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蛋白酶K的原理和應用

時間:2024/3/5閱讀:530
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新型蛋白酶 K(Proteinase K)的基因序列來源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)的 蛋白酶 K 基因,經過了基因定點突變和酵母細胞分泌表達、色譜純化。經過蛋白質工程化的新型蛋白酶 K 提高了比活性和純度,不含有細菌內毒素,應用范圍比天然蛋白酶 K 更廣泛。

新型蛋白酶 K 是現有蛋白酶中活性最高的品種,在 pH 4 到 pH 12 的條件下均 有活性,反應溫度介于 0~75oC 之間。在常用濃度的 SDS、尿素或 EDTA 存在時亦很 穩定。酶切割位點在脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,可以用于所有蛋白質的降解。目前主要應用于基因診斷試劑盒、基因組 DNA 提取試劑盒、RNA 提取試劑盒中去除核酸酶和其它蛋白污染。


新型蛋白酶 K 的應用也包括工業領域提取非蛋白類生物制品核酸、多糖類藥物,譬如 DNA 疫苗和肝素的制備,也可用于皮膚保健去除老化角 質層細胞、糅皮、制備水解蛋白調味品等場合,取代其它蛋白酶種類。


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