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2023
04-20

多重熒光免疫組化Q&A（第一彈）
Q1：我想要進行多色實驗，對于我的樣本有什么要求嗎？A1：您按照免疫組化的標準對您的樣本進行前處理即可。如果是從歷史切片或者蠟塊中挑選用來做多色，請盡量選取相對較新的樣本（一個月內），最長不要選保存超過半年的樣本，可能會有靶點缺失或者強非特異性，導致染色效果欠佳。附上石蠟切片樣本處理推薦：1）取新鮮組織（理想的取材厚度是0.2cm~0.3cm），如取的組織過大，需要切小后再做固定，以免組織太厚固定液滲透不良，導致后續染色效果不佳；2）組織離體后（不要超過30分鐘）迅速轉移到固定液中（一般選用10
2023
04-19

重磅！mRNA療法有望治療由基因突變引起的男性不育癥！
2023年2月8日，俄亥俄州立大學董一州團隊在AdvancedScience發表了一篇LNP成功遞送saRNA至精母細胞治療小鼠不育的文章“Cholesterol-Amino-Phosphate(CAP)DerivedLipidNanoparticlesforDeliveryofSelf-AmplifyingRNAａndRestorationofSpermatogenesisinInfertileMice”。基因突變引起的男性不育癥是不育癥的重要類型。目前，臨床上還沒有可靠的方法來解決這種醫療需
2023
04-18

重大突破！壽命增加20%，“逆轉”衰老不是夢？
俗話說歲月不饒人，衰老是每個人不得不面對的現實。但是，隨著科學技術的不斷發展，研究者正在探尋衰老的原因和機制，以期延緩衰老，甚至有可能逆轉衰老。2023年4月12日，德國科隆大學CédricDebès等在國際期刊nature上發表題為“Ageing-associatedchangesintranscriptionalelongationinfluencelongevity”的研究論文，該研究分析了線蟲、果蠅、小鼠、大鼠和人類的轉錄過程中與衰老相關的全基因組變化。研究發現這五個物種中，RNA聚合酶
2023
04-18

類器官培養常見問題匯總
Q1：類器官和腫瘤球有什么區別？A1：類器官中多種不同類型的細胞，可以在體外自我分化自我組裝，具有干性可以進行傳代；腫瘤球只有單一細胞。Q2：如何避免原代培養中的污染問題？A2：動物源性的樣本一般比人源的更容易污染，尤其是一些胃腸、泌尿系統，培養過程可以添加一些慶大霉素或者抗生素。Q3：藥篩常用的指標有哪些？A3：一般IC50用的比較多。Q4：為什么類器官不會缺少營養？是因為長在基質膠里嗎？A4：因為類器官中有多種細胞類型，并且是一個腔狀的結構，所以不會吸收不到營養。Q5：組織來源的類器官和ip
2023
04-14

螢火蟲的妙用
夏夜，一切都顯得朦朧、幽暗，似乎連空氣都變得清馥馥的。在豆棚架邊、在林下水邊、在籬前的草叢里，流螢飛起來了，三三兩兩，忽前忽后，時高時低，那么輕悄、飄忽，好像一些看不見的小精靈提著綠幽幽的燈籠，飛來飛去，那美妙的形象和色彩，著實迷人-------這些描寫螢火蟲的景象是否勾起了大家對于童年夏夜的美好回憶？螢火蟲發光的過程，簡單來說，是螢光素（luciferin）在螢火蟲螢光素酶的催化下發生的一系列復雜化學反應，而光即是這個過程中所釋放的能量。這一反應非常節省能量，幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光
2023
04-13

呼吸爆發檢測試劑盒的原理及操作方法
呼吸爆發（respiratoryburst）是指在激活的髓系細胞，如中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞等，受到刺激后大量釋放以氧化細胞代謝產生過程中的超氧陰離子等活性物質，從而維護機體抵御外界侵略因素的能力。而呼吸爆發檢測則是評估和監測機體免疫、炎癥和感染狀態的一種方法。現代科技的發展使得呼吸爆發檢測可以通過檢測試劑盒快速、準確地完成。呼吸爆發檢測試劑盒廣泛應用于臨床、研究和實驗室等領域，用于以下方面的檢測：1.免疫缺陷病變的早期發現2.炎癥反應的評估3.感染狀態的檢測4.尋找急性肥厚性髓樣細胞白血
2023
04-13

