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2011
06-02

質(zhì)粒DNA連接與轉(zhuǎn)化方法詳述
DNA連接酶催化兩雙鏈DNA片段相鄰的5’-磷酸和3’-羥基間形成磷酸二酯鍵。在分子克隆中有用的DNA連接酶是來自Ｔ４噬菌體的DNA連接酶：T4DNA連接酶。T4DNA連接酶在分子克隆中主要用于：1、連接具有同源互補粘性末端的ＤＮＡ片段；2、連接雙鏈DNA分子間的平端；3、在雙鏈平端的DNA分子上添加合成的人工接頭或適配子。目的DNA片段與載體DNA片段之間的連接方式（以T4DNA連接酶為例）主要有以下幾種：（一）、具互補粘性末端片段之間的連接大多數(shù)的核酸內(nèi)切限制酶都能夠根據(jù)識別位點切割DNA分
2011
06-01

牛冠狀病毒抗體ELISA KIT樣本處理方法
牛冠狀病毒抗體ELISAKIT組成：30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶酶標(biāo)試劑6ml×1瓶酶標(biāo)包被板12孔×8條樣品稀釋液6ml×1瓶顯色劑A液6ml×1瓶顯色劑B液6ml×1/瓶終止液6ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品（240pg/ml）0.5ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶說明書1份封板膜2張密封袋1個本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中牛冠狀病毒抗體水平。用純化的牛冠狀病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被單抗的微孔中依次加入冠狀病毒抗體，再與HRP標(biāo)記的冠狀病毒抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物
2011
05-31

雷帕霉素加速ALS模型小鼠的發(fā)病及可能機制
ALS運動神經(jīng)元內(nèi)蛋白質(zhì)異常聚集可能是導(dǎo)致神經(jīng)元選擇性死亡的重要機制。自噬作為胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解的主要途徑，是現(xiàn)在蛋白質(zhì)聚集類疾病的研究熱點之一。自噬可能通過降解胞內(nèi)聚集的蛋白質(zhì)起到神經(jīng)保護作用；但同時過度激活或者自噬途徑的不完整可能加速神經(jīng)元的死亡。而自噬在ALS發(fā)病過程及運動神經(jīng)元選擇性死亡中所發(fā)揮的作用今仍未有相關(guān)報道。科研人員利用經(jīng)典的ALS轉(zhuǎn)基因小鼠SOD1G93A小鼠，發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓前角運動神經(jīng)元內(nèi)特異性自噬小體（AVs）數(shù)目增加，而且神經(jīng)元軸突內(nèi)增加要早于胞內(nèi)，提示運動神經(jīng)元內(nèi)自
2011
05-30

異檸檬酸脫氫酶作用機制研究新發(fā)現(xiàn)
分子細(xì)胞生物學(xué)研究室的研究人員發(fā)現(xiàn)一種異檸檬酸脫氫酶的基因突變產(chǎn)物誘發(fā)白血病和神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用機制。這一突破不僅揭示了人體代謝物的致癌之謎，也為神經(jīng)膠質(zhì)瘤等腫瘤的藥物治療提供了新的方向。此前的研究顯示，一種異檸檬酸脫氫酶的基因變化，會產(chǎn)生一種名叫2HG的代謝物。當(dāng)這種代謝垃圾積累到一定程度，就會引發(fā)代謝問題，促進正常細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。但2HG致癌的作用機制卻是一個謎團，揭開這個謎團對于白血病和神經(jīng)膠質(zhì)瘤的發(fā)生及治療具有重要作用。而新研究中發(fā)現(xiàn)，2HG的累積可以直接抑制生物酶。這種雙加氧酶的活力
2011
05-27

大鼠催乳素ELISA KIT操作程序
大鼠催乳素ELISAKIT性能：1.靈敏度：小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。大鼠催乳素ELISAKIT試劑的準(zhǔn)備：1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：500pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul250pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液125p
2011
05-26

頭孢菌素酰化酶的自剪切分子機制
日前科研人員結(jié)合晶體學(xué)數(shù)據(jù)，運用高分辨質(zhì)譜分析技術(shù)對頭孢菌素酰化酶空間肽的研究，為酶催化的動態(tài)機制提供了重要的實驗證據(jù)。研究證實頭孢菌素酰化酶第二步自剪切是由于分子內(nèi)相互作用，并由N-端親和基團（Ntn）催化完成。這一新催化模型的提出預(yù)示著在剪切過程中，該酶必須經(jīng)歷一個很大的構(gòu)象變化，以克服距離約22?的空間障礙。此外，還揭示了頭孢菌素酰化酶是一個酰化肽酶，并具有一定的外切肽酶活性，深入探討了有關(guān)弱催化機制與分子內(nèi)張力的相互關(guān)系，豐富了酶催化的理論知識。另外他們還運用現(xiàn)代分子生物學(xué)與天然產(chǎn)物化學(xué)
2011
05-25

