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[干冰]K63連接特異性UbiTest-瓊脂糖管洗脫試劑盒,清楚表明蛋白泛素化

時間:2025/5/29閱讀:92
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UbiTest試劑盒用于確定目標蛋白是否被多泛素化。這一強大的平臺改進了研究蛋白質泛素化常用的方法:免疫沉淀和Western blot分析。然而,在免疫印跡步驟中,底物抗體常常與底物的多泛素化形式相互作用不同。這是由于表位遮蔽、親和力降低或選擇性變化所導致的。一種更明確的證明蛋白質泛素化的方法是,在免疫印跡分析之前,將免疫沉淀與廣譜去泛素化酶(DUB)消化相結合。經過DUB處理后,目標蛋白(POI)的信號增加,這清楚地表明該蛋白已被泛素化,即使在未處理的樣本中沒有明顯的反應性也是如此。為了避免由于POI免疫反應性變化而可能產生的問題,UbiTest檢測利用TUBEs來下拉多泛素化蛋白。TUBEs(串聯泛素結合實體)是經過工程改造的串聯泛素結合結構域,其對四泛素的解離常數在納摩爾范圍內。TUBE1已被證明能夠結合所有8種連接類型。

 

確定目標蛋白上多泛素化的連接類型是具有挑戰性的。傳統方法要么通過質譜(MS),要么使用連接特異性抗體進行Western blotLifeSensors開發了一種更明確的方法,通過在免疫印跡分析之前使用連接特異性DUB來證明蛋白質的多泛素化連接類型。經過K63特異性DUB處理后,未修飾POI對應的條帶信號增加,清楚地表明該蛋白被K63多泛素化。

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艾美捷[干冰]K63連接特異性UbiTest-瓊脂糖管洗脫試劑盒

貨號:UM-0413-6300

分類:試管:泛素親和力矩陣,UbiTest

標簽:試劑盒和平板,試管:泛素親和基質

組成:

除了泛選擇性UbiTest瓊脂糖洗脫試劑盒的組分外,該試劑盒還包含:  

K63連接特異性DUB35 ug10 uM  

 

應用:

從細胞和組織提取物中方便地一步下拉多泛素化蛋白  

分離多泛素化蛋白用于蛋白質組學研究  

確認目標蛋白的多泛素化及其連接類型  

真正證明多泛素化——無需質譜  

方便比較處理樣本之間的多泛素化水平  

方便對多個POI進行篩選  

無需底物純化


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