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TRIZOL提取RNA詳細步驟，助力科研！2023/10/19

Trizol法提取總RNA的原理Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解，從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性，但它不能wan全抑制RNA酶的活性，因此Trizol中還加入了8－羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（即RNA酶）。Trizol試劑不但可用于小量樣品（組織：50-100mg；細胞：5×106），也可用于大量樣品（組織≥1g或細胞≥107），對動物、植物、細菌、血液提取都適用，可同時

什么是核蛋白？核蛋白的提取方法介紹2023/10/19

核蛋白的簡介核蛋白(nucleoprotein)因其最初發現于細胞核中，故稱為核蛋白，它是細胞中的一種結合蛋白質。在細胞核及細胞質中都含有核蛋白。此外，在病毒、染色體和核蛋白體中也含有核蛋白。核蛋自在生物的生長和繁殖過程中有著du特的功能和作用。核蛋白是由帶陽離子性質的堿性蛋白質(如組蛋白和魚精蛋白)和蛋白質輔基(核酸)所構成。組蛋白含有堿性氨基酸(如賴氨酸和精氨酸)，所以具有堿性。其相對分子質量為11000～21000。魚精蛋白存在于某些魚精核蛋白中，由于富含精氨酸，因此也具有堿性。核蛋白的提

培養基移種操作方法2023/10/18

一、斜面培養基移種技術(1)材料瓊脂斜面培養基經分離培養的平板培養物。(2)方法①在瓊脂斜面培養基試管上部標明移種的菌名(或編號)、接種日期、接種者的組別及代號。②左手持長有細菌的平板底，右手持接種環。接種環在火焰上滅菌冷卻后，沾取平板劃線上發育良好的孤立菌落。把平板放回原處，立即用此手取斜面培養基斜持，用右手小指與手掌夾持棉塞，輕輕轉動后撥出棉塞，管口通過火焰滅菌。③將已沾菌的接種環伸入斜面培養基的管底部的凝固水，沿斜面培養基的表面從底向上劃一直線，然后再從底部向上劃連續曲折線；也可不劃直線只

細胞培養之無血清培養基的優勢2023/10/18

顧名思義，無血清培養基（serum-freemedium,SFM）系指不含任何血清成分的合成培養基。近年來，因為細胞治療（celltherapy）的快速發展與生物工業上的制備抗體、病毒抗原或是重組蛋白表達時，細胞培養基中的血清成分復雜，可能會影響制程或是增加不穩定的因素，因此，無血清培養基成為其目標，現今已有許多成熟的產品可供應研究人員做選擇。血清培養基的缺點血清是一種成分極為復雜的混合物，為細胞培養增添了許多不可控制的變因。含有血清的培養基缺點如下：(1)價格昂貴，血清的費用約占細胞培養費用的

瓊脂糖凝膠電泳實驗詳解2023/10/17

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段，其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它制備容易，分離范圍廣，尤其適于分離大片段DNA。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb，利用脈沖電泳，可分離高達10^7bp的DNA片段。操作流程準備干凈的配膠板和電泳槽注意DNA酶污染的儀器可能會降解DNA，造成條帶信號弱、模糊甚**缺失的現象。選擇電泳方法一般的

支原體四種檢測方法了解一下2023/10/17

近日，全國多地醫院出現較多肺炎支原體感染患者，支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型，它既不同于，也不同于病毒，是介于細菌和病毒之間，能在無活細胞的人工培養基上生長繁殖的最小微生物。它廣泛分布于自然界，與人類、動植物的疾病有密切的關系。支原體的種類繁多，造成的危害非常廣泛。目前證明對人體有致病作用的支原體有肺炎支原體、解脲支原體、人型支原體、生殖支原體等幾種，但臨床以肺炎支原體最為常見。肺炎支原體主要以飛沫傳播，引起兒童、青少年呼吸道感染、咽炎、氣管炎、肺炎等。支原體檢測方法：1、支原體的分離培養它

動物細胞培養的培養步驟介紹2023/10/16

動物細胞培養的必需條件在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最chang用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等作為支持物。⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節，不斷維持所需要的氣體條件。動物細胞培養的培養步驟注：所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋

