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產品簡介：

分離純化環狀 DNA（質粒 DNA、線粒體 DNA、葉綠體 DNA 和某些病毒DNA）的時候經常需要去除其中的線狀 DNA 污染，而保留共價閉合環狀 DNA 和帶 nick 切口和 gap 缺口的環狀 DNA。本公產品就是為滿足此需求而開發。

產品特點：

1.即開即用，不需用戶花費大量時間去摸索各種條件。

2.酶法去除線性 DNA，專一性強，可以使線狀 DNA 污染降級幾個數量級，不會干擾后續試驗。

3.不降解有 nick 和 gap 的環狀 DNA，包括質粒 DNA、線粒體 DNA、葉綠體 DNA、環狀病毒 DNA。

4.處理不依賴于 DNA 序列，可降解任何線狀 DNA。而內切酶去除線狀 DNA 則需要預先確知其在環狀 DNA 上沒有酶切位點。

5.得到的環狀 DNA 可用于多種后續試驗，尤其是 WGA、PCR 和測序等對污染敏感的試驗。

6.本產品足夠 30 ?L 體系使用 50 次。

7.線狀DNA清除劑（酶法）只能用于科研。

產品參數：

規格及成分

保存和運輸

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

超純水，75%乙醇

使用方法：

1.在干凈塑料離心管中，按下表加入各成分（30 UL 體系）：

成份樣品陽性對照陰性對照

DNA（1-2 ?g）自備樣品 DNA自備環狀 DNA自備線狀 DNA

線狀DNA 清除劑溶液A3 ?L3 ?L3 ?L

線狀DNA 清除劑溶液B1 ?L1 ?L1 ?L

自備超純水補到 30 ?L補到 30 ?L補到 30 ?L

2.在 PCR 儀器上 37℃保溫 16 小時。如果使用水浴或者金屬浴，則需要在管中加入 200 ?L 自備石蠟油以防止水分蒸發。注意：保溫時間過短可能會形成短的 DNA 片段，影響后續反應，所以最好保溫 16 小時。。

3.65℃加熱 10 分鐘滅活相關酶。

4.反應液可以直接用于后續的測序和 PCR 檢測。如果需要純化，則將 30 UL 酶反應溶液轉移到一個新的 1.5 mL 離心管中，再加入 60 UL 微量核酸沉淀劑。如果沒有使用石蠟油，則直接在 30 UL 酶反應溶液中加入 60 UL 微量核酸沉淀劑。注意：微量核酸沉淀劑有沉淀，取用前需要充分搖勻。

5.室溫 15000 g 離心 10 分鐘。

6.棄上清后加自備的 75%乙醇 1 mL，振蕩混勻。

7.15000 g 離心 3 分鐘，棄上清。

8.再短暫離心后小心吸棄上清，沉淀即為回收的去除掉線狀 DNA 之后的 DNA 沉淀（含共價閉合環狀 DNA 和帶 nick 和 gap 的環狀 DNA），可溶于自備超純水中后直接使用或放-20℃冰箱長期保存。

選擇我們的線狀DNA清除劑（酶法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！