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細胞遷移侵襲實驗中基質膠的應用2022/07/20

細胞遷移侵襲實驗中基質膠的應用基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在1980年代中期由丹麥的J.Engelbreth-Holm和RichardSwarm二者分別發現并具體描述基質膠【1】，其主要生產過程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質，再用溶劑萃取產物中不溶性復合

翌圣T4 DNA ligase2022/06/13

FastT4DNALigase，讓片段連接更高效——快速高效的DNA連接酶產品原理DNA連接酶是一種能夠催化相鄰DNA的3’-OH和5’-磷酸基末段形成磷酸二酯鍵，并且把兩段DNA拼接起來的核酸酶。T4Ligase是目前應用比較多的病毒基因組編碼的DNA連接酶，主要從缺失型嗜菌體中提取，噬菌體T4的30基因是該酶的合成基因。T4DNA連接酶在分子生物學中有廣泛的應用。產品簡介在普通T4DNA連接酶的基礎上，利用定向改造技術，將T4DNAligase的有效催化活性結構域通過多輪突變篩選，得到一種連

造血幫手-集落刺激因子2022/06/05

造血幫手-集落刺激因子集落刺激因子是一組在體內外均可選擇性刺激造血祖細胞增殖，分化形成某一譜系細胞集落的細胞因子，命名為集落刺激因子（CSF）。廣義上，凡是刺激造血的細胞因子都可統稱為CSF。一．集落刺激因子的分類造血細胞集落刺激因子(CSF)的研究進展迅速,已經發現了許多種CSF,它們都是糖蛋白,根據其對造血祖細胞克隆增殖的作用不同而命名。表1：集落刺激因子的分類表分類細胞因子受體產生細胞效應多能集落刺激因子multi-CSF,IL-3IL-3R活化的T細胞刺激造血干細胞增殖，促進肥大細胞，嗜

干貨 | 限制性內切酶知多少？2022/06/05

何謂限制性內切酶？限制性內切酶是一種能夠識別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列，并在特定位置切割DNA鏈中的磷酸二酯鍵的一類酶，簡稱限制酶。不同的限制性內切酶會識別不同的DNA序列，它可以在識別序列內或距識別序列不遠的位置處切割DNA，酶切之后會形成不同類型的產物，如下圖中的BamHI形成5’粘性末端產物，KpnI形成3’粘性末端產物，EcoRV形成平末端產物。▲BamHI、KpnI、EcoRV酶切示意圖限制性內切酶于分子克隆實驗中。但除了克隆，它還可以應用于疫苗研發生產、基因測序、SNP鑒定、dd

支原體檢測，快人一步2022/06/02

支原體檢測，快人一步支原體（Mycoplasma）又稱霉形體，是目前發現小、簡單的原核生物，在實驗室和生物制品工廠在細胞培養過程中易受到支原體污染，據文獻報道：支原體污染在儲存細胞系中發生率約為15%-35%，在生物制藥行業中約為0.44%-6.70%[1]。支原體污染后能導致細胞產生多種變化（見圖1），因此如何快速的檢測支原體的存在不僅大大降低污染的風險，也能為開發和生產降本增效。圖1：受支原體污染后細胞出現的相關狀態的改變支原體檢測應用場景隨著分子生物學技術的迅速發展，基于核酸檢測的方法廣泛

關于高保真聚合酶，你想知道的都在這里2022/06/02

關于高保真聚合酶，你想知道的都在這里DNA聚合酶是PCR反應中*的組成部分，是參與DNA復制中的重要酶，被用在生物及醫學等領域的各個研究方向上。PCR技術發明至今40多年的時間里，從早期被發現的TaqDNA聚合酶到現在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發現和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進。而高保真DNA聚合酶的出現正是順應了市場需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應用方向等進行介紹。圖1.PCR擴增的整個檢測過程[1]什么是高保真酶高保真DNA聚合

蛋白質修飾之——泛素化修飾2022/06/02

蛋白質修飾之——泛素化修飾蛋白質的修飾有多種類型，除了常見的無機和有機小分子修飾，如磷酸化、糖基化、脂酰化等，還有一類用小肽進行修飾的，例如泛素化（ubiquitination），類泛素化NEDD化（neddylation）、ISGylation蘇木化（SUMOylation）等。而泛素-蛋白酶體系統則負責特異性地降解大多數細胞內蛋白（約占80%以上），是一種高效蛋白降解途徑。泛素化修飾還可以直接影響蛋白質的活性和定位，調控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA損傷修復以及免疫應答等在內的多種

