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上海遠慕生物科技有限公司
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DNA電泳條帶怎么分析?遠慕幫您解答2022/01/13
一、微笑形區帶(兩邊翹起,中間凹下):形成原因:主要是由凝膠中間部分凝固不均勻引起的,多出現于較厚的凝膠中。處理辦法:待其充分凝固再做實驗。二、皺眉形區帶(兩邊向下,中間鼓起):形成原因:主要出現在蛋白質垂直電泳槽中,一般是由兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈引起的。處理辦法:可在兩板之間加入適量緩沖液,以排除氣泡。三、區帶拖尾:形成原因:主要是由樣品溶解效果不佳或分離膠濃度過大引起的。處理辦法:加樣前離心;選擇適當的樣品緩沖液,加適量樣品促溶劑;電泳緩沖液放置時間過長,重新配制;降低凝膠濃度。四
質粒提取鑒定及保存看這篇就夠了!2022/01/13
(1)質粒的提取(Tiangen質粒提取試劑盒):a)挑菌:選取培養板中大小中等的單個菌落,消毒牙簽接種到10ml搖菌管中,其中含有卡那霉素的LB約5ml,37°C,220rpm恒溫搖床中震蕩培養過夜。b)取上述2.0ml培養液,于常溫下12000rpm離心1分鐘,棄上清,干燥沉淀。c)加入250ul溶液P1(配有去RNA酶,4°C保存),渦旋振蕩,*懸浮細菌,不能留有沉淀,否則會影響裂解。d)加入250ul溶液P2,快速上下顛倒8次,常溫靜置3分鐘,可見混合液逐漸變清、粘稠,表示已充分裂解。e
細胞被支原體污染了會有哪些表現?2022/01/12
細胞培養被支原體污染是個世界性問題,在細胞培養中支原體感染發生率達到63%。支原體是一類無細胞壁,形態呈高度多形性,為圓形、絲狀或梨形,其直徑僅有0.13~0.18μm,變形能力大,故能通過濾菌器,最tu出的結構特征是沒有細胞壁,對作用于細胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明,支原體能耗盡營養物,促進代謝積累,導致pH改變,對細胞造成多種影響,包括生長狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細胞存活等多方面的改變,繼而干擾實驗結果,或造成無法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細胞幾乎是不可能的。那如何
細胞培養前的需做哪些準備工作?2022/01/11
細胞培養技術是生物技術中最核心基礎的技術。所以這也是每個科研技術人員必須會的一項技能!那么在培養細胞實驗之前您知道需要做哪些準備工作么?今天為大家整理了一些相關資料,下面分享給大家!實驗人員的無菌準備:1.肥皂洗手。2.穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋3.用75%酒精棉球擦凈雙手。無菌操作的演示:1.凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面2.靠近酒精燈火焰操作。3.器皿使用前必須過火滅菌4.繼續使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時
常做微生物實驗這些注意事項要謹記!2022/01/11
一、無菌操作要求1.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。2.進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩沖間,工作前經紫外線消毒后使用。3.接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球將手擦干凈。4.進行接種所用的吸管,平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。5.從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。6.接種樣品、
如何選擇合適的植物培養基2022/01/11
植物組織培養基包括多種成分:無機鹽、維生素、氨基酸、生長調節劑、糖類、瓊脂(或結冷膠)和水。所有這些成分在植物組織培養中至少有1種或多種作用。植物組織培養基中的礦質元素進入植物細胞后用于合成有機分子或作為酶反應中的催化劑。可溶性鹽離子在植物電離分子運輸中作為平衡離子,滲透壓的調節以及維持植物體電化學勢的平衡都起著重要的作用。氮、硫和磷是蛋白質和核酸的組成成分。鎂離子和許多的微量元素是許多酶和細胞器的基本組成部分,因此在多種反應中起著重要的催化作用。鈣離子和硼酸主要存在植物的細胞壁中,尤其是鈣離子
單克隆抗體制備的基本過程2022/01/11
