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抗體使用常見問題解答2010/01/19

使用抗體常見問題解答1、如何選擇合適的一抗？請先確定您要檢測的種屬和使用的實驗方法，然后查找相關產品，根據說明書上描述的“適用種屬和實驗方法”來確定合適的抗體。如果說明書中有明確您要檢測的種屬和實驗方法均經過檢測，則您可以放心地購買該產品。2、如何選擇合適的二抗?二抗的選擇原則：針對一抗來源的二抗（比如一抗是小鼠來源的，二抗就要是抗小鼠的）針對一抗Ig亞型的（比如一抗是IgM，二抗就要是抗IgM的抗體）為了增加特異性、降低背景：可以選擇Fab段的抗體（去除Fc段的）、經過標本來源種屬血清吸附的的

植物RNA提取方法2009/12/31

植物RNA提取方法1.取適量丹參材料于液氮中充分研磨，然后迅速轉入1.5ml離心管中，立即加入異硫氰酸胍提取緩沖液600μl和60μl2MNaAc混勻。2.向管中加入600μl酚∶氯仿∶異戊醇（25∶24∶1），渦旋混勻10s，冰上靜置5min，4℃，12000g離心15min。3.取上清于另一離心管中，加入等體積600μl異丙醇，混勻，-20℃沉淀20min。4.4℃，12000g離心10min，棄上清。5.用75%乙醇洗滌RNA沉淀2次。6.室溫下晾干沉淀，用40μlDepcH2O溶解RNA

區分紫外可見分光光度計與可見分光光度計2009/12/23

紫外可見分光光度計與可見分光光度計的區別是測定波長范圍不同，紫外一般用氫燈，測定波長范圍180～350nm,可見一般用鎢燈，測定波長范圍320～1000nm。所謂紫外可見分光光度計也就是說這個儀器可以更換光源，能夠測定吸收峰在紫外和可見光部分的化合物。發現吸光度超過2，便不再顯示，是正常現象。吸光度是透光率的負對數，吸光度超過2就是說透光率小于1％，低于儀器的檢出限，就不再顯示了。至于能不能用分光光度計，取決于你測定的波長。

酶標儀酶免檢測項目2009/12/21

目前國內許多計生站系統開展了酶免檢測項目，如：乙肝五項、愛滋病檢測、優生優育系列檢測、激素檢測等。過去多數采用目測方法，報出的結果缺乏科學的依據。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規定為：陰性對照品的OD值×2.5，通過目測無法判斷標本孔的反應顏色是否超過臨界值。肉眼進行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。國內多家機構，如衛生部臨床檢驗中心和計劃生育系統等多次強調酶標儀的重要性，并要求酶聯免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀，酶免試劑的質控也應使用酶標儀，并

常見的免疫檢測五大技術2009/12/18

（一）免疫酶染色試驗（immunoenzymestainingtest，IEST）免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養物涂片為固相抗原，當其與待測標本中的特異性抗體結合后，可再與酶標記的第二抗體反應形成酶標記免疫復合物，后者可與酶的相應底物作用而出現肉眼或光鏡下可見的呈色反應。（二）皮內試驗（intraderrpmaltest,ID）宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體（IgE和IgG4）。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部

酸度計使用與保養電極2009/12/16

目前實驗室使用的電極都是復合電極，其優點是使用方便，不受氧化性或還原性物質的影響，且平衡速度較快。使用時，將電極加液口上所套的橡膠套和下端的橡皮套全取下，以保持電極內氯化鉀溶液的液壓差。下面就把電極的使用與維護簡單作一介紹：⒈復合電極不用時，可充分浸泡3M氯化鉀溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑浸洗。⒉使用前，檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下，電極應該透明而無裂紋；球泡內要充滿溶液，不能有氣泡存在。⒊測量濃度較大的溶液時，盡量縮短測量時間，用后仔細清洗，防止被測液粘附在電極上而污染電極。⒋清

移液器移液的兩種方法2009/12/11

移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體，稍停片刻繼續按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。zui后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設置量程的液體，轉

酸度計標準緩沖液的配制及其保存2009/12/10

⒈pH標準物質應保存在干燥的地方，如混合磷酸鹽pH標準物質在空氣濕度較大時就會發生潮解,一旦出現潮解,pH標準物質即不可使用。⒉配制pH標準溶液應使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級pH計測量，則可以用普通蒸餾水。⒊配制pH標準溶液應使用較小的燒杯來稀釋，以減少沾在燒杯壁上的pH標準液。存放pH標準物質的塑料袋或其它容器，除了應倒干凈以外，還應用蒸餾水多次沖洗，然后將其倒入配制的pH標準溶液中，以保證配制的pH標準溶液準確無誤。⒋配制好的標準緩沖溶液一般可保存2—3個月，如發現有渾濁

