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單細胞培養促進了生物工程領域的發展
閱讀：725 發布時間：2019-4-28
單細胞培養分為懸浮培養和貼壁培養，由于細胞的增殖有可能形成大小不等的細胞團塊或連接成片。如果兩個或多個細胞粘連在一塊或細胞碎片過多都將影響結果，進而導致實驗失敗。所以，制備合格的培養細胞單細胞懸液十分重要。
細胞間實現信號傳遞交流：采用三明治方式將 PET/PC 膜嵌在兩板之間，除了細胞本身，培養基中其他成分都可以自由通過PET/PC膜，達到細胞間信號傳遞交流的目的。單細胞培養配合10cm培養皿使用，適用于任何不同類型細胞間的共培養，培養皿底部的飼養層細胞可以為單細胞提供細胞生長因子，促進其生長增殖。
首先，單細胞的克隆不一定會形成組織，組織是指具有相同的形態，功能的細胞。一般在科技實驗中，單細胞的克隆都是制成懸浮液。就是利用一定的培養液，培養。一段時間要使用胰蛋白酶處理，使細胞分離開。因為細胞一定要附著在物體上才分裂（癌細胞除外，所以會轉移），但大量的細胞附著，相互接觸就會出現接觸抑制，就是細胞相互接觸就不分裂了。所以需要用胰蛋白酶處理，形成懸浮液，用于實驗研究。
單細胞培養采用一個微量吸管，可輕松從培養中高、全自動分選單個細胞，軟件自動掃描載物臺上感興趣的區域，并自動檢測熒光的細胞，幾秒鐘內該系統就可以看到培養中標明所檢測到細胞的地圖，軟件計算出訪問所有檢測到的細胞路徑并使用微量吸管把它們分揀出來。被檢測到的細胞從培養皿中通過玻璃微量吸管被自動拾取分揀出來，您也可以手動檢測細胞，手動或自動事后對其進行分選。
我們證實了顯微鏡觀測到的無論熒光標記還是未標記的活細胞，在培養皿中都可以可通過計算機系統可視化地被自動識別并拾取由一個計算機控制的微量吸移管固定到所述物鏡。細胞從培養皿中以每秒1細胞的速度可連續分選分揀1000個，這種方法可以作為流式細胞分選降低到單個細胞具有非常高的選擇性，并開啟了通過計算機可視化進行在單細胞水平自動操縱單細胞方式。
單細胞培養的高分辨率，即兩個細胞其中一個可以被選擇性地除去之間的小距離是50-70微米，正如我們在特定實驗中使用的微量吸吮管。該設備將能夠自動、輕松、高地收集分揀到的單細胞用于進一步培養，克隆，RNA或蛋白質制備以及免疫組化制備后的分選固定細胞。
傳統的熒光活化細胞分選方法采用流式細胞術用來分選細胞，是分子基礎分選中普遍使用的方法。這種方法只能檢測具有熒光活性的細胞，不但細胞存活率低、純度低，而且極易破壞細胞組織。單細胞培養可以靈活的與各種類倒置顯微鏡配合，安裝操作也非常簡單。如果用戶已經擁有自己的顯微鏡系統，只需購買標準配件就可以將現有的系統升級為一套多功能的細胞分選平臺。