1、抗原提純與動物免疫對抗原的要求是純度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如為細胞抗原,可取1×107個細胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加*福氏佐劑并經充分乳化,如為聚丙烯酰胺電泳純化的抗原,可將抗原所在的電泳條帶切下,研磨后直接用以動物免疫。選擇與所用骨髓瘤細胞同源的BALB/c健康小鼠,鼠齡在8~12周,雌雄不限。為避免小鼠反應而不佳或免疫過程中死亡,可同時免疫3~4只小鼠。免疫過程和方法與多克隆抗血清制備基本相同,因動物、抗原形式、免疫途徑不同而異,以獲得高效價抗體為最終目的。免疫間隔一般2
ph計常用的標準緩沖溶液的配置方法2022/01/10
pH計是實驗室用來測定溶液酸堿度的常用儀器。為了確保測量結果的準確性,pH計需要定期使用標準緩沖溶液進行校準。標準緩沖溶液可提前配置,配置好的溶液一般可保存2~3個月,但有些溶液由于容易變質僅可保存半個月到一個月,若溶液發現有渾濁、發霉或沉淀等現象時,不能繼續使用。為了獲取最準確的校準效果,一般建議有條件的實驗室使用標準緩沖溶液要現配現用。下面為您介紹一下ph計常用的標準緩沖溶液的配置方法:常用的3種標準緩沖溶液:鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4),ph值為4.00;混合磷酸鹽(Na2HPO4)
常用標準溶液的配制和標定介紹2022/01/10
很多人都不太清楚標準溶液的配制和標定標準有哪些,下面小編來為大家科普。標準溶液的配制和標定有兩種標準分別是:SH/T0079《石油產品試驗用試劑溶液配制方法》GB/T601-2002《化學試劑標準滴定溶液的制備》。我們目前采用的是SH/T0079.配制標準溶液應注意一下幾點:標準溶液的配制和標定標準:(1)溶液配制中所用的水,在沒有注明其它要求時,應符合GB6683中三級水規格。所用乙醇是指95%乙醇。(2)標定溶液和配制基準溶液所用試劑為容量分析基準試劑。配制一般溶液所用試劑純度不低于分析純。
標準物質的選擇,請注意這些問題!2022/01/10
標準物質是一種已經確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質或材料,作為分析測量行業中的“量具",在校準測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質或材料特性值和考核分析人員的操作技術水平,以及在生產過程中產品的質量控制等領域起著*的作用。那么標準物質有哪些要注意的問題呢?下面小編來給大家介紹一下。(1)特性量的種類及定值方法:某些標準物質可能只適用某一特定方法或專屬領域的應用,某些標準物質的值有特殊規定,如含結晶水的值,應對證書中該類說明加以注意,防止誤選誤用;(2)特性量水平:標準物質的特性量
標準品對照品為啥總是被混用?2022/01/10
標準品實際上就是大家所說的標準物品,它所充當的角色就是衡量標準,專門用做藥物方面對照品的一種衡量標準,即為含量測定中的標準含量。標準品種類也是多式多樣的,常見的有冶金標準品、化學計量標準品和藥檢標準品等。雖然標準品與對照品有一定的區別,但是標準品或對照品混用的現象是司空見慣的,這就帶來了一定的麻煩。那么,為什么會出現標準品或對照品混用的情況呢?下面小編來給大家簡單分析一下其原因。為什么會出現標準品或對照品混用的情況呢:(1)衛生部提供的對照品使用說明書不夠詳盡,極其關鍵部分并沒有做一個詳盡的介紹
濕熱滅菌的原理以及影響因素2022/01/07
濕熱滅菌的原理:是使微生物的蛋白質及核酸變形導致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂,當氫鍵斷裂時,蛋白質及核酸內部結構被破壞,進而喪失了原有功能。濕熱滅菌法是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進行滅菌的方法。以高溫高壓水蒸氣為介質,由于蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,最終導致微生物的死亡,所以滅菌效率比干熱滅菌法高。濕熱滅菌是應用廣泛的一種滅菌方法,它具有滅菌可靠,操作方便,易于控制和經濟等優點,是藥物制劑生產過程中常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅
水合氯醛透明液操作步驟2022/01/07
產品名稱:水合氯醛透明液規格:10ml/50ml分類:微生物染色儲存條件:4℃,避光,6個月用途:用于植物樣本的透明處理,觀察病葉表面和內部的病菌。又稱水合氯醛飽和溶液或飽和水合氯醛溶液。注意事項:水合氯醛、去離子水組成,有腐蝕性,謹慎操作。使用方法:產品僅用于科研根據實驗具體要求操作,一般Amp在LB中終濃度為50~100μg/ml。可以按照1/1000LB體積加入100mg/mlAmp溶液,如100mlLB中加入100μlAmp100mg/ml。標準溶液的配制1.直接配制法對于純凈的物質(稱
