您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CS-20004-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品介紹
人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)試劑盒是為在體外活化和擴(kuò)增人T細(xì)胞而專門(mén)設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T細(xì)胞，并且達(dá)到高效擴(kuò)增的目的，是研究人T細(xì)胞分化和功能的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
針對(duì)人T細(xì)胞的活化和擴(kuò)增而設(shè)計(jì)
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Cat log # | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)試劑盒 | CS-20004-50 | 1 kit | |
人T細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | CS-20004-B | 50ml | 4℃ |
人T細(xì)胞活化補(bǔ)充因子 | CS-20004-ATS | 0.35ml | 4℃ |
人T細(xì)胞擴(kuò)增補(bǔ)充因子 | CS-20004-EXS | 0.4ml | -20℃ |
預(yù)篩選T細(xì)胞專用胎牛血清 | CS-TF-5 | 5ml | -20℃ |
其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分
人T細(xì)胞磁珠分選試劑
*培養(yǎng)基配制
(在無(wú)菌生物安全柜中，開(kāi)展以下操作)
1.在4℃冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清，混勻后使用。
注：解凍后的補(bǔ)充因子和血清可放置于4℃冰箱，在1個(gè)月內(nèi)使用；或者分裝至合適體積后，保存于-20℃冰箱，不可反復(fù)凍融！2.活化培養(yǎng)基配制：將1體積的活化補(bǔ)充因子和4體積的胎牛血清加入到35體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻，得到人T細(xì)胞活化培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推。
擴(kuò)增培養(yǎng)基配制：將1體積的成熟補(bǔ)充因子和10體積的胎牛血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻，得到人T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推。
注：配好的*培養(yǎng)基請(qǐng)于4℃保存，且于1個(gè)月內(nèi)使用完畢。使用說(shuō)明
(請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說(shuō)明后再開(kāi)始相關(guān)實(shí)驗(yàn))
1.使用磁珠分選人外周血單個(gè)核細(xì)胞中T細(xì)胞（參考所使用試劑盒的說(shuō)明書(shū)），計(jì)數(shù)。
注：健康供體每1ml外周血中約含有5-10*10^5 T細(xì)胞。2.D0：使用活化培養(yǎng)基重懸T細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml，按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | T細(xì)胞數(shù)/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 0.2*10^6 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱，37℃，5%CO2，靜置培養(yǎng)。
4.D2：補(bǔ)充1/4初始培養(yǎng)體積的新鮮活化培養(yǎng)基（參考步驟2表格）。
注：*培養(yǎng)基請(qǐng)恢復(fù)至室溫后使用，減少對(duì)細(xì)胞的刺激。5.D3：擴(kuò)孔。
1)收集細(xì)胞，離心去除活化培養(yǎng)基，使用擴(kuò)增培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù)；
2)調(diào)整細(xì)胞密度至5*10^5/ml，按照如下表格將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板，繼續(xù)擴(kuò)增培養(yǎng)T細(xì)胞：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | T細(xì)胞數(shù)/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 1*10^5 |
24孔板 | 1.0ml | 5*10^5 |
6.D5/D7：細(xì)胞計(jì)數(shù)，按照步驟5所示進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增，或收集細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作和分析。
數(shù)據(jù)展示
圖：人T細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)鑒定。分選的人CD4+T細(xì)胞按照試劑盒說(shuō)明活化后第三天，顯微鏡下觀察克隆形成（A）；分選的人CD4+T和CD8+T細(xì)胞按照試劑盒說(shuō)明培養(yǎng)至圖示天數(shù)，收集細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算擴(kuò)增倍數(shù)（B）
