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細胞培養的污染類型2010/04/09

污染是細胞培養的大敵。預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。一開始就要十分重視，應積極采取措施，防止污染，否則會前功盡棄，不僅浪費時間，而且浪費人力、物力，甚至造成無法彌補的損失。*節污染的類型細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。一、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染，即使在細胞培養液中加入了抗菌素（一般為預防劑量），也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌

分子信標的發展2010/04/08

分子信標是一種設計巧妙的熒光探針。在長度為15-30mer寡核昔酸探針的兩端分別加上5-8mer序列互補的莖桿區。在自由狀態時由于莖桿區互補序列的結合使探針分子形成發夾狀結構，所以又被稱為發夾探針。探針的5'端及3'端分別聯用熒光素分子及碎滅劑分子。為經典的分子信標結構，其中1-氨基蔡-8-叛酸（EDANS）為熒光素，二甲氨基偶氮苯甲酚（DABSYI.）為猝滅劑。自由狀態時，發夾結構的兩個末端靠近，使熒光分子與碎滅分子靠近（約為7-1Onm）。此時發生熒光共振能量轉移，使熒光分子發出的熒光被碎滅

美國新的可再生燃料標準2010/04/06

美國于2007年12月中旬通過的能源法案（H.R.6），將推行新的可再生燃料標準。該法案除了提高綜合汽車燃料經濟性（CAFE）標準，到2020年CAFE達平均值35英里/加侖外，也涉及提高可再生燃料標準（RFS）；運輸電氣化；提高設施和照明標準；建筑和工業節能；政府和公用設施節能；支持太陽能、地熱能、海洋能和水力發電能源技術研究，和運輸與電力的能量貯存研究；研究、開發和驗證碳捕集與封存；電網現代化；以及其他各種措施。可再生燃料標準（RFS）：該法案列出4種主要的可再生燃料：常規生物燃料，指由谷物

H1N1抗藥性與免疫系統缺陷有關 2010/04/01

美國醫學專家研究發現，甲型H1N1流感病毒在免疫系統受損的患者體內較易出現抗藥性，在對這部分人群進行治療時需特別注意用藥方式。美國研究人員在一期美國《臨床傳染病》雜志上報告說，他們對兩名免疫系統有缺陷的甲型H1N1流感患者進行了跟蹤調查。在接受抗病毒藥物治療數日后，這兩名患者體內的流感病毒先后發生變異，對流感藥物達菲和帕拉米韋產生抗藥性。研究人員說，短時間治療后，有免疫缺陷的患者體內出現抗藥性病毒值得關注。醫生在治療甲型H1N1流感時應謹慎用藥，并加強對患者的跟蹤，避免這種病毒出現普遍抗藥性。世

ELISA中非特異性顯色原因分析 2010/03/31

【摘要】：影響ELISA中非特異性顯色的原因很多，如盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物，操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度，從而提高檢測的特異性，并得到更準確、可靠的實驗結果。【關鍵詞】ELISA非特異性顯色酶聯免疫吸附試驗（ELISA）自1971年自問世以來，以其敏感性高，特異性強，操作簡便、安全，而廣泛應用于臨床診斷，開創了免疫學診斷的新紀元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免在它的研究、生產及使用中常常會碰到非特異性問題，本文就在實

犬可溶性纖維蛋白酶聯免疫分析（ELISA）2010/03/30

本試劑盒僅供研究使用。藥品名稱：通用名：犬可溶性纖維蛋白酶聯免疫分析試劑盒使用目的：本試劑盒用于測定犬血清，血漿及相關液體樣本中可溶性纖維蛋白含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中犬可溶性纖維蛋白水平。用純化的犬可溶性纖維蛋白抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入可溶性纖維蛋白，再與HRP標記的可溶性纖維蛋白抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的可

生理常用儀器設備的使用方法介紹2010/03/29

D－951微機化生理實驗教學系統是一種智能化的四導生物信號采集分析系統，適用于80X86系列微機。具備示波器加記錄儀加放大器加刺激器等傳統生理儀器的全部功能。另外，還具有自動分析、參數預置、操作提示、動畫釋疑、中文顯示、下拉菜單、鼠標驅動和在線幫助等微機*的功能。有些實驗還設計了模擬實驗的內容。本系統的功能特點包括：圖形化界面；Windows風格；鍵盤與鼠標操作兼容；模仿儀器面板式操作界面；項目化參數預置；實時記錄與實驗模擬并行；實時無間隙存盤（＞24h）；自動基線；項目標記；波形編輯等。硬件方

ELISA中的試劑－免疫吸附劑 2010/03/26

臨床檢驗中一般采用商品盒進行測定。ELISA中有三個必要的：免疫吸附劑、結合物和酶的底物。完整的ELISA盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標記的抗原或（結合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；（5）結合物及標本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應終止液。3.1免疫吸附劑已包被抗原或的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個月。有些不完整的試盒，僅供應包被用抗原或抗體，檢測人員需自行

實驗室日常小技巧集錦 2010/03/25

平時在實驗室zui常聽到的一句話就是“今天某某試驗沒做好是為什么？今天某某試驗沒出結果是什么原因？今天某某試驗為什么會是這樣的呢？”等等。然后仔細一查找原因，往往是由于操作上面的不認真，或是一些小小的細節沒有注意到。以下是集各路朋友的一些經驗，與大家分享：1跑page膠的時候，小電壓跑會避免高電壓產生的熱量爾導致的膠層變形。低電壓泳道會比大電壓泳道跑的直一些，且分離效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分離。2.提取質粒的時候，zui后一步的酒精揮發很關鍵，基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所

