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2018
06-22

離子色譜分離柱
與HPLC一樣，分離柱是離子色譜儀重要的組成部分。離子色譜的分離機理主要是離子交換，基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子之間進行的可逆交換，不同的離子因與交換劑的親和力不同而被分離，與HPLC不同的是，離子色譜選擇性的改變主要是通過采用不同的固定相來實現的。1陰離子交換分離柱陰離子交換分離柱使用的填料主要是表面附聚薄殼型陰離子交換樹脂。樹脂的內核是苯乙烯一二乙烯苯的共聚物(PS-DVB)，核外是一層磺化層，外層是粒度均勻的單層季銨化乳膠顆粒，以離子鍵結合在磺化層上。由于
2018
06-21

免疫復合物的純化
實驗試劑裂解緩沖液抗體蛋白A或蛋白G微球(用含0.02％疊氮鈉裂解緩沖液配成10％(V／V)的混懸液，4℃保存)不含DTT的Laemmli樣品緩沖液(2％SDS、10％甘油、60mmol／LTris，pH6.8和0.02％溴酚藍)1mol／LDTT(保存于-20℃)實驗設備搖床、抽吸裝置(大多是通過導管與負壓瓶一室內真空器連接)實驗步驟1．準備工作蛋白A或蛋白G微珠混懸液可在用前準備，4℃保存于含疊氮鈉的溶液中。2．操作步驟1)將小量裂解物樣本分別置于適當數量的1.5mlEP管中，加入裂解緩沖液
2018
06-21

如何選擇pH電極與ORP電極
一、pH電極選型：1、殼體材料的選擇：pH電極外殼一般采用PC塑料（聚碳酸脂）外殼和玻璃外殼二種，PC外殼耐碰撞和沖擊，但適用溫度2、液接界的選擇：液接界是溝通外參比溶液和被測溶液的連接部件，要求電勢穩定及重現。一般液接界材料有纖維材質，陶瓷芯，玻璃磨口等介質，纖維材質一般用于塑殼電極中，其溶液滲出速度較快，不易堵塞；陶瓷芯耐腐蝕性好，液接界電勢的穩定性及重現性均較好，可用于高溫介質中，是應用廣泛的液接界材料；玻璃磨口接界與溶液接觸面積及滲出速度均較大，適用于離子強度較弱，高粘度，混濁液體或膠體
2018
06-20

操作近紅外光譜儀的注意事項
近紅外光譜儀主要廣泛應用于對液體狀樣品的化學、物理性質作定量分析，由于儀器在常規光纖中有良好的傳輸性，且儀器簡單、分析速度快、對樣品不會造成破壞、測試時對樣品需求小等優點，在在線分析中得到廣泛使用。在操作近紅外光譜儀的過程中要注意以下事項：1、近紅外光譜區范圍為780~2526nm，是介于可見光和中紅外光之間的電磁波，在檢測樣品前首先要了解測試光譜的范圍。2、在使用前還要對儀器進行校正，近紅外光譜儀的校正相對比較麻煩，為了得出準確的數值，一般需要80個以上的代表性樣品用來進行校正，這一步驟通常稱
2018
06-20

液相色譜儀常見故障處理
LC-10AT液相色譜儀是日本島津公司1996年的產品，檢測器為可變波長紫外檢測器，色譜柱為島津公司的ODS-C18，大連依利特的ODS-C18。八年的日常工作中遇到了幾種故障，如故障1經咨詢島津公司的工程師后，得以解決；故障2、故障5是頻繁碰到的問題等，特作總結如下：故障1流動相內有氣泡，關閉泵，打開泄壓閥，打開purge鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內，過濾器內部由于霉菌的生長繁殖，形成菌
2018
06-20

針頭式過濾器的泡點測試
微孔濾膜過濾法做為一種重要的除菌和除顆粒的方法，已經在制藥，顆粒檢測及分析儀器的樣品處理中廣泛應用。做為實驗室為常見的針頭式過濾器除了需要做溶出檢測，化學兼容性的檢測之外，還應做完整性測試。過濾器的完整性是過濾產品中很重要的一個指標，一個過濾系統在過濾前后是否能保證其完整性，也是衡量一個過濾產品質量優劣的重要參數。對于過濾工藝，尤其是除菌級的過濾而言，完整性測試是一種必要的手段，以確定過濾的安全可靠性，避免工作中不必要的浪費，包括時間，精力，過濾樣品等。通過完整性測試，可以確定：1.過濾器自身的
2018
06-19

