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2018
07-06

離子交換劑的選擇、處理和保存
1.離子交換劑的選擇離子交換劑的種類很多，離子交換層析要取得較好的效果首先要選擇合適的離子交換劑。首先是對離子交換劑電荷基團的選擇，確定是選擇陽離子交換劑還是選擇陰離子交換劑。這要取決于被分離的物質在其穩定的pH下所帶的電荷，如果帶正電，則選擇陽離子交換劑;如帶負電，則選擇陰離子交換劑。例如待分離的蛋白等電點為4，穩定的pH范圍為6-9，由于這時蛋白帶負電，故應選擇陰離子交換劑進行分離。強酸或強堿型離子交換劑適用的pH范圍廣，常用于分離一些小分子物質或在pH下的分離。由于弱酸型或弱堿型離子交換劑
2018
07-05

原子吸收光譜的基本原理
原子吸收光譜的產生*，任何元素的原子都是由原子核和繞核運動的電子組成，原子核外電子按其能量的高低分層分布而形成不同的能級，因此，一個原子核可以具有多種能級狀態。能量低的能級狀態稱為基態能級（E0=0），其余能級稱為激發態能級，而能低的激發態則稱為激發態。正常情況下，原子處于基態，核外電子在各自能量低的軌道上運動。如果將一定外界能量如光能提供給該基態原子，當外界光能量E恰好等于該基態原子中基態和某一較高能級之間的能級差?E時，該原子將吸收這一特征波長的光，外層電子由基態躍遷到相應的激發態，而產生原
2018
07-05

原子吸收光譜儀的保養
1.開機前，檢查各插頭是否接觸良好，調好狹縫位置，將儀器面板的所有旋鈕回零再通電。開機應先開低壓，后開高壓，關機則相反。2.空心陰極燈需要一定預熱時間。燈電流由低到高慢慢升到規定值，防止突然升高，造成陰極濺射。有些低熔點元素燈如Sn、Pb等，使用時防止震動，工作后輕輕取下，陰極向上放置，待冷卻后再移動裝盒。裝卸燈要輕拿輕放，窗口如有污物或指印，用擦鏡紙輕輕擦拭。空心陰極燈發光顏色不正常，可用燈電流反向器（相當于一個簡單的燈電源裝置），將燈的正、負相反接，在燈大電流下點燃20－30min；或在大電
2018
07-04

親和層析法純化多克隆抗體
【實驗原理】如圖所示，親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化，富集某一含量較低的目的蛋白成為可能，因此親和層析是蛋白質分離純化過程中有效的方法之一。另外，如果配基與蛋白質的親和能力很強，也可同時進行樣品的濃縮。雖然多數情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開，但如果一旦需要，蛋白A親和層析是一種非常有效的分離方法。蛋白A是從Staphylococcusaureus中獲得，可與抗體重鏈的Fc片段相結合。現在已知蛋白A可與多種哺乳動物的IgG相結合也可與某些IgM和IgA相結合。如果將蛋白A與固相
2018
07-04

離子交換樹脂在天然產物提取分離中的應用
作者張東劉建華韓林宇陳晨王逸君（陜西理工學院生物科學與工程學院生工091，陜西漢中723000）指導教師：馮自立【摘要】綜述了離子交換樹脂在核苷酸、核酸、抗生素等天然產物分離純化中應用的研究現狀,展望了離子交換樹脂在天然產物提取分離中的應用前景。【關鍵詞】離子交換樹脂天然產物分離提純離子交換樹脂自1933年開始合成以來,至今已獲得了長足發展。目前交換樹脂的商品品種已達2000余種，廣泛應用于化工生產、食品工業、醫藥工業、環境保護等許多領域。用離子交換樹脂進行交換、吸附、絡合，從而達到分離、提純、
2018
07-02

