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小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒

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更新時間:2023-07-28 11:39:13瀏覽次數(shù):329

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1 kit
貨號 CS-20001-100 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)小鼠造血前體細胞向成熟樹突狀細胞(DC)亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在10天內(nèi)同時誘導(dǎo)不同DC亞群產(chǎn)生,主要包括傳統(tǒng)型cDC2(CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-)和漿細胞樣pDC(CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+)。

詳細介紹

產(chǎn)品介紹

小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)小鼠造血前體細胞向成熟樹突狀細胞(DC)亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在10天內(nèi)同時誘導(dǎo)不同DC亞群產(chǎn)生,主要包括傳統(tǒng)型cDC2(CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-)和漿細胞樣pDC(CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+),是研究不同亞群DC分化發(fā)育和功能、以及產(chǎn)生小鼠DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。


產(chǎn)品特點

針對培養(yǎng)小鼠成熟樹突狀細胞而設(shè)計


產(chǎn)品成分

產(chǎn)品名稱

Cat log #

規(guī)格

儲存條件

小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞培養(yǎng)試劑盒

CS-20001-100

1 kit

小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

CS-20001-B

100ml4℃

小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞補充因子

CS-20001-S

1ml

-20℃

預(yù)篩選樹突狀細胞專用胎牛血清

CS-DCF-10

10ml

-20℃


*培養(yǎng)基配制

(在無菌生物安全柜中,開展以下操作)

1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清,混勻后使用。

注:解凍后的補充因子和血清可放置于4℃冰箱,在1個月內(nèi)使用;或者分裝至合適體積后,保存于-20℃冰箱,不可反復(fù)凍融!

2.將1體積的補充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞*培養(yǎng)基。如取100ul補充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以此類推。

注:配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存,且于1個月內(nèi)使用完畢。


使用說明

(請詳細閱讀使用說明后再開始相關(guān)實驗)

1.使用淋巴細胞分離液從小鼠骨髓總細胞中分離得到骨髓單個核細胞(BM-MNC),計數(shù)。

2.D0:使用*培養(yǎng)基重懸BM-MNC,調(diào)整細胞密度至1.5*10^6/ml,按照如下表格所示將細胞鋪于培養(yǎng)板:

培養(yǎng)板

*培養(yǎng)基體積

BM-MNC細胞數(shù)/孔

24孔板

1ml

1.5*10^6

6孔板

4ml

6*10^6

3.將培養(yǎng)板置于細胞培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2,靜置培養(yǎng)。

4.D3:半量換液。小心從原來的培養(yǎng)板孔中取出一半原有培養(yǎng)基,加入等量新鮮*培養(yǎng)基。

注:*培養(yǎng)基請恢復(fù)至室溫后使用,減少對細胞的刺激;
考慮到培養(yǎng)過程中的液體揮發(fā),加入新鮮*培養(yǎng)基時,可考慮多加10%體積*培養(yǎng)基。

5.D6:半量換液。同第4步。

6.D10:輕輕吹打細胞,收集懸浮細胞,即為分化成熟的小鼠穩(wěn)態(tài)DC,可進行后續(xù)操作和分析。

注:如需研究特定刺激對DC的影響,可提前加入相應(yīng)刺激,待D10收集細胞進行分析。


數(shù)據(jù)展示


圖:小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細胞亞群分布。取4-6周齡雄性C57BL/6小鼠BM-MNC按照上述說明培養(yǎng)至第10天,收集懸浮細胞檢測DC產(chǎn)生和亞群分布。



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