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  • 真核細胞培養時支原體污染表現以及解決方式

    支原體是一種特殊的微生物,在哺乳動物(包括人類)、爬行動物、昆蟲和植物中廣泛分布。它是小、較為簡單的可自我復制的原核生物,大小僅為0.2-0.8um。支原體的基因組僅為0.58-2.20Mb,其自身生物合成能力有限,因此大部分營養物質都要依賴于宿主。在真核細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞培養的同學就開始犯愁了,細胞培養的老手都知道,支原體污染非常不
  • 化學感受態細胞的規范操作方法

    化學感受態細胞是常規克隆和亞克隆實驗應用較為合適的解決方案。經氯化鈣處理,促進質粒DNA黏附于感受態細胞膜上。將感受態細胞通過水浴熱激,使細胞膜孔打開,從而質粒可以進入。操作方法:(以下操作均按無菌條件的標準進行)1、取感受態細胞置于冰浴中,如需分裝可將剛融化細胞懸液分裝到無菌預冷的離心管中,置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl,可以根據實際情況分裝使用。應注意所用DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。以下實驗以100μl感受態細胞為例。2、向感受態細胞懸液中加入
  • 不管是從應用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區別

    多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體后,所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。多克隆抗體與單克隆抗體的應用比較(1)多克隆抗體的應用一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗
  • M15化學感受態細胞操作方法看似簡單,細節很重要

    M15化學感受態細胞是采用大腸桿菌M15菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的化學轉化。它能表達lac阻遏蛋白,抑制T5強啟動子的表達。同時,pREP4還賦予宿主菌株卡那霉素抗性。pREP4是從pACYC改造而來的,含有p15A復制子。它能夠與所有帶ColE1復制起點的質粒共存。主要特點使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達108,-80℃保存幾個月轉化效率不發生改變。recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或對宿主菌染色DNA的重組,提高純化質粒的產量和質量。M15化學感受態
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    重組人白介素-11是由造血微環境基質細胞和部分間葉細胞產生的多效性細胞因子。IL-11通過與細胞表面特異性受體-配體結合鏈IL-11Rα結合,并連接到信號傳導鏈可溶性糖蛋白130(gp130)后發揮其生物學作用,可以直接作用于骨髓巨核系祖細胞、巨噬細胞、T細胞、上皮細胞和肝細胞,具有促進巨核細胞和血小板生成、調控免疫、抗炎和保護黏膜上皮等多種功能。IL-11的促造血功能主要表現在直接刺激造血干細胞和巨核系祖細胞的增殖,誘導巨核細胞分化成熟,促進高倍性巨核細胞生成,增加單個巨核細胞血小板的產量,從
  • 重組人堿性成纖維細胞生長因子(重組人bFGF)簡介

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  • 重組人干擾素α2b具有廣譜抗病毒作用

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