淺談一下細胞因子的基本概念與種類2023/10/16

細胞因子（CK）是由活化免疫細胞和非免疫細胞（如某些基質細胞）合成分泌的能調節細胞生理功能、參與免疫應答和介導炎癥反應等多種生物學效應的小分子多肽或糖蛋白，是不同于免疫球蛋白和補體的又一類免疫分子。根據來源初將活化淋巴細胞產生的細胞因子稱為淋巴因子（LK），將單核-吞噬細胞產生的細胞因子稱為單核因子（MK）。目前根據功能，可將細胞因子粗略分為以下6類：1.白細胞介素白細胞介素（IL）簡稱白介素，初被定義為由白細胞產生，在白細胞間發揮作用的細胞因子。雖然后來發現它們的產生細胞和作用細胞并非局限于白

牛肉膏蛋白胨培養基的制備步驟2023/10/13

稱重：根據培養基配方的比例，將牛肉提取物，蛋白胨和NaCl準確稱入燒杯中。牛肉醬通常用玻璃棒挑出，在小燒杯或觀察杯中稱重，溶于熱水，然后倒入燒杯中。也可以將其放在稱量紙上，稱量后直接放入水中。此時，如果將其稍加加熱，牛肉糊將與稱量紙分離，然后立即將紙頁移開。蛋白胨吸濕性強，稱重時移動迅速。另外，在混合藥物時，應嚴格防止藥物混合。羊角面包用于一種藥物，或在服用一種藥物后，將其洗滌并干燥，然后稱重另一種藥物。不要在瓶子上蓋錯蓋子。融化：在上述燒杯中，可以先添加少于所需量的水，用玻璃棒充分攪拌，然后在

實驗室常用多種緩沖液配置方案2023/10/13

1、1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)組份濃度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.稱量121.1gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分攪拌溶解。3.按下表量加入濃鹽酸調節所需要的pH值。PH值濃HCl7.4約70ml7.6約60ml8.0約42ml4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。2、10×

微生物常用染色法及染色制備介紹2023/10/12

微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。酸性物質對于堿性染料較易吸附，且吸附作用穩固；同樣，堿性物質對酸性染料較易于吸附。如酸性物質細胞核對于堿性染料就有化學親和力，易于吸附。但是，要使酸性物質染上酸性材料，必須把它們的物理形式加以改變（如改變pH值），才利于吸附作用的發生。相反，堿性物質（如細胞質）通常僅能染上酸性染料，若把它們變為適宜的物理形式，也同

細胞培養中常見的真菌污染源分析2023/10/12

培養基變渾濁的原因可能有如下幾點：1、細胞存在污染，污染早期可以見到細胞生長；2、不排除傳代時細胞密度過大，或者操作不當導致多數細胞不貼壁，大量細胞漂浮。3、細胞破碎。細胞培養中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培養中污染的特點如下：1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.2、支原體：黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會

通用型抗體稀釋液使用說明書2023/10/11

產品描述：適合于稀釋所有免疫抗體測定（Immunofluorescence,IHC,ELISA,WB）實驗中的抗體。該試劑可用于一抗或二抗的稀釋和配制，在4℃保存和使用不少于六個月；稀釋液中加入了多種抗體結合反應增強劑及穩定劑，增強免疫反應，減少非特異性結合，獲得更佳的效果，可反復使用，節約寶貴的抗體。試劑中不含有動物源的蛋白、磷酸鹽、疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑，適合于所有類型抗體稀釋，包括HRP，AP標記的抗體。產品優勢：沒有疊氮鈉等劇毒防腐劑，使用醫療級別防腐劑；含免疫增強劑和穩定劑，背景更加干

PAS糖原染色常見問題及解決方案2023/10/11

PAS糖原染色實驗簡介與原理1.實驗簡介PAS糖原染色實驗是通過特殊的化學反應使細胞和組織中的糖原與染料結合，形成紫紅色或洋紅色的顏色，從而可視化糖原的分布和定量。PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。2.實驗原理糖原染色是病理學中常規的染色方法之一，氧化劑能氧化糖類及有關物質中的1，2-乙二醇基，使之變為二醛，醛與Schiff試劑能結合成一種品紅化合物，產生紫紅色。PAS技術常用來顯示糖原和其他多糖，該染色液不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物