幽門螺旋桿菌的四大檢測方法解析
幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細(xì)菌。長2.5～4.0μm，寬0.5～1.0μm。革蘭染色陰性。有動力。在胃粘膜上皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長時，除典型的形態(tài)外，有時可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。幽門螺桿菌是微需氧菌，環(huán)境氧要求5～8%，在大氣或厭氧環(huán)境下不能生長。許多固體培養(yǎng)基可作幽門螺桿菌分離培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，布氏瓊脂使用較多，但需加用適量全血或胎牛血清作為補充物方能生長。常以萬古霉素、TMP、兩性霉素B等組成抑菌劑防止雜菌生長。幽門螺旋桿菌感染的檢查方法很
2011
05-24

關(guān)于大豆磷脂的作用機理及相關(guān)信息介紹
大豆磷脂是一種混合磷脂，它是由磷脂酰膽堿（卵磷脂，簡稱PC，高等級為PPC）、磷脂酰乙醇胺（腦磷脂，簡稱PE）、磷脂酰肌醇（肌醇磷脂，簡稱PI）、磷脂酰絲胺酸（絲胺酸磷脂，簡稱PS）等成分組成，其中典型的是前三種。磷脂是人體細(xì)胞的基本成分，并對神經(jīng)、生殖、激素等功有重要關(guān)系，具有很高營養(yǎng)價值和醫(yī)用價值。現(xiàn)代人生活節(jié)奏緊張，磷脂營養(yǎng)大量流失，因此補充完整磷脂對現(xiàn)代人而言是必要。鑒于大豆磷脂類保健品是一種功能性的健康食品，雖然不是立即見效，但有著全面、長遠(yuǎn)、穩(wěn)定的效果，同時又沒有藥物的副作用，醫(yī)學(xué)家
2011
05-23

YPD培養(yǎng)基的配制及相關(guān)說明
YPD或YEPD：YeastExtractPeptoneDextroseMedium（1L），又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基，加入瓊脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）瓊脂培養(yǎng)基.YPD培養(yǎng)基配方：1%YeastExtract（酵母膏），2%Peptone（蛋白胨），2%Dextrose（glucose）（葡萄糖），若制固體培養(yǎng)基，加入2%瓊脂粉。YPD培養(yǎng)基配制方法：1.溶解10gYeastExtract（酵母膏）,20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g瓊脂粉2.高壓12
2011
05-19

狗凝血因子ⅩⅢ Elisa試劑盒操作說明
狗凝血因子ⅩⅢElisa試劑盒保存：；2-8℃。有效期：6個月檢測范圍：4IU/L-120IU/L使用目的：本試劑盒用于測定狗血清、血漿及相關(guān)液體樣本中凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）含量。狗凝血因子ⅩⅢElisa試劑盒標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。狗凝血因子ⅩⅢElisa試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)
2011
05-18

結(jié)核菌素試驗試劑相關(guān)信息簡介
結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分，有兩種，舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT）和純蛋白衍生物（purifiedproteinderivative，PPD）。舊結(jié)素（oldtuberculin，OT）是從生長過結(jié)核菌的液體培養(yǎng)基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物，主要含有結(jié)核蛋白。結(jié)素的純蛋白衍化物（purifiedproteinderivative，PPD）為純結(jié)素，不產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。PPD-PT23是由丹麥制造供應(yīng)世界許多國家使用，已經(jīng)取代OT。結(jié)核菌素試驗是基于Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)（見變態(tài)反應(yīng)）原理
2011
05-17