質譜MRM技術定量分析與應用
質譜多反應監測(multiplereactionmonitoring,MRM)技術作為一種質譜檢測的分析方法，具有特異性強、靈敏度高、準確度高、重現性好、線性動態范圍寬、自動化高通量的突出優點，這些特質能夠滿足今天很多研究領域的迫切需要。通過MRM技術進行實時的定量監測可以進行藥代動力學研究、臨床診斷、違禁藥物檢查、食品化妝品等工業質量控制、環境檢測、農業植物學研究以及代謝組學和蛋白質組學Biomarker的發現等相關研究。1.質譜MRM技術的原理MRM技術是一種基于已知或假定的反應離子信息，有
2018
06-19

質譜鑒定常見問題解答
1.一級質譜和二級質譜有什么區別？什么時候做一級，什么時候做二級？答：一級質譜鑒定的方式主要指胎指紋圖譜（PMF），即利用質譜儀測量酶解片段的分子量并搜庫比較實現蛋白質的鑒定，二級質譜是在一級質譜的基礎上再選擇部分肽段做進一步的破碎并對碎片進行深入分析和比較，鑒定出該肽段的序列并結合PMF的結果從而實現蛋白質的鑒定。二級質譜能夠得到部分肽短的序列，具有更高的可靠性。隨著現在雜志對數據的要求越來越嚴格，二級質譜鑒定是蛋白鑒定的大趨勢，而且即使目前做一級質譜鑒定的結果，也需要挑選部分PMF結果做二級
2018
06-15

氣相色譜/質譜聯用（GC/MS）技術在輕工行業的一些應用
1.煙草香味成分分析煙草香味成分分析對煙草的品質影響極大，是目前煙草行業關注的技術問題之一，我們采用同時蒸餾萃取（SDE），吹掃捕集、固相萃取（SPME）等樣品處理技術，與GC/MS技術相結合，對國內外的香煙、煙葉原料作了大量的分析，鑒定出數個特殊的煙用香氣物質，找出國內外卷煙在配方、用料、加香各方面的一些不同的思路，對配方產生了較重要的指導作用。2.白酒香味成份分析各種白酒中香味成份的種類相差很小，但是各種香味成份含量較大，構成了不同品牌、不同地區白酒的香味的風格各異。我們采用液/液萃取（L/
2018
06-15

氣相色譜層析
（一）基本原理混合樣品的氣流通過固定相時，根據各組分對固定相的吸附強弱不同使不同成分得到分離。利用氣相色譜層析技術做為微生物診斷的工具已成功地用于微生物的分類和鑒定。該法敏感性強，能夠分離和檢測到毫微克的水平。它具有快速的特點，常在數十分鐘甚至數小時就可以對傳染病做出早期診斷。其結果穩定，重復性好，但不足之處是操作中各因素不易控制，方法不易標化等。（二）氣相色譜儀的基本部件1．載氣常用的載氣主要有氮、氬、氫和二氧化碳等。這些氣體一般都由高壓氣瓶供給。2．進樣器氣相色譜儀可以用于分離固相、氣相和液
2018
06-14

如何選擇過濾器
1、過濾器主要用于捕集0.3um以下的顆粒灰塵及各種懸浮物。采用超細玻璃纖維紙作濾料，每臺均經納焰法測試，具有過濾效率高、阻力低、容塵量大等特點。過濾器包括有隔板過濾器和無隔板過濾器，有隔板過濾器包括：有隔板過濾器，耐高溫過濾器，耐高濕過濾器，無隔板過濾器包括組合式組合式過濾器，無隔板過濾器，液槽無隔板過濾器，超低阻無隔板過濾器，刀架式無隔板過濾器，超過濾器0.1um過濾效率。2、過濾器是在末端送風處，設計選用過濾器時，應由低到高來選用，能起到保護各級過濾器的使用壽命。如：G級過濾→F級過濾→H
2018
06-14

氣相色譜質譜聯用儀分類
氣相色譜質譜聯用儀分類有多種。1、按分析規模可分：小型氣相色譜質譜聯用儀和大型氣相色譜質譜聯用儀。2、按分辨率可分：低分辨氣相色譜質譜聯用儀、中分辨氣相色譜質譜聯用儀和高分辨氣相色譜質譜聯用儀。3、按質量分析器的時空屬性可分：時間型氣相色譜質譜聯用儀和空間型氣相色譜質譜聯用儀。4、按質量分析器的工作原理可分：氣相色譜四極桿質譜聯用儀、氣相色譜離子阱質譜聯用儀、氣相色譜飛行時間質譜聯用儀和氣相色譜傅里葉變換質譜聯用儀等。5、按用途可分：生物氣相色譜質譜聯用儀、制藥氣相色譜質譜聯用儀、化工氣相色譜質
2018
06-14

