三级片视频播放,精品三级片在线观看,A级性爱视频,欧美+日韩+国产+无码+小说,亲子伦XX XX熟女,秋霞最新午夜伦伦A片黑狐,韩国理伦片漂亮的保拇,一边吃奶一边做边爱完整版,欧美放荡性护士videos

歡迎來到化工儀器網(wǎng)請登錄|免費(fèi)注冊|產(chǎn)品展廳|收藏該商鋪

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·14年

聯(lián)系電話

15800960770

您現(xiàn)在的位置：首頁> 技術(shù)文章 > 【感受態(tài)細(xì)胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品分類品牌

MicroBioLogics質(zhì)控菌種

SGM指示劑

Moltox 遺傳毒性（Ames）試驗(yàn)試劑

標(biāo)準(zhǔn)品

ATCC菌株

細(xì)胞株

細(xì)胞培養(yǎng)

免疫學(xué)

分子生物學(xué)

常規(guī)生化試劑

omega試劑盒

耗材和移液器

Roche

Qiagen

Promega

Merck-Millipore

Pierce

Amresco

R&D

CST

Sigma

invitrogen

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·14年

聯(lián)系人：: 周經(jīng)理劉經(jīng)理

電話：: 021-57730393

手機(jī)：: 15800960770

傳真：: 86-021-61496710

地址：: 上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座

個性化：: www.bnbiotech.com

網(wǎng)址：: www.bnbiotech.com

在線咨詢給我留言

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

【感受態(tài)細(xì)胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

2013-5-15　　閱讀(2713)

分享：

1. 從37℃培養(yǎng)16~20 h 的新鮮平板中挑取一個單菌落（如大腸桿菌DH52），或1 ml 新鮮的16~20 h過夜培養(yǎng)物，轉(zhuǎn)到一個含有100ml LB培養(yǎng)基的1 L 或500 ml 培養(yǎng)瓶中。于37℃振搖培養(yǎng)約2~3 h（旋轉(zhuǎn)搖床200~300 r/min），每隔20~30 min測量OD₆₀₀值≈0.4。

2. 在無菌條件下將細(xì)菌轉(zhuǎn)移到一個，用冰預(yù)冷的50 ml 聚丙烯離心管中，冰上放置10~20 min。

3. 于4℃4000轉(zhuǎn) /分離心10 min，回收細(xì)菌細(xì)胞。

4. 將管倒置1 min，以使zui后殘留的痕量培養(yǎng)液流盡。

5. 以10 ml 用冰預(yù)冷的0.1 mM CaCl₂重懸每份沉淀，放于冰上， 4℃4000轉(zhuǎn) /分離心10 min，回收細(xì)菌細(xì)胞。

6. 每50 ml 初始培養(yǎng)物用2 ml 冰預(yù)冷的0.1 M CaCl₂重懸每份沉定，此時，可以迅速將細(xì)胞分裝成小份，液氮中冰凍，-70℃貯存?zhèn)溆谩?/a>

7. 用無菌吸頭從感受態(tài)細(xì)胞懸液中取200 μl 轉(zhuǎn)移到無菌的微量離心管中，加DNA或連接反應(yīng)混合物（體積≤10 μl，DNA≤50 ng），輕旋以混勻內(nèi)容物，冰浴30 min。

8. 將離心管放到預(yù)加溫到42℃的水浴中，90 s。

9. 將混合物快速轉(zhuǎn)移到冰浴中，冷卻1~2分鐘，加入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基在37 ℃培養(yǎng)45 分鐘，使細(xì)胞復(fù)蘇，并表達(dá)質(zhì)粒所攜帶的轉(zhuǎn)化基因。

10. 將適當(dāng)體積（每個90 mm平板可達(dá)200 μl）已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到相應(yīng)抗生素的平板培養(yǎng)基上。

11. 將平板置于室溫至液體被吸收，倒置平板于37℃培養(yǎng)箱中，12~16 h，平板培養(yǎng)，克隆在此期間應(yīng)該出現(xiàn)，否則轉(zhuǎn)化不成功。

上一篇：【感受態(tài)細(xì)胞的制備】如何選擇進(jìn)口高

下一篇：【感受態(tài)細(xì)胞的制備】電擊和熱擊感受

上海北諾生物科技有限公司 - 主營產(chǎn)品：免疫學(xué),細(xì)胞學(xué),分子生物學(xué),微生物學(xué),即用型試劑,常規(guī)生化試 ...

化工儀器網(wǎng)設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 Copyright(C) http://www.acromondplus.com All rights reserved

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

點(diǎn)擊刷新驗(yàn)證碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X

信息收藏成功！

該信息已收藏！

查看我的收藏夾設(shè)置標(biāo)簽

標(biāo)簽：: 保存成功
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用：

提示

X

您的留言已提交成功！我們將在第一時間回復(fù)您~

產(chǎn)品對比 二維碼 返回頂部

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

對比框

主站蜘蛛池模板：平塘县| 玉山县| 双柏县| 乐东| 鄯善县| 荔波县| 河曲县| 将乐县| 瑞昌市| 普洱| 红安县| 澄城县| 莱西市| 维西| 东至县| 长海县| 永吉县| 沛县| 都昌县| 丹凤县| 渝中区| 奉贤区| 南投县| 沁阳市| 浑源县| 金门县| 丹棱县| 藁城市| 上栗县| 德清县| 正阳县| 原阳县| 全南县| 扎鲁特旗| 财经| 宣威市| 高平市| 湖南省| 康马县| 丘北县| 彭水|