鼠尾膠原—細胞的松軟“席夢思”
膠原蛋白是結締組織和內臟器官細胞外基質的主要構造成分，在皮膚、肌腱、骨骼中分布最為廣泛。從遺傳和結構上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen,TypeI）是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體（圖1），在37℃，中性pH下自發形成三螺旋骨架，是一種優秀的細胞培養用基質，廣泛用于肝細胞、成纖維細胞、脊神經節、肌肉細胞、施萬細胞、胚肺細胞、上皮細胞和其他大量細胞系。還能用于研究細胞生長、分化、遷移以及發育過程中的組織形態發生。圖1膠原蛋白I分子模型鼠尾膠原蛋白I是根據Birkedal
2023
04-11

雙螢光素酶報告基因專題
報告基因是一類使表達產物易于被檢測的基因，其作用原理是將報告基因的編碼序列及其表達調控序列與目的基因融合形成嵌合基因，在調控序列的作用下進行表達，通過對報告基因表達產物的檢測來評價目的基因的表達狀況。常見的報告基因包括螢光素酶（Luciferase）、氯霉素乙酰轉移酶（CAT）、β-半乳糖苷酶（β-gal）、分泌性人胎盤堿性磷酸酶（SEAP）和綠色熒光蛋白（GFP）等。螢光素酶（Luciferase）是一類在生物體內能夠催化熒光素或脂肪醛氧化發光的酶，從自然界能夠發光的生物體內分離獲得。由于特異
2023
04-10

Caco-2細胞培養攻略
Caco-2細胞分離自一名72歲男性的直腸原位癌細胞，當長到滿時表現出特征性的腸上皮細胞分化。因此，Caco-2細胞模型是十幾年來國外廣泛采用的一種研究藥物小腸吸收的體外模型，具有相對簡單、重復性較好、應用范圍較廣的特點。表1Caco-2細胞基本信息名稱Caco-2（人結直腸腺癌細胞）形態上皮樣生長特性貼壁營養體系79%MEM基礎培養基（abs9503）+20%胎牛血清優級（abs972）+1%雙抗（abs9244）圖1Caco-2（人結直腸腺癌細胞）首先，我們要討論的第一個問題是如何判斷細胞狀
2023
04-07

國自然熱點課題 | 外泌體與血管生成研究攻略
自2013年“細胞囊泡運輸調節機制”獲得諾貝爾生理或醫學獎后，外泌體作為細胞外囊泡之一，逐步成為國內外科研人員的研究熱點！已有文獻報道，不同來源的外泌體在不同缺血疾病模型中可修復血管損傷、促進血管新生，從而延緩血管生成障礙疾病的病理進程，同時在疾病病發及預后方面也發揮重要作用，具有很好的臨床應用前景。一、什么是外泌體？外泌體（Exosomes）是納米級的細胞外微小囊泡，可由包括腫瘤細胞、巨噬細胞、神經元細胞、內皮祖細胞、樹突狀細胞、骨髓間充質干細胞等幾乎所有細胞分泌。同時，外泌體幾乎存在于所有的
2023
04-06

多色文獻解讀：肝膽多同病——膽汁淤積型肝炎
古語有云“肝膽相照，榮辱與共”，而在生物體中，肝和膽也是一對“榮辱與共”的器官，兩器官位置相鄰，任何一者出現問題，另一者往往不能幸免。在消化系統中，肝主疏泄，分泌膽汁；而膽附于肝，作用則為貯藏、排泄膽汁，當膽汁的分泌和排泄出現障礙時，就會導致膽汁淤積癥，對肝細胞及機體造成損傷，疾病進展后期則可能導致肝纖維化、肝硬變和最終的肝功能衰竭。2021年9月柴進教授組在EMBOMolecularMedicine（IF:12.137）期刊上在線發表了題為“AhomozygousR148Wmutationin
2023
04-04

如何校準組化筆？
組化筆是實驗室中常用的一種工具，主要用于將樣品從液態變為固態。它可以將液態時的化學反應快速地轉移到固態中進行，從而保留樣品的組成，并在不同實驗中使用固體樣品進行進一步的化學分析。本文將詳細介紹組化筆的作用、操作步驟以及如何校準。一、組化筆的作用組化筆主要是將一些流動性很低的化學試劑轉化成固態。它可以采用無水氯化鋰將液體蒸發并固定成固態，也可以使用氨水、氫氧化鈉等試劑進行反應。組化筆適用于多種化學反應，包括制備各種硬質和軟質材料、修補及焊接，以及熱成像、定量熱分析等實驗室實驗。二、組化筆的操作步驟
2023
04-03