手性分離色譜
是采用色譜技術(TLC、GC和HPLC)分離測定光學異構體藥物的有效方法。由于許多藥物的對映體(Enantiomer)之間在藥理、毒理乃至臨床性質方面存在著較大差異，有必要對某些手性藥物進行對映體的純度檢查。（一）原理和方法：對映體化合物之間除了對偏振光的偏轉方向恰好相反外，其理化性質是*相同的，因而難以分離。傳統方法（分步結晶法、酶消化法等）有很大局限性，特別是難以進行微量分離和測定。60年代前后，TLC、GC法逐漸用于對映體化合物的拆分。但這兩種方法只能拆分不多的化合物，且需要較復雜的樣品處
2018
07-02

雙向電泳樣品制備程序
一、培養細胞（culturecell）樣品處理方法：培養動物組織細胞由于沒有細胞壁，因此可以將細胞收集下來，直接加入裂解緩沖液（Lysisbuffer）抽提總蛋白。裂解緩沖液有多種配方，本實驗室主要采用如下成份：1.7MUrea，2MThiourea，4％（w/v）CHAPS，40mMTris-Base，40mMDTT，2％PharmalytepH3-10.其他常用的裂解緩沖液如下：2.9.5Murea,2%(w/v)CHAPS,0.8%(w/v)PhamarlytepH3-10,1%(w/v)
2018
06-29

阿貝折射儀
儀器用途阿貝折射儀是能測定透明、半透明液體或固體的折射率nD和平均色散nF-nC的儀器（其中以測透明液體為主），如儀器上接恒溫器，則可測定溫度為0℃～70℃內的折射率nD。折射率和平均色散是物質的重要光學常數之一，能借以了解物質的光學性能、純度、及色散大小等。本儀器能測出蔗糖溶液的質量分數（錘度Brix）（0～95%，相當于折射率為1.333～1.531）。故此儀器使用范圍甚廣，是石油工業、油脂工業、制藥工業、制漆工業、日用化學工業、制糖工業和地質勘察等有關工廠、學校及有關科研單位*的常用設備之
2018
06-29

流式細胞儀檢測技術實驗
流式細胞儀（flowcytometer）是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。流式細胞儀實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗材料淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒FACS緩沖液
2018
06-28

色譜儀分離方法的選擇原則
色譜儀分離方法的選擇原則：一、根據相對分子質量選擇：1、相對分子質量很低的樣品采用氣相色譜。2、液液分配色譜、液固吸附色譜和離子交換色譜適合分析相對分子質量為200～2000的樣品。3、相對分子質量大于2000的樣品，采用凝膠色譜為優。二、根據溶解度選擇：1、溶于水并能離解的樣品，采用離子交換色譜。2、溶于烴類（如苯或異辛烷等）的樣品，可采用液固吸附色譜。3、溶于CCl4的樣品，多采用液液分配色譜和液固吸附色譜。4、既溶于水又溶于異丙醇的樣品，常用水和異丙醇的混合液作液液分配色譜的流動相，以疏水
2018
06-28

液相色譜儀的應用
液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異，使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。液相色譜儀在食品分析、環境分析、生命科學、醫學檢驗和無機分析等領域得到廣泛使用。一般來說，80%～85%的有機物原則上可采用液相色譜儀分析。一、在食品分析中的應用：1、食品營養成分分析：蛋白質、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機酸（鄰苯二甲酸、檸檬酸和蘋果酸等）、有機胺和礦物質等分析。2、食品添加劑分析：甜味劑、防腐劑、著色劑（檸檬黃、莧菜紅
2018
06-28

氣相色譜儀應用領域
(一)白酒中有關醛、醇、酯的分析：采用氫焰離子化檢測器，使用20%DNP+7%吐溫-80，或蘭州化物所大口徑￠0.53mm毛細管柱，完成濃香型白酒和清香型白酒中主要的醇、醛、酸、酯各個組分的分析。使用毛細管柱除提高了分析效率外，還能檢出有機酸，為復雜的釀造發酵工藝提供了更多有價值的信息。分析結果*符合國標GB10345.7-89/GB10345.8-89。(二)植物油中殘留溶劑的檢測：可以按照國標GB/T5009.37-2003頂空氣相色譜法對浸出油中6號溶劑殘留量進行測定。采用氫焰離子化檢測器
2018
06-27

