UHPLC是一種專門的液相色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 µm)的較小色譜柱來實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學(xué)物質(zhì)。
盡管 UHPLC 的性能明顯更好，但它并不總是*。在您考慮改用 UHPLC 時(shí)，恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。
為什么選擇 UHPLC？
盡管 UHPLC 和 HPLC 在各種情況下都有優(yōu)勢(shì)，但有時(shí) UHPLC 顯然是*。特別是，UHPLC 提供了更好的分離度，因?yàn)樗鼈兊闹宇w粒更小。但研究人員并不總是需要這種能力。恒譜生建議您需要考慮哪種分離將在可管理的時(shí)間內(nèi)提供最佳效率。如果您在五分鐘內(nèi)分離兩種組分并且每天只進(jìn)行幾次分析，則不太可能需要 UHPLC，因?yàn)?HPLC 的分離度既足夠又相對(duì)快速。
即使您不需要更高的分離能力，UHPLC 仍然可以提高您的通量。更高的色譜分離度可用于提高復(fù)雜樣品的分離能力，或通過使用更短的分析色譜柱并保持分離度來提高分析速度，因此無論是高通量應(yīng)用還是高分辨率分析，都將從 UHPLC 中獲益最多。
選擇 UHPLC 的注意事項(xiàng)
UHPLC 在色譜柱內(nèi)使用較小的顆粒，恒譜生1.8粒徑的超純硅膠色譜填料能夠讓您的色譜分析效果與速度大大提升。粒徑和形狀緊密分布，減少背壓，批次穩(wěn)定性一致，可重復(fù)利用。因?yàn)槭褂帽容^小的粒徑所以需要更大的力來驅(qū)動(dòng)溶劑和樣品通過色譜柱。
UHPLC 需要能夠在比 HPLC 中使用的泵更高的壓力下工作的泵。另一方面，雖然 UHPLC 系統(tǒng)的初始成本通常高于其對(duì)應(yīng)的 HPLC 系統(tǒng)，但總體擁有成本實(shí)際上可能更低。與 HPLC 系統(tǒng)相比，UHPLC 系統(tǒng)可以用更少的試劑產(chǎn)生更快的結(jié)果，并且增加的通量可以提高生產(chǎn)力。在這種情況下，UHPLC 系統(tǒng)較高的初始成本實(shí)際上可能會(huì)在幾年內(nèi)節(jié)省實(shí)驗(yàn)室資金。
盡管存在差異，但新型柱填料開始模糊 HPLC 和 UHPLC 之間的界限。例如，對(duì)于 HPLC 和 UHPLC，新的“核殼”或“多孔”顆粒提供比傳統(tǒng)柱顆粒更好的性能。核殼顆粒具有更大的表面積，這意味著它們?cè)谳^低的工作壓力下優(yōu)于傳統(tǒng)的顆粒表親。對(duì)于 HPLC 和 UHPLC，平衡設(shè)備成本和性能變得更加靈活。無論您需要簡(jiǎn)單的高通量分離還是更高的分離能力，UHPLC 都在不斷發(fā)展以滿足比以往更多類型的需求。
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