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BY-1242 Wistar大鼠骨髓間充質干細胞系

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Wistar大鼠骨髓間充質干細胞系
Wistar大鼠骨髓間充質干細胞系作為從 Wistar 大鼠骨髓中分離獲得的成體干細胞模型,因具備強大的自我更新能力和多向分化潛能,在干細胞生物學特性、組織修復機制及再生醫學研究中應用廣泛,是探究間充質干細胞功能及應用的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自 Wistar 大鼠股骨和脛骨骨髓,經密度梯度離心法分離并純化獲得。細胞在原代培養時呈圓形,24 小時后開始貼壁,逐漸伸展為長梭形,呈成纖維細胞樣形態,胞體細長,兩端尖細,細胞核呈橢圓形,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈漩渦狀或平行排列,傳代后 24 小時貼壁率達 90% 以上。核心參數表現出間充質干細胞特征:倍增時間約 48 小時,連續傳代 30 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,CD29、CD90 陽性率分別為 98% 和 96%,而造血細胞標志物 CD34、CD45 陽性率均低于 3%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體異常;無細菌、真菌、支原體等微生物污染,細胞純度達 95% 以上,確保實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在多向分化研究中,Wistar 大鼠骨髓間充質干細胞展現出出色的分化潛能。在成骨誘導條件下,培養 14 天后,細胞堿性磷酸酶活性升高 8 倍,礦化結節形成明顯,骨鈣素表達量增加 10 倍;成脂誘導時,10 天后細胞內出現大量脂滴,過氧化物酶體增殖物激活受體 γ(PPARγ)表達量上升 12 倍,充分模擬了間充質干細胞向骨和脂肪細胞分化的過程,為干細胞分化機制研究提供了理想模型。
在組織修復研究方面,該細胞在體外可分泌多種細胞因子,如血管內皮生長因子(VEGF)、轉化生長因子 -β(TGF-β)等,能促進血管生成和組織再生。將其應用于骨缺損模型中,可加速骨組織愈合,新生骨面積較對照組增加 40%;在心肌損傷修復研究中,可改善心肌功能,左心室射血分數提高 15%,體現了其在組織修復中的重要作用。
此外,該細胞還可用于藥物篩選,評估藥物對干細胞增殖和分化的影響,為再生醫學相關藥物研發提供支持。同時,在免疫調節研究中,其能抑制 T 淋巴細胞增殖,調節免疫反應,為自身免疫性疾病的研究提供新的思路。
培養與保存規范:培養 Wistar 大鼠骨髓間充質干細胞推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 低糖培養基,添加 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?的飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,以保證細胞獲得充足營養。
傳代時,當細胞融合度達到 80%-90% 時進行傳代操作。先用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液,37℃孵育 3-5 分鐘,待細胞變圓脫落,加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:3-1:5,每 3-4 天傳代一次,避免細胞過度融合影響其干細胞特性。
凍存時,凍存液采用培養基、胎牛血清和 DMSO 按 7:2:1 的比例配制,將細胞濃度調整為 1×10?-5×10?個 /ml,分裝后經梯度降溫盒降至 - 80℃,24 小時后轉入液氮中保存。復蘇時,將凍存管從液氮中取出,迅速放入 37℃水浴中解凍,離心后更換新鮮培養基,復蘇后細胞存活率可達 85% 以上,且 2-3 代后即可恢復正常的生長和分化能力。運輸采用干冰運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需及時處理并觀察細胞狀態,確認無誤后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,使用過程中需遵守相關實驗規范。
Wistar 大鼠骨髓間充質干細胞系以其穩定的生物學特性、強大的分化潛能和廣泛的應用前景,在干細胞研究領域占據重要地位,為深入探索干細胞的功能機制及再生醫學應用提供了可靠的細胞模型。

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