【包裝規格】

貨號：WLRE8208KIT

規格：48 份/盒

【原理概述】

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術：在常溫恒溫下，特殊修飾的反轉錄酶利用特異性引物 DNA 和模板 RNA 合成cDNA 鏈，反應體系中的重組酶、單鏈 DNA結合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA鏈為模板進行快速核酸擴增反應。本試劑盒在 42 oC 下，依賴核酸外切酶的作用，加入根據模板設計的特異的分子探針，使用熒光監測設備能實現對目標片段擴增過程的實時監控。適用于實驗室級別的 RNA 擴增以及其他檢測用途的 RNA 擴增使用。

【產品特點】

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時間短（僅需 20 min）等優點，反應組分為干粉狀態，操作簡便，易于保存。

可適用于各種品牌的熒光定量 PCR 儀，恒溫熒光擴增儀器等熒光檢測設備。

【引物設計】

建議使用長度在 30-35 bp 的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；引物設計避免形成二級結構而影響擴增；擴增子長度建議在 150-500 bp。

【熒光探針設計】

探針序列不與特異性引物識別位點重疊，長度為 46-52 nt，序列避免回文序列、內部二級結構和連續的重復堿基。探針共有四個修飾位點：距離 5’端的≈35 nt 的中部位置標記一個 dSpacer（四氫呋喃，THF），作為核酸外切酶的識別位點；THF 位點的上游標記一個熒光基團，下游標記一個粹滅基團，兩個基團的間距為2-4 nt；THF 距離3’末端≥15 nt，并且 3’末端標記一個修飾基團，例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer。

【試劑盒組成】

注：考慮到核酸降解問題，RNA 系列產品不提供正對照模板和引物探針。

【試劑盒儲存】

1．運輸溫度：≤20oC的恒溫環境；

2．儲存條件：儲存溫度≤-20°C（±5°C）恒溫環境，避光保存，避免重壓、反復凍融；

3．產品有效期：14個月；

4．生產日期見外包裝。

【注意事項】

1. 由于試劑盒靈敏度非常高，在進行反應時請注意避免核酸污染，并設置空白對照；

2．使用時請取出實驗所需的 MIRA 反應單元的數量，剩余部分請置于存儲條件下。

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