BCA法測蛋白濃度有誤差的原因找到了！2023/10/10

BCA法是衡量蛋白質濃度的一種方法，但是在實際操作中可能會產生多種誤差。1.操作誤差：不正確的試劑使用、不正確的攪拌、沉淀殘留以及操作的時間和溫度等因素都可能影響測量結果的準確性。2.反應性差異：不同的蛋白質對BCA試劑的反應性可能存在差異，這可能會導致一些蛋白質表現出較低的吸收值，從而導致偏差。3.干擾物質：某些抗生素、膽固醇、紅細胞裂解物等物質都可能對測量結果造成干擾，從而導致測量誤差。4.蛋白質分子構象：蛋白質的空間構象可能會影響BCA試劑的反應性，從而導致測量誤差。5.其他因素：例如樣品

溶液稀釋倍數計算方法說明2023/10/10

稀釋倍數=原液濃度/（原液濃度×移取體積/定容體積）。如1mol/L稀釋一倍就是0.5mol/L，10%稀釋一倍就是5%稀釋是指對現有溶液加入更多溶劑而使其濃度減小的過程。在稀釋后溶液的濃度減小，但溶質的總量不變。稀釋前溶液濃度除以稀釋后的溶液濃度所得的商。溶液是由一種或幾種物質分散到另一種物質里，組成的均一、穩定的混合物，被分散的物質(溶質)以分子或更小的質點分散于另一物質(溶劑)中。物質在常溫時有固體、液體和氣體三種狀態。因此溶液也有三種狀態，大氣本身就是一種氣體溶液，固體溶液混合物常稱固溶

實驗室液體藥品的取用注意事項2023/10/09

1、取用不定量(較多)液體——直接傾倒a.瓶塞必須倒放在桌面上【防止藥品腐蝕實驗臺或污染藥品】；b.直接傾倒時瓶口必須緊挨試管口，試管45度，并且緩緩地倒【防止藥液損失】；c.貼標簽的一面必須朝向手心處【防止藥液灑出腐蝕標簽】；d.倒完液體后，要立即蓋緊瓶塞，并把瓶子放回原處，標簽朝向外面【防止藥品潮解、變質】。2、取用少量的液體—使用膠頭滴管a.應在容器的正上方垂直滴入；膠頭滴管不要接觸容器壁【防止沾污試管或污染試劑】；b.取液后的滴管，應保持橡膠膠帽在上，不要平放或倒置【防止液體倒流，沾污試

化學實驗室的常用器材介紹2023/10/09

1、鐵架臺：用于固定和支持各種儀器，一般常用于過濾、加熱等實驗操作2、燒杯：①溶解固體物質、配制溶液，以及溶液的稀釋、濃縮②也可用做較大量的物質間的反應3、量筒：量度液體體積4、集氣瓶：用于收集或貯存少量氣體，也可用作部分反應的反應容器5、試管：①少量試劑的反應容器②也可用做收集少量氣體的容器③或用于裝置成小型氣體的發生器6、試管夾：用于夾持試管7、玻璃棒：用于攪拌、過濾或轉移液體8、酒精燈：用于加熱9、膠頭滴管：膠頭滴管用于吸取和滴加少量液體10、滴瓶：滴瓶用于盛放液體藥品11、廣口瓶：（內壁

標準溶液配制和標定方法簡介2023/10/08

標準溶液就是已確定其主體物質濃度或其他量值的溶液。不同的情況需使用不同的標準溶液，可千萬別一概而論。直接配制法基準物→干燥處理→分析天平稱量→溶于純水→轉入容量瓶（已校正）→純水稀釋至刻度→搖勻。標定法標定：①非基準物質先配置成近似（略高）所需濃度溶液；②再用基準物質測定其準確濃度，這一操作稱為標定。三種方法：包括直接滴定法、間接滴定法、比較法。能用于直接配制或標定標準滴定溶液的物質，稱為基準物質。基準物質必須符合下列要求：①物質必須具有足夠的純度，其純度要求達到99.9%以上；而雜質含量應低于

樣品檢測全流程管理，科研人進來學習！2023/10/08

對檢測樣品的接收、流轉、貯存、處置以及檢測樣品的識別等各個環節實施有效的質量控制至關重要。管理檢測樣品可以確保檢測樣品的代表性、有效性和完整性，從而保證檢測結果的準確度。一.管理檢測樣品需做到這8個方面1.樣品的采集：樣品應具有代表性。以樣品的結果說明總體的情況，對總體作出結論。采樣遵循如下原則：1.1代表性：采樣時應特別注意克服和消除各種因素的影響，使樣品最大限度地接近總體情況，保證樣品對總體有充分的代表性。1.2可獲性：某些情況下，樣品可能不具備代表性，而是由其可獲性所決定。1.3公證性：采