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BY-1212 L6大鼠骨骼肌成肌細胞系

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L6大鼠骨骼肌成肌細胞系
L6大鼠骨骼肌成肌細胞系作為源自大鼠骨骼肌組織的成肌細胞模型,因保留完整的肌分化潛能,在骨骼肌發育、肌損傷修復及肌病機制研究中應用廣泛,成為探究成肌細胞增殖分化調控及肌肉相關疾病的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠骨骼肌原代成肌細胞,經永生化處理建立。細胞形態在增殖期呈長梭形,兩端鈍圓,排列呈平行束狀,胞質內可見少量肌絲結構;融合分化后形成多核肌管,肌管長度可達 200μm 以上,約 30% 細胞融合成管。生長方式為貼壁生長,具有接觸抑制特性,傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數表現出成肌特征:倍增時間約 48 小時,處于增殖期的細胞活力旺盛;連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型(染色體數 42 條);成肌細胞標志物肌動蛋白(α-actin)、肌調節因子 MyoD 免疫熒光染色陽性率達 95%;分化期肌球蛋白重鏈(MHC)表達量較增殖期升高 8.3 倍;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在肌分化機制研究中,L6 細胞在低血清誘導下,48 小時內開始出現融合,72 小時形成成熟肌管,分化率可達 70%,其中肌分化關鍵基因 Myogenin 表達量增加 6.2 倍,可模擬骨骼肌細胞從增殖到分化的完整過程,為解析肌分化的分子調控網絡提供理想模型。肌損傷修復研究方面,該細胞在胰島素樣生長因子 - 1(IGF-1)刺激下,增殖活性提升 45%,遷移能力增強 38%,肌管再生速度加快 2 倍,能很好地模擬體內肌衛星細胞修復損傷的過程,助力肌損傷修復機制的探究。藥物篩選領域,該細胞對肌營養藥物反應敏感,經肌酸處理后,細胞內 ATP 含量增加 35%,肌管直徑增粗 20%,適用于評估肌營養藥物及肌病治療藥物的療效。此外,將該細胞與巨噬細胞共培養,可構建體外肌損傷炎癥模型,用于研究炎癥微環境對肌修復的影響。
培養與保存規范:增殖期推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,添加 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。誘導分化時采用含 2% 馬血清的 DMEM 培養基,更換頻率為每 24 小時一次,誘導周期約 5-7 天。傳代時采用含 0.25% 胰dan白酶的消化液處理,37℃孵育 3-5 分鐘,待細胞間隙增大后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:3-1:4,每 3-4 天傳代一次,維持細胞融合度在 60%-70% 以保持增殖活性。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 91% 以上,2-3 代內可恢復正常增殖分化能力。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁晃動培養瓶,防止細胞脫落。

L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系以其穩定的增殖分化能力、明確的成肌標志物表達及易于培養的優勢,在骨骼肌生物學研究與相關疾病藥物開發中發揮著重要作用,為揭示肌肉發育規律和開發肌病治療策略提供了可靠的實驗平臺。

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