如何選擇合適的二抗 二抗是什么？2022/06/02

如何選擇合適的二抗二抗是什么？二抗是能和一抗結合的抗體，即抗體的抗體。主要用于檢測一抗的存在。一抗特異性結合抗原的，二抗是特異性結合一抗。即一抗的Fc段或Fab片段可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說，一抗主要是IgG類免疫球蛋白，因此二抗就是抗IgG抗體。一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團，而且一抗可以至少結合兩種其他基團（底物和二抗），如下圖是直標一抗。二抗的作用一抗是特異性的結合目標蛋白，一抗需要發光物質或者顯色基團標記才能被檢測出來，否者一抗和蛋白的結合與否用肉眼是看不出來的。

內參抗體你選對了嗎?2022/06/01

內參抗體你選對了嗎?各位小伙伴，您是否在蛋白免疫印記時，面對各種內參抗體而不知所措呢，內參蛋白是生物體內管家基因編碼的，在多組織中穩定表達，用于驗證免疫學實驗中是否正常進行和一種半定量檢測蛋白表達的標準對照，那么如何正確的選擇內參抗體呢！可以從以下幾點去參考。一、樣本種屬來源1.哺乳動物組織或著細胞來源的樣本，一般選擇β-actin、α-tubulin、GAPDH、Lamin-B、HistoneH3、Na+/K+-ATPase。2.植物來源樣本，一般選擇plantactin、Rubisco等。3

外泌體是什么？外泌體(Exosome)研究正確打開方式2022/06/01

外泌體是什么？外泌體(Exosome)研究正確打開方式外泌體曾經被認為是細胞卸載廢物的一種方式，在過去的十年中，我們對外泌體的看法發生了巨大變化。我們已經開始認識到，外泌體是從細胞中釋放出來的，通過其RNA，蛋白質，脂質和DNA的載體充當信號載體和組織重塑者。參與癌癥，炎癥，免疫，中樞神經系統功能，心臟細胞功能。外泌體在這些基本生物過程中的作用，它們作為生物標志物，也可作為靶向遞送生物分子藥物載體（如治療）的工具研究。獲取和研究外泌體所需的一切，從分離和鑒定分析以及染色等。基于qPCR的外泌體m

B-27無血清添加劑神經干細胞培養手冊2022/06/01

B-27無血清添加劑（B-27supplement,serumfree）神經干細胞培養手冊概述神經干細胞(neuralstemcell)是指存在于神經系統中，具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的潛能，從而能夠產生大量腦細胞組織，并能進行自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。在神經干細胞培養中B-27與N-2添加劑的使用十分廣泛，B-27是一種最常被引用的神經細胞培養添加劑，是一種優化的無血清添加劑，用于支持胚胎、出生后和成年海馬神經元和其他中樞神經系統（CNS）神經元的生長和

N-2無血清添加劑神經干細胞培養手冊2022/06/01

N-2無血清添加劑（N-2supplement,serumfree）神經干細胞培養手冊概述神經干細胞(neuralstemcell)是指存在于神經系統中，具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的潛能，從而能夠產生大量腦細胞組織，并能進行自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。在神經干細胞培養中B-27與N-2添加劑的使用十分廣泛，N-2添加劑主要被用于神經母細胞瘤以及周圍神經系統（PNS）與中樞神經系統（CNS）來源的有絲分裂后期的神經元的生長和表達。圖1.神經干細胞的發展神經系統

白介素家族信號通路及功能概述2022/06/01

白介素家族信號通路及功能概述白細胞介素（interleukin，IL）簡稱白介素，是由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子，在免疫調節和穩態中起著重要作用。目前發現了38種白細胞介素，分別命名為IL-1—IL-38，其受體可分為I型、II型和其他型。其中II型白細胞介素受體包括白細胞介素-10、20、22、28受體，其他型包括白介素-1、8受體，其余為I型白細胞介素受體。1.白細胞介素及其受體、來源和功能表1.白介素家族、受體和功能細胞因子受體來源功能IL-1α；IL-1βIL1RI和IL

趨化因子超家族-疾病新靶點2022/05/22

趨化因子超家族-疾病新靶點人體在防御和清除入侵病原體等異物時，有一種使免疫細胞定向趨化的功能，此類引起這種功能的物質稱之為趨化劑或趨化因子，具有重要的生理意義和病理作用，是當前熱門研究的疾病新靶點。一、趨化因子與受體趨化因子是一類由細胞分泌的小細胞因子或信號蛋白，誘導臨近反應細胞定向趨化的能力，命名為趨化細胞因子。在炎癥、淋巴器官發育、細胞運輸、淋巴組織內的濾泡形式、血管生成和傷口愈合中起重要作用。現有50多種趨化因子，之間有2個共同特征，首先分子量在8-10kDa之間，另外具有四個位置保守的半

