DNA 恒溫快速擴增試劑盒（熒光型）

產品參數：

原理概述：

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術：在常溫恒溫下，重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復合體 Rec/ssDNA，在輔助蛋白和單鏈結合蛋白 SSB 的幫助下，侵入雙鏈 DNA 模板；在侵入位點形成 D-loop區域，并開始對 DNA 雙鏈進行掃描；待找到與引物互補的目的區域后，復合體Rec/ssDNA 解體的同時，聚合酶也結合到引物的 3’末端，開始鏈的延伸。本試劑盒在39 oC 下，依賴核酸外切酶的作用，加入根據模板設計的特異的分子探針，使用熒光監測設備能實現對目標片段擴增過程的實時監控。

引物設計 ：

建議使用長度在 30-35 bp 的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；引物設計避免形成二級結構而影響擴增；擴增子長度建議在 150-300 bp，通常不超過 500 bp。

熒光探針設計：

探針序列不與特異性引物識別位點重疊，長度為 46-52 nt，序列避免回文序列、內部二級結構和連續的重復堿基。探針共有四個修飾位點：距離 5’端的≥ 35 nt 的中部位置標記一個 dSpacer（四氫呋喃，THF），作為核酸外切酶的識別位點；THF 位點的上游標記一個熒光基團，下游標記一個粹滅基團，兩個基團的間距為2-4 nt；THF 距離3’末端≥15 nt，并且 3’末端標記一個修飾基團，例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer。

正對照熒光結果圖： P：正對照；N：陰性對照

產品特點及優勢：

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時間短（僅需 20 min）等優點，反應組分為干粉狀態，操作簡便，易于保存。可適用于各種品牌的熒光定量 PCR 儀、恒溫熒光擴增儀器等熒光檢測設備。

產品用途：

適用于實驗室級別的DNA擴增以及其他檢測用途的DNA擴增使用。

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