ELISA中的試劑－酶的底物 2010/03/24

ELISA中的試劑－酶的底物酶的底物3.3.1HRP的底物HRP催化過氧化物的氧化反應，代表性的過氧化物為H2O2，其反應式如下：DH2+H2O2D+H2O上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無色化合物，經酶作用后成為有色的產物，以便作比色測定。常用的供氫體有鄰苯二胺（O-phenylenediamine,OPD）、四甲基聯苯胺（3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,TMB）和ABTS[2,2'-azino-di-（3-eth

蛋白質提取方法2010/03/23

蛋白質提取方法-------列舉10種方法一、植物組織蛋白質提取方法（summer）1、根據樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液，可根據材料不同適當加入），準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時）。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，樣品制備完成。蛋白質提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyl

巴西三位一體的生物柴油戰略 2010/03/22

有害氣體排放超標、氣候變暖、石油價格居高不下、可再生資源日漸匱乏……面對一系列生態難題，人類該如何應付？生物柴油正日益成為能源發展的新選擇。然而，對于大規模采用生物柴油這一戰略選擇，究竟利大于弊，還是弊大于利，眾說紛紜。權衡標準也呈現多樣性：一是商業標準，發展生物柴油是否經濟；二是生態標準，生物柴油是否是對環境健康的能源；三是社會標準，即發展生物柴油是否有利于社會問題的緩解。巴西是世界大規模開發生物柴油zui早的國家，巴西發展生物柴油，實現“能源—環境—社會”三位一體的發展生物柴油戰略值得關注。

酶聯免疫吸附測定的操作要點2010/02/01

酶聯免疫吸附測定的操作要點1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清

酶免疫測定的酶—大分子蛋白結合物的制備2010/02/01

酶免疫測定的酶—大分子蛋白結合物的制備酶結合物可以說是酶免疫測定試劑盒的核心組成部分。通常酶免疫測定試劑盒的有效使用期限即是根據酶結合物的穩定性而定的。因為在酶免疫測定試劑盒中，zui易受外環境影響的組成試劑即是酶結合物。此外，酶結合物的質量亦是影響試劑盒質量的很重要的因素之一，可見酶結合物的制備對于酶免疫測定來說，是非常關鍵的一個環節。酶—抗體（或其他大分子蛋白）結合物是酶免疫測定的有機組成部分，也是其測定基礎之所在。通常，酶結合物（酶標抗體或抗原）一般均是通過化學交聯而得到的。一個理想的化學

ELISA試劑的臨床質量評價2010/01/31

ELISA試劑的臨床質量評價ELISA試劑的評價（evaluation）分兩個方面：一是試劑本身的質量評價，符合一定要求后才能生產供應；一是在臨床應用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過中國藥品生物制品檢定，以得到生產的許可。檢定內容除包裝、標簽、說明書等外，對試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定，通過對一系列參比品的檢測，結果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質量評價是用該試劑對臨床樣本進行檢測，以觀察其實際應用價值。臨檢中心對乙肝ELISA診斷試

臨床ELISA測定的常用模式--雙抗體夾心法測抗原2010/01/25

臨床ELISA測定的常用模式--雙抗體夾心法測抗原對于含多個抗原決定簇的大分子蛋白，使用雙抗體夾心ELISA模式測定相當簡便，現有的商品試劑盒基本上都采用此種測定模式。具體測定方法如下：1．首先以雙抗體之一于碳酸鹽緩沖液中4℃下過夜包被聚苯乙烯等固相，形成固相抗體，洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗體后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結合的部分及雜質。2．加入含待測物的臨床樣本如血清等，溫育一定時間后洗板；此時，待測抗原就會與固相上特異抗體反應而吸附于固相上。3．加入酶標記的雙抗體之

人（human）單純皰疹病毒1型抗原（HSV1-Ag） 2010/01/25

人（human）單純皰疹病毒1型抗原（HSV1-Ag）本試劑盒僅供研究使用標本：血清或者血漿一、試劑組成精密度微孔板96孔（MicrotitrationStrips）1塊2～8℃干燥保存酶標偶合液（Conjugate）1瓶12.0毫升2～8℃冷藏保存標準品（Standard）5瓶各1.0毫升2～8℃冷藏保存呈色劑A（SubstrateA）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存呈色劑B（SubstrateB）1瓶6.0毫升2～8℃避光冷藏保存終止液（StoppingSolution）1瓶6.0毫升室溫

人 （Human） 白細胞介素-2（IL-2） ELISA 檢測試劑盒2010/01/25

人（Human）白細胞介素-2（IL-2）ELISA檢測試劑盒用途：人IL-2ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的IL-2。本試劑盒可以檢測天然和重組的IL-2。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。試驗原理：人IL-2試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IL-2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入

人（Human）骨成型蛋白-2 （BMP-2） ELISA 檢測試劑盒2010/01/18

RDENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAY---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------人（Human）骨成型蛋白-2（BMP-2）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：BMP-2試劑盒是固相

常見問題及解答 2009/12/18

1.如何測定引物的OD值？用紫外分光光度計在260nm波長測定溶液的吸光度來定量，請注意紫外分光光度計的使用，測定時溶液的吸光度稀釋到0.2-0.8之間（吸光度太高或太低會有較大的誤差）。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，取部分溶液稀釋到1ml并在1ml標準比色皿中測定其吸光度，即為所測體積的OD值，進而可以計算出母液的OD值。舉例：您拿到一管干粉的DNA，用1ml水溶解成母液，取該母液50μL稀釋成1ml并在1ml標準比色杯中測定的吸光度為0.25，說明該50μL中含有0.25OD的D