腫瘤壞死因子-TNF超家族2022/05/22

腫瘤壞死因子-TNF超家族一、TNF超家族1975年Carswell等人發現在接種BCG的小鼠中注射LPS后，血清中得到一種可以直接殺傷腫瘤細胞，但對正常細胞沒有明顯的細胞毒性的細胞因子，稱之為腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor,TNF）。十年后Shalaby把巨噬細胞產生的TNF稱為TNF-a，又名惡質素，另T淋巴細胞產生的淋巴毒素（LT）稱為TNF-β。目前發現的TNF超家族蛋白（TNFSF）配體19種和受體29種。主要由免疫細胞表達，包括TNF、CD40L、TNFSF13

ADCC檢測用效應細胞株，助力藥物開發2022/05/22

ADCC檢測用效應細胞株，助力藥物開發單克隆抗體(Monoclonalantibodies，mAb)是由B細胞產生并特異性靶向抗原的物質。1975年K?hler和Milstein利用雜交瘤技術使得大量獲取純mAb成為可能，這項技術極大地增強了抗體的基礎研究和臨床應用潛力，也極大地促進mAb向臨床應用的進展[1]。因這項創舉性工作，二人與英裔丹麥籍免疫學研究者NielsKajJerne共同獲得了1984年的諾貝爾生理學/醫學獎。圖1.生理學/醫學獎圖自諾貝爾獎應用于臨床的抗體藥物（嵌合單抗、人

如何使用潮霉素B篩選穩轉株-----潮霉素B的應用2022/05/22

如何使用潮霉素B篩選穩轉株-----潮霉素B的應用潮霉素B的作用原理潮霉素B（HygromycinB）是一種氨基糖苷類抗生素，由吸水鏈霉菌（Streptomyceshygroscopicus）代謝產生，通過破壞易位和促進80S核糖體的錯讀而抑制蛋白合成，從而殺死原核（如細菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳動物真核細胞。目前常用于篩選和維持培養含潮霉素抗性基因的原核或真核細胞。潮霉素B的應用●篩選和維持培養穩定轉染Hph+載體的原核或真核細胞（植物細胞和哺乳動物細胞）大腸桿菌(Escheric

鏈脲佐菌素鏈(Streptozocin, STZ)誘導的糖尿病動物模型2022/05/20

鏈脲佐菌素鏈(Streptozocin,STZ)誘導的糖尿病動物模型糖尿病(diabetesmellitus,DM)是由多種疾病因素復合導致的以慢性血糖水平增高為特征的全身慢性代謝性疾病，與家族遺傳、環境因素以及自身免疫相關，已成為嚴重危害人類健康的公共衛生問題，其并發癥不僅嚴重影響糖尿病患者的生活質量，同時也是致殘、致死的重要原因，但其具體的發病機制目前尚未*闡明。因此，建立合適的糖尿病動物模型，闡明DM及其并發癥的發病機制就顯得尤為重要。目前，DM動物模型制備方法主要有：手術切除胰腺、化學藥

Aureobasidin A (AbA) 金擔子素A2022/05/20

AureobasidinA(AbA)金擔子素A－酵母單/雙雜交研究的篩選標記什么是金擔子素A金擔子素A(AureobasidinA，AbA)是從絲狀真菌AureobasidiumpullulansNo.R106中分離出來的環酯肽類抗生素，具有很強的抗真菌能力，在較低的濃度下(0.1-0.5μg/mL)即可對酵母產生毒性。AbA作用機制是通過抑制酵母中AUR1基因編碼的肌醇磷酰胺合成酶(inositolphosphorylceramidesynthase,IPCsynthase)的活性，阻礙神經酰

細胞骨架的染色神器-鬼筆環肽2022/05/20

細胞骨架的染色神器-鬼筆環肽細胞骨架是網狀纖維結構，是高度動態的，不同時期有不同的形態。它主要是由微絲，微管和中間絲所組成的。微絲主要是肌動蛋白組成的，肌動蛋白分成肌動蛋白單體（G-actin）和纖維狀蛋白單體（F-actin）。游離的肌動蛋白還會有ATP和Mg+。微絲的組裝就是G-actin變成F-actin的過程。鬼筆環肽是一種雙環七肽，最早發現的環狀肽之一，是從鬼筆鵝膏（Amanitaphalloides）中分離出來的。通過結合和穩定纖維狀肌動蛋白（F-actin）發揮功能，并有效防止肌動