離心分離方法專題介紹
在實驗過程中，由于樣品的各種性質差異，只有選擇了正確的離心方法，才能獲得預期的分離純化結果。常用的離心方法主要有差速離心法、密度梯度離心法。其中密度梯度離心法又可細分為速率區帶離心和等密度梯度離心法。離心方法——差速離心差速離心法(differebtialvelocitycentrifugationmethod)又稱離心力差分離法。原理是利用樣品中各組分沉降系數的差異，對不同的微粒施以不同的離心力，經過多次離心，離心速度逐步加大，將不同的微粒依次沉降，從而實現離心分離。如果分離樣品中有大中小三種
2018
06-27

超聲波提取原理
超聲波提取技術超聲波是指頻率為20千赫～50兆赫左右的電磁波，它是一種機械波，需要能量載體—介質—來進行傳播。超聲波在傳遞過程中存在著的正負壓強交變周期，在正相位時，對介質分子產生擠壓，增加介質原來的密度；負相位時，介質分子稀疏、離散，介質密度減小。也就是說，超聲波并不能使樣品內的分子產生極化，而是在溶劑和樣品之間產生聲波空化作用，導致溶液內氣泡的形成、增長和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標物從固相轉移到液相的傳質速率。在工業應用方面，利用超聲波進行清洗、
2018
06-26

細胞培養中無菌操作技術
細胞培養中的無菌技術：1.實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、
2018
06-26

神經干細胞的培養
一、神經干細胞的分離和傳代無菌條件下取新生SD大鼠(出生48h內)腦組織，D-Hanks液充分漂洗后，在解剖顯微鏡下剝離腦膜，準確分離海馬，用眼科剪將海馬剪碎后，再轉移到DMEM/F12(1:1)加B27和bFGF(20ng/ml)的無血清培養基，吸管吹打機械分離制作單細胞懸液，臺盼藍染色后細胞計數，調整細胞濃度為5×104~5個/ml，置于24孔培養板中培養，每孔加入細胞懸液500μl。待神經球形成后再次機械分離克隆制作單細胞懸液，仍以5×104個/ml的細胞濃度置于24孔培養板中培養，每孔加
2018
06-25

近紅外光譜儀的優點
1、分析速度快，一般分析一個樣品的時間約為1分鐘。2、不需要對樣品進行化學處理，分析步驟簡單。3、無消耗品，無環境污染，不破壞樣品，經濟。4、一次測試能夠同時得到多種成分或指標，甚至開發多種新指標而沒有"通道"限制。5、分析結果度比濕化學方法高，因為儀器具有優異的穩定性，高重現性，操作環節少，所以數據更可靠。6、儀器用途廣泛，能夠放到現場使用，甚至能夠在線實時檢測。7、可檢測的樣品廣泛，通常是固態的片煙、煙絲或粉末，也可以是液態，還可開發檢測其他輔料的方法。在真假鑒別方面也取得了進展。8、可透過
2018
06-25

EB注意事項
分子式：C21H20BrN3分子結構英文名：Ethidiumbromide分子量：394.3139g/mol熔點：260-262°C為芳香族熒光化合物EB（Ethidiumbromide，溴化乙錠）溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑，用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標準302nm紫外光透射儀激發并放射出橙紅色信號，可用Polaroid底片或帶CCD成像頭的凝膠成像處理系統拍攝。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導致錯配。溴化乙錠是強誘變劑,具有高致癌性!普通實驗手套（淺黃色乳膠手套
2018
06-25

瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。原理瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當大，對大多數蛋白質
2018
06-22

固相pH梯度
實驗目的：分離蛋白質混合物，將樣品進行電泳后，為了不同目的在它的直角方向再進行一次電泳。常說的雙向電泳是根據蛋白質所帶的電荷和分子大小對蛋白質混合物進行分離。實驗原理：向等電聚焦的基本原理是利用蛋白質分子或其他兩性分子的等電點不同，在一個穩定的、連續的、線性的pH梯度中進行蛋白質的分離和分析。第二向運用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳根據分子量大小對蛋白質進行分離?；具^程：等電聚焦、平衡及轉移到二向、SDS-Page試劑或儲液：IPGbuffer、礦物油、DTT、碘代乙酰胺、過硫酸銨、TEMED、1M

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