如何制備合格的微生物培養基(超全步驟)2022/01/07
制作微生物培養基是實驗人員bi備的基礎操作之一,那么,你制作的培養合格嗎?在培養基制作的過程中應該注意哪些事項呢?定義培養基是供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。組成一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。分類培養基種類很多,根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基;根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體
怎么倒平板不出錯?遠慕教你倒皿小技巧!2022/01/07
在生物實驗中相信大家都經常要倒平板,細菌培養,分子生物學實驗等等。醫藥企業中倒平板更是家常便飯,環境監測、水監測、微生物檢查等,初學者往往都倒不好,現在總結幾點小技巧供大家參考:一、防止倒皿時的冷凝:1、有經驗的都知道,手心不燙手背燙,這是一個經驗數據,此時的溫度在45度左右,最shi合倒平板。2、如果要連續倒多個皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化(玻璃體的特性)。所以建議此時有個50度的恒溫水浴開著,隨時把裝培養基的三角瓶放進去效果會好不少。二、培養皿中有冷凝
微生物實驗室的菌種鑒定小結2022/01/07
微生物檢驗過程中檢出的微生物應該進行微生物鑒定,雖然藥典里明確了鑒定到什么水平的標準和一些基礎內容操作方法。但是因為實驗室能力有限,很多實驗室要么消極抵抗要么稀里糊涂的要么*委外。其實我們一般微生物實驗室自己還是可以做一些工作,特別是細菌的鑒定。再就是菌種鑒定時,不是直接拿來就鑒定,需要一些預先做一些處理或判斷。現將一些基礎知識進行總結如下:一、相關定義1、生理生化鑒定:根據微生物對各種生理條件(溫度、pH、氧氣、滲透壓)、生化指標(唯1碳氮源、抗生素、酶、鹽堿性)代謝反應進行分析,并將結果轉化
蛋白質的定位與蛋白質裂解液的選擇2022/01/06
蛋白質裂解液的選擇,除了要根據其“產量”,還要看所選擇的一抗是否能識別經變性的蛋白質樣品。一般來說對于不能識別變性的蛋白質樣品的一抗,其蛋白質裂解液都會是不含去污劑或含有較溫和的非離子去污劑的(如:NP-40,TritonX-100)。蛋白質裂解液的配方有很多種,如何選擇合適的蛋白質裂解液是做好免疫印跡的第一步。一些含有SDS(十二烷基硫酸鈉)和強離子去污劑(如:脫氧膽酸鈉)的蛋白質裂解液能從組織或細胞中提取出大量的蛋白質,然而它們卻很容易會使蛋白質變性。這樣,對于一些只能識別非變性的抗原表位的
表面微生物取樣方法了解一下2022/01/06
樣品取樣的要求1)在取樣之前應確認貨、證是否相符。2)取樣過程中應避免與水等環境的不良因素影響,防止樣品被污染。3)取樣用具(如注射器、采血管、試管、探子、鏟子、匙、取樣器、剪子、樣品袋等)必須是經過滅菌的。4)對采集的樣品一般要求隨機取樣。若懷疑最有可能受病原體污染或者帶有bin原體的樣品,可以進行選擇取樣。5)根據樣品種類(如盒裝、袋裝、瓶裝和罐裝),應取完整密封的樣品。如果樣品很大,則需用無菌取樣器取樣;若樣品是粉末,應邊取邊混合;若樣品是液體的,通過振搖即可混勻;若樣品是冷凍的,應保持冷
冷凍干燥和液氮保藏菌種技術分享2022/01/06
冷凍干燥菌種的轉接技術建議用下列方法恢復培養冷凍干燥保藏的菌種。一、安瓶管開封1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。2.用火焰將安瓿管頂端加熱。3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管內,輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀。2.取0.1~0.2ml菌體懸浮液,移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養基上,剩余的菌液,注入適宜的液體培養基內,然后在建議的溫度下培養。3.若未能活化,或
天冷了,請注意控制實驗室溫度!2022/01/06
從實驗室的室內環境來看,能導致急劇溫差和濕度過大的情況幾乎不存在,這樣對溫濕度調節器的短期控制程度要求很高,要從降溫、加熱、加濕和除濕這幾種方式來嚴格控制。與此同時,從外部環境來看,實驗室室內的溫濕度變化會受外部條件的影響,例如地域的氣候特點、白天和黑夜的溫差、各種特殊天氣的影響,產生溫濕度的高低變化。因此,要保證溫濕度的平衡和達到實驗標準,實驗室需要密封隔絕外部環境任何有可能導致室內空氣變化的突發情況,嚴格要求管理人員定時換送新鮮空氣的時機,禁止出現人員的過失對室內環境的污染,對照明設備、精密
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