淺談四極桿氣相色譜質譜聯用儀的操作維護及保養
年來,隨著食品中農藥殘留檢測技術的發展,氣相色譜質譜聯用儀被廣泛使用,大多數使用者都能夠熟練操作儀器,但對于使用中應特別注意的一些問題、儀器的日常維護及如何進行期間核查,國內外尚缺乏文章進行詳細系統的介紹。而分析數據的準確可靠,儀器狀態是一個非常重要的影響因素,正確的使用及維護保養不僅可以確保儀器的良好狀態,還可以延長儀器和易耗件的使用壽命。本文作者根據多年儀器操作經驗,以FinnigantraceGCUltra、traceDSQ四極桿氣相色譜質譜聯用儀為例,從載氣系統、質譜真空系統、進樣系統、
2018
06-14

液相色譜之反相液相色譜
反相色譜（reversedphascchromatography,RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在液相色譜中這是應用面廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色譜條件下，流動相多采用酸性的、低離子強度的水溶液，并加一定比例的能與水互溶的異丙醇、乙腈或甲醇等有機改性劑，大量使用的填料為孔徑在30納米以上的硅膠烷基鍵合相，除此之外，也有少量高聚物微球。實驗表明，烷基鏈長對蛋白質
2018
06-13

藥物靶點開發與驗證淺談
相對于未知的藥物靶點來說，已知的藥物靶點只不過是冰山一角。如何能在眾多的未知里發現并找到有效的藥物靶點？靶點的選擇在整個藥物研發過程中起著至關重要的作用。現代藥物研究中，新靶點的建立往往是新藥創新的前提和保障。隨著現代分子生物學技術的發展和人類基因組計劃的完成，出現了大量可供治療干預的新型分子靶點，但并不是所有的靶點都能夠成為與疾病有關的有效靶點，因此對新型靶點進行開發和驗證便成為非常重要的工作。據統計，除抗感染、抗病毒和抗寄生蟲類藥物以外，制藥工業用來作為藥物靶向篩選的靶標已有417種，包括受
2018
06-13

中藥活性篩選與活性追蹤實驗
DPPH法實驗方法原理DPPH(2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基，2,2-diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl)是一種比較穩定的脂性自由基，其N上有一個游離電子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm處有大的吸收峰。加入抗氧化劑以后，DPPH捕捉一個電子與游離電子配對，紫色褪去，變為無色物質，在517nm處的吸收消失，其褪色程度與其接受的電子數成定量關系。依此原理用分光光度計檢測DPPH自由基與試樣液反應后吸光值的變化，可檢定試樣提供氫原子、清除自由基抗氧
2018
06-12

探究磁珠法蛋白純化失敗的真相
磁珠法蛋白純化越來越受到很多科研小伙伴的青睞，使用磁珠純化方法比填料柱方法操作更加便捷、磁珠的載量更高、獲取的蛋白純度更高。在磁珠法蛋白純化被逐漸接受的同時，有的用戶由于剛接觸磁珠法蛋白純化，對于磁珠法的原理、性能不熟悉，導致純化過程中遇到些問題，今天小編就用戶使用磁珠過程中經常遇到的問題，科普一番，開啟我們探究磁珠法蛋白純化失敗的真相之旅！His-tag蛋白純化磁珠原理His-tag蛋白純化磁珠是在瓊脂糖微球的內部填充磁性內核，在表面固定金屬離子Ni2+或Co2+，Ni2+或Co2+可以和蛋白
2018
06-12

PCR標準反應體系及反應條件
標準的PCR反應體系：10×擴增緩沖液10ul4種dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.1～2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加雙或三蒸水至100ulPCR反應五要素：參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
2018
06-11

關于加熱型磁力攪拌器加熱問題的探討
加熱型磁力攪拌器主要應用于化學合成、分析化學和生命科學領域。對于加熱功能，客戶往往比較關注的加熱速度、控制溫度過沖和維持溫度穩定性的能力，但加熱速度和控制溫度過沖是一對不可調和的矛盾，尤其是在開放的環境中針對不同介質、不同體積的應用，這對矛盾顯得更加難以平衡。為了能夠適應更多客戶不同應用的需求，的該類產品生產商都采用了類似的折中的控制方法------允許*次達到目標溫度時有一定程度的溫度過沖，之后不再允許有任何大幅度溫度過沖，并且盡快形成只在目標溫度附近非常小的震蕩（如圖1所示），這也必然導致了
2018
06-11

移液器使用小常識
1．使用合適的吸頭為確保更好的準確性和精度，建議移液量在吸頭的35％-100％量程范圍內。2．吸頭的安裝對于大多數移液器，特別是多道移液器，安裝吸頭并非易事：為追求良好的密封性，需要將移液套柄插入吸頭后，左右轉動或前后搖動用力上緊。也有人會用移液器反復撞擊吸頭來上緊，但這樣操作會導致吸頭變形而影響精度，嚴重的則會損壞移液器，所以應當避免出現這樣的操作。3．吸頭浸入角度和深度吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內，保持豎直為佳；吸頭浸入深度建議如下所示：移液器規格吸頭浸入深度2µL和10µL1mm20µ

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