5-羥甲基胞嘧啶的基因組定位分析新方法
5-羥甲基胞嘧啶是一種修飾的堿基，以低水平存在于哺乳動物的多種細(xì)胞類型中。5hmC是TET家族的酶通過氧化5-甲基胞嘧啶產(chǎn)生的。5hmC和TET蛋白都被認(rèn)為與干細(xì)胞和癌癥相關(guān)，但是關(guān)于5hmC在基因組范圍內(nèi)的分布，目前仍了解得不多。日前研究人員開發(fā)出兩種新穎而特異的方法，來分析5hmC的基因組定位。一種方法稱為GLIB。GLIB是糖基化、高碘酸氧化和生物素化的縮寫。它主要利用一些酶和化學(xué)反應(yīng)的組合來分離出包含單個5hmC的DNA片段。先利用T4噬菌體β-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶在每個5hmC上添加一個葡萄
2011
05-16

斑馬魚睪酮（T） ELISA試劑盒操作說明
使用目的：本試劑盒用于測定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中睪酮（T）含量。斑馬魚睪酮（T）ELISA試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中斑馬魚睪酮（T）水平。用純化的斑馬魚睪酮（T）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入睪酮（T），再與HRP標(biāo)記的睪酮（T）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的睪酮（T）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光
2011
05-13

RD人內(nèi)臟素 ELISA檢測試劑盒操作說明
RD人內(nèi)臟素ELISA檢測試劑盒試劑的準(zhǔn)備：1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：200ng/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul100ng/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入
2011
05-12

解析小干擾RNA的自我調(diào)控機制
研究組在對水稻MAIF1（miRNAsregulatedａndabioticstressinducedF-boxgene）基因的研究中發(fā)現(xiàn)：該基因受植物激素脫落酸（abscisicacid，ABA）和干旱、高鹽等非生物脅迫因素的誘導(dǎo)啟動表達(dá)，同時又受小RNA（siR441和siR446）的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。真核生物非編碼小RNA分子通過介導(dǎo)mRNA降解、抑制蛋白質(zhì)翻譯和染色質(zhì)修飾負(fù)調(diào)控靶標(biāo)基因的表達(dá)。小RNA在植物的生長發(fā)育，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及生物和非生物脅迫反應(yīng)中起重要調(diào)控作用。miR441和miR446
2011
05-11

小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒的試驗原理
公司自研究所改制以來在分子生物學(xué)試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNAmarker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。下面簡單解說小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒的試驗原理及配備。小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制：試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）塑料膜板蓋1塊半塊標(biāo)準(zhǔn)品：240ng/ml1瓶（
2011
05-10

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一種溫度感受蛋白
機體中所有的生物學(xué)過程包括免疫反應(yīng)都會受到溫度的影響，然而一直以來科學(xué)家們對于免疫細(xì)胞中感知溫度變化的分子卻知之甚少。過去的研究證實STIM1蛋白是一種重要的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子感受器，在免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。在新研究中，科學(xué)家證實STIM1還具有溫度感受器的功能。在這一研究中，科學(xué)家們將研究焦點轉(zhuǎn)向?qū)ふ颐庖呒?xì)胞中的溫度感受器。研究證實免疫細(xì)胞可在正常生理或病理生理情況下經(jīng)歷急劇的溫度轉(zhuǎn)變，當(dāng)體溫顯著下降時，免疫細(xì)胞可從37℃的脾臟移動到正常溫度為33℃的皮膚組織。在高燒時身體的體溫甚可升高41℃。
2011
05-09

人CAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白ELISA試劑盒操作說明
*，人CAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白ELISA試劑盒操作說明1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支。240pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不
2011
05-06

我國聚酮天然產(chǎn)物生物合成研究獲重大發(fā)現(xiàn)
結(jié)構(gòu)復(fù)雜的天然產(chǎn)物歷來是抗腫瘤藥物的重要來源。FR901464是假單孢菌產(chǎn)生的、結(jié)構(gòu)*且具有全新作用機制（作用于mRNA剪接體系的SF3b復(fù)合物）的高活性抗腫瘤天然產(chǎn)物，近年來引起了有機合成、藥物化學(xué)及化學(xué)生物學(xué)等多方面的關(guān)注。根據(jù)報道，研究人員采用PCR克隆特異的羥基-甲基戊二酰輔酶A合成酶（HCS）基因的方法，從假單孢菌sp.No.2663中克隆了完整的FR901464生物合成基因簇。該研究揭示了自然界聚酮天然產(chǎn)物生物合成中復(fù)雜多樣的生物合成機理，為進一步發(fā)現(xiàn)新的酶催化反應(yīng)并通過對其生物合成
2011
05-05

牛糜蛋白酶elisa試劑盒實驗原理
牛糜蛋白酶elisa試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（320U/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個牛糜蛋白酶elisa試劑盒標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN

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