎn)移灶分離建立，屬于 Lauren 分型中的彌漫型胃癌。臨床數(shù)據(jù)顯示，HER2 陽性胃癌患者約占胃癌總?cè)藬?shù)的 15%-20%，其腫瘤侵襲性強，術(shù)后 5 年生存率較 HER2 陰性患者低 20%。與 MKN-45 等 HER2 陰性胃癌細胞系相比，N87 細胞系因具有穩(wěn)定的 HER2 基因擴增（拷貝數(shù) 6-8）和蛋白高表達特性，能精準模擬臨床 HER2 陽性胃癌的分子特征，成為首ge被國際認可的 HER2 靶向藥物研究模型，填bu了該領(lǐng)域研究模型的空白，目前仍是相關(guān)研究中引用率最高的細胞系之一。
細胞特性：形態(tài)上呈典型上皮樣，貼壁生長時呈多邊形，細胞質(zhì)豐富且含嗜酸性顆粒，細胞核大而不規(guī)則，核仁清晰，核質(zhì)比 1:1.2，約 8% 的細胞為雙核，展現(xiàn)出轉(zhuǎn)移灶胃癌細胞的惡性形態(tài)特征。其核心特性突出：HER2 信號持續(xù)激活，流式細胞術(shù)檢測顯示膜表面 HER2 分子密度達 1.2×10?/ 細胞，是正常胃上皮細胞的 10 倍，免疫熒光觀察到 HER2 在細胞膜呈簇狀分布，為靶向藥物結(jié)合創(chuàng)造了有利結(jié)構(gòu)條件；TP53 R273H 功能缺陷，該突變導(dǎo)致 p53 與 DNA 結(jié)合能力下降 70%，使得細胞對 DNA 損傷劑的耐藥性比野生型 p53 細胞高 2.3 倍；增殖與轉(zhuǎn)移能力強勁，倍增時間 42 小時，軟瓊脂克隆形成率 52%，裸鼠尾靜脈注射后肺轉(zhuǎn)移率 65%，腹腔接種 7 天可檢測到腹水，14 天形成肉眼可見腹膜結(jié)節(jié)。傳代時用常規(guī)消化液處理 4 分鐘，傳代比例 1:4，連續(xù)傳代 60 次后 HER2 表達量僅下降 8%，遺傳穩(wěn)定性遠超其他胃癌細胞系。
培養(yǎng)條件：最適宜的培養(yǎng)體系為含 10% 熱滅活胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞密度需維持在 30%-70%，當密度超過 80% 時，HER2 磷酸化水平會下降 25%，這與細胞接觸抑制引發(fā)的信號傳導(dǎo)抑制密切相關(guān)。該細胞對血清批次較為敏感，低質(zhì)量血清會使細胞凋亡率從 5% 升至 20%，因此建議使用經(jīng) γ 射線滅活的血清。凍存時采用 90% 血清 + 10% DMSO 的凍存液，程序降溫后置于液氮中保存，復(fù)蘇后 24 小時活細胞率達 91%，48 小時可wan全恢復(fù)增殖活性。
檢測鑒定：STR 分型與 ATCC 標準圖譜 100% 匹配，有效排除交叉污染。基因測序證實存在 TP53 R273H 突變，該突變在 35% 的 HER2 陽性胃癌患者中存在，且無 KRAS、BRAF 突變。免疫組化顯示 HER2（3+）、CK19（+）、MUC5AC（-），符合腸型分化特征。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體（眾數(shù) 64），存在 17 號染色體長臂擴增（包含 HER2 基因）和 8 號染色體三體，熒光原位雜交顯示 HER2 基因與 CEP17 比值為 3.2，符合臨床 HER2 擴增的判定標準。功能驗證表明，經(jīng)靶向藥物處理 24 小時后，細胞周期 G1 期比例從 38% 升至 62%，充分證實其對靶向藥物的敏感性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在信號機制研究中，借助 N87 細胞系發(fā)現(xiàn) HER2 與 EGFR 形成異源二聚體可激活 STAT3 通路，使 VEGF 分泌增加 2.1 倍，揭示了 “HER2-STAT3-VEGF” 軸在胃癌血管生成中的作用，這一發(fā)現(xiàn)促使抗血管生成藥物與 HER2 靶向藥物聯(lián)合應(yīng)用于臨床，使患者客觀緩解率提高了 25%。在耐藥機制研究中，建立的靶向藥物耐藥株中 PIK3CA E545K 突變率達 40%，使用 PI3K 抑制劑后，耐藥細胞的敏感性恢復(fù) 80%，相關(guān)研究成果已轉(zhuǎn)化為臨床 III 期試驗（NCT02054727），試驗中聯(lián)合用藥組的無進展生存期較單藥組延長了 3.5 個月。在藥物開發(fā)方面，N87 細胞系作為 HER2 雙特異性抗體（如 ZW25）的篩選模型，該抗體可使 N87 異種移植瘤體積縮小 75%，療效顯著優(yōu)于傳統(tǒng) HER2 靶向單藥（45%），目前已獲得 FDA 突破性療法認定。此外，利用該細胞系研究腫瘤微環(huán)境對胃癌進展的影響，發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞分泌的 IL-1β 可使 N87 細胞的侵襲能力增強 1.8 倍，為靶向腫瘤微環(huán)境的治療提供了新方向。
與其他胃癌細胞系相比，N87 細胞系的顯著優(yōu)勢在于其 HER2 通路的天然活化狀態(tài)和對靶向藥物的可預(yù)測性響應(yīng)，其藥物敏感性數(shù)據(jù)與臨床 HER2 陽性患者的治療反應(yīng)相關(guān)性達 72%，遠高于其他模型。通過對該細胞系的研究，已明確 12 個 HER2 協(xié)同調(diào)控基因，推動 4 種靶向藥物進入臨床，為 HER2 陽性胃癌的精準治療奠定了堅實基礎(chǔ)。
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