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食品中11種合成著色劑的測定 參考GB 5009.35-2023

閱讀:1263        發布時間:2024-4-28

  合成著色劑是指人工化學合成方法所制成的有機色素,因其色彩鮮艷、著色力強、穩定性好、生產成本低等特點廣泛應用于食品工業。我國對食品中添加合成著色劑有著嚴格的限制,《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》(GB 2760—2024)中允許使用的合成著色劑有11種,分別為檸檬黃、日落黃、喹啉黃、新紅、莧菜紅、胭脂紅、you惑紅、赤蘚紅、酸性紅、亮藍和靛藍,并對其允許使用的食品類別和最大使用量做了明確規定。


  一、色譜柱篩選

  按照食品安全國家標準《食品中合成著色劑的測定 GB 5009.35-2023》項下分析方法,分別使用4支不同極性C18色譜柱,包括中等級性CAPCELL PAK C18 MGII、中等級性CAPCELL PAK C18 KG、高極性CAPCELL PAK C18 AQ、高疏水性SUPERIOREX II ODS色譜柱,以及鍵合金剛烷基團的CAPCELL PAK ADME-HR色譜柱,分別對用戶提供的11種合成著色劑混合標準品溶液進行分析。

  如圖1所示,在415nm檢測波長下,5支色譜柱分析結果中只有ADME-HR色譜柱可得到混合標準品中峰1、峰2的良好分析結果,但在610 nm波長下,峰11、峰12未得到基線分離;

  從C18 MGII、ODS II和C18 KG色譜柱的分析結果中,可以看到混合標準品中峰1和峰2有分離趨勢,但未達到基線分離,同時在520 nm、610 nm波長下各峰間均可達到基線分離。

20240428110614.png

圖1  色譜柱篩選-GB原方法

  【色譜條件】

  色譜柱:CP C18 MGII S5; 4.6×250

                CP C18 AQ S5; 4.6×250

                CP C18 KG S5; 4.6×250

                CP ADME HR S5; 4.6×250

                SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250

  流動相:A,0.02 mol/L 乙酸銨   B,甲醇

  B(%) 10%(0 min) - 40%(12 min) - 50%(19 min) - 55%(22.5 min) - 95%(24 min) - 95%(33 min) - 10%(34 min) - 10%(42 min)

  流動速:1.0 mL/min

  柱動溫:30 ℃

  檢動測:PDA 415 nm;520 nm;610 nm

  樣動品:用戶提供

  進樣量:10 μL


  二、梯度微調

  為改善混合標準品中峰1、峰2以及峰11、峰12的分離,嘗試對流動相梯度進行微調,分別降低0-12 min、22.5-24 min梯度斜率,使用CAPCELL PAK C18 MGII、SUPERIOREX II ODS、CAPCELL PAK C18 KG、CAPCELL PAK ADME-HR色譜柱,分別對客戶提供11種合成著色劑標準品進行分析。

  其中C18 MGII、ODS II色譜柱可得到混合標準品的良好分析結果,結果如圖2、3、表1、2(415 nm分離度)所示,各雜質間分離度均大于1.5,滿足基線分離,但兩支色譜柱分析結果中峰10、11、12出峰位置與參考圖譜中位置反轉。

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  圖2 C18 MGII色譜柱分析圖-梯度微調

  表1 積分表 C18 MGII 梯度微調

20240428110638.png

20240428110645.png

  圖3 ODSII色譜柱分析圖-梯度微調

  表2 積分表 ODS II 梯度微調

20240428110655.png

  【色譜條件】

  色譜柱:CP C18 MGII S5; 4.6×250

                SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250

  流動相:A,0.02 mol/L 乙酸銨   B,甲醇

  B(%) 5%(0 min) - 25%(12 min) - 50%(19 min) - 55%(22.5 min) - 80%(24 min) - 95%(33 min) - 10%(34 min) - 10%(42 min)

  流動速:1.0 mL/min

  柱動溫:30 ℃

  檢動測:PDA 415 nm;520 nm;610 nm

  樣動品:用戶提供

  進樣量:10 μL


  結  論

  綜上所述,按照食品安全國家標準《食品中合成著色劑的測定 GB 5009.35-2023》項下分析方法,原方法下未能得到所有峰的分離,嘗試對流動相梯度進行微調,使用CAPCELL PAK C18 MGII、SUPERIOREXII ODS色譜柱,均可得到混合標準品的良好分析結果,各雜質間分離度均大于1.5,滿足基線分離。但兩支色譜柱分析結果中峰10、11、12出峰位置與參考圖譜中位置反轉(用戶未提供對照品單標,峰指認通過與標準譜圖對照獲得)。


  《食品中合成著色劑的測定 GB 5009.35-2023》分析方法推薦用柱

  F92533

  CP C18 MGII S5; 4.6×250

  F41504

  SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250


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