檢測收集標本的成份是否足夠穩定2009/12/07

收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。液體類標本：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。組

轉基因技術的發展2009/12/02

轉基因技術與傳統技術在本質上都是通過獲得優良基因進行遺傳改良。但在基因轉移的范圍和效率上，轉基因技術與傳統育種技術區別于兩點：首先，傳統技術一般只能在生物種內個體間實現基因的轉移，而轉基因技術所轉移的基因則不受生物體間親緣關系的限制；第二，傳統的雜交和選擇技術一般是在生物個體水平上進行，操作對象是整個基因組，所轉移的是大量的基因，不可能準確地定位于某個基因進行操作和選擇，對后代的表型預見性較差。而轉基因技術所操作和轉移的是經過明確定義的基因，功能清楚，可準確預測后代。故轉基因技術是對傳統技術的發

細胞株培養細胞2009/11/27

細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞，也就是說，細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系，由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代，或傳代次數有限，可稱為有限細胞系，如可以連續培養，則稱為連續細胞系，培養50代以上并無限培養下去。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養

區分酸度計與ph計2009/11/26

酸度計，pH計小常識。酸度是指樣品能與堿溶液進行中和反應的能力，PH值是指樣品溶液中氫離子活度的負對數·PH計測量的核心技術在于PH計電極，測量不同類型的樣品需要選擇相適應得PH電極·PH計測量的誤差來源于PH計電極，PH計主機，PH標準緩沖液的誤差·PH計溫度補償后的顯示值是樣品實際溫度下的PH值

實驗動物標本采集方法2009/11/24

實驗動物的體液（標本）采集方法一、血液的采集常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈（動脈）采血、股動脈（靜脈）采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學、后肢小靜脈采血等。二、尿液的采集實驗動物的尿液常用代謝籠采集，也可通過其他裝置來采集。（一）用代謝籠采集尿液代謝籠用于收集實驗動物自然排出的尿液，是一種特別設計的為采集實驗動物各種排泄物的密封式飼養籠，有的代謝籠除可收集尿液外，又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內飼養的實驗動物

移液器的移液方法2009/11/20

移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體，稍停片刻繼續按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。zui后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設置量程的液體，轉

酶標儀工作原理及結構2009/11/19

酶標儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同.是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號.電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,zui后由顯示器和打印機顯示結果.微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方

Roche A（H1N1） RT-PCR檢測方案推薦2009/11/17

RocheA（H1N1）RT-PCR檢測方案推薦病毒核酸純化手動純化產品HighPureViralRNAKit配備去抑制緩沖液，有效去除抑制成分，后續實驗更有保證。操作時間更短，20min完成，節約1/3時間。病毒RNA得率更高。HighPureViralRNAKit11858882001100次自動化純化設備MagNAPureLC2.0/MagNAPureCompact全自動分離純化DNA、RNA和總核酸（PCR級純度）。適用樣本包括：全血、白細胞、外周血、單核細胞、培養細胞、動植物組織、石蠟

ph計配套使用的電極介紹2009/11/17

酸度計（PH計）上配套使用的電極大多數采用的是復合電極，老一代酸度計尚在使用玻璃電極與甘汞電極。由于復合電極使用比較廣泛，以下主要討論復合電極。目前實驗室使用的復合電極主要有全封閉型和非封閉型兩種，全封閉型比較少，主要是以國外企業生產為主。復合電極使用前首先檢查玻璃球泡是否有裂痕、破碎，如果沒有，用pH緩沖溶液進行兩點標定時，定位與斜率按鈕均可調節到對應的pH值時，一般認為可以使用，否則可按使用說明書進行電極活化處理。活化方法是在4%氟化氫溶液中浸3～5s左右，取出用蒸餾水進行沖洗，然后在0.1

ELISA中三個必要的試劑2009/11/16

在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標記的抗原或抗體（結合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；（5）結合物及標本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應終止液。

分析影響ELISA中非特異性顯色的原因2009/11/13

影響ELISA中非特異性顯色的原因很多，如試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物，操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度，從而提高檢測的特異性，并得到更準確、可靠的實驗結果。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別，各

酸度計的適用領域2009/11/11

酸度計是一種常用的儀器設備,主要用來精密測量液體介質的酸堿度值,配上相應的離子選擇電極也可以測量離子電極電位MV值，廣泛應用于工業,農業,科研,環保等領域.酸度計是測定溶液pH值的儀器。酸度計的主體是精密的電位計。測定時把復合電極插在被測溶液中，由于被測溶液的酸度（氫離子濃度）不同而產生不同的電動勢，將它通過直流放大器放大，zui后由讀數指示器（電壓表）指出被測溶液的pH值。酸度計能在0～14pH值范圍內使用。酸度計有臺式、便攜式、表型式等多種，讀數指示器有數字式和指針式兩種（目前找不到指針式的