給您一雙鑒別支原體污染的慧眼
很多小伙伴都疑惑，細胞被支原體污染后的特征是什么？如何鑒別細胞被支原體污染了？今天，我帶大家分享兩個支原體污染的案例，共同探尋一下細胞被支原體污染后的特征。圖1感染支原體的EBTr（牛胚氣管細胞）先來觀察一下被支原體污染的牛胚氣管細胞（圖1），由成纖維樣逐漸變得類上皮樣；質膜鋪展，潰爛；輪廓不清，邊界模糊。再看右圖，細胞處于邊增殖邊凋亡的狀態，漂浮凋亡細胞過多。圖2感染支原體的HT1080（人纖維肉瘤細胞）接下來再觀察一下被支原體污染的人纖維肉瘤細胞HT1080（圖2），由上皮樣逐漸變得類成纖維
2023
03-31

RRID是什么? 怎么獲取？
一、什么是RRID?RRID是研究資源識別碼ResearchResourceIdentifier(RRID)的英文縮寫，是指研究中使用的試劑、抗體、生物模型和計算機軟件都應該采用的標準模式。二、RRID長什么樣？Antibody:RRID:AB_2936086三、所有產品都有RRID碼嗎？不是所有的試劑都存在RRID，因為這個RRID本身是需要別人填寫上去的，然后方便后人查證，所以有可能您的試劑沒有這個RRID。中心數據庫具有開放性，如果數據庫中沒有作者使用的資源，該中心允許建立規范的ID編號，
2023
03-30

牛胰島素有哪些功效
牛胰島素(Insulin)是胰腺內胰島β細胞分泌的一種由α和β雙鏈構成的多肽激素，由51個氨基酸組成，分子量約5800Da。兩條鏈由兩對鏈間二硫鍵連接，另外α鏈自身還含有一對鏈內二硫鍵。胰島素是目前已知的機體內能降低血糖的激素，不僅負責調控細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝入，利用和儲存，而且抑制糖原，蛋白質和脂肪的降解發生。不同物種胰島素功能大體相同，只是氨基酸組成上的差異。牛胰島素主要的作用：1、消炎作用：糖尿病和動脈粥樣硬化同是一種炎癥性疾病，重危患者如急性心肌梗死、腦出血、敗血癥、燒傷等，
2023
03-30

除了常規的酶切連接外，你還了解其他的分子克隆技術嗎？
對于做過分子實驗的小伙伴來說，傳統的分子克隆技術——酶切連接，大家應該都是比較熟悉的，那么對于其他的分子克隆技術類型大家有了解過嗎？根據不同的實驗需求，來選擇不同的分子克隆技術以及產品。本期，小愛帶大家一起來了解下幾種常規的分子克隆技術吧。一、酶切連接酶切連接法屬于經典的分子克隆方法，利用限制性內切酶切割DNA和利用DNA連接酶連接DNA，最后轉化篩選及純化，完成重組基因的大量制備。圖1酶切連接流程成功的酶切和有效的連接是分子克隆實驗圓滿完成的必要條件。限制性內切酶能特異性地結合于能被限制性內切
2023
03-28

“痛到窒息”的子宮內膜異位癥
廣大女生朋友對于痛經一詞應該十分熟悉甚至感同身受，痛經形成的因素有很多，一般就是受涼或者吃了刺激食物所致，熬過頭幾天就好了，但假如非常疼痛甚至到了“呼吸都痛”的地步，就要警惕有可能是子宮內膜異位癥！子宮內膜異位癥（endometriosis，EM）簡單點來說，就是原本應該待在子宮里的內膜跑到了別的地方去。最常見的，比如子宮內膜長到卵巢上，就會變成卵巢巧克力囊腫，或者長到子宮肌層，就會形成子宮腺肌癥。圖1研究表明，EM患者的免疫細胞數量和功能會發生改變，特別是巨噬細胞、中性粒細胞、自然殺傷細胞、T
2023
03-27

細胞培養小分子藥物配制方法解析
科研實驗中我們經常需要配制各種濃度的試劑。例如細胞實驗一般需要加入小分子激動劑/抑制劑；分子轉化實驗一般會加入抗生素；免疫實驗需要加入免疫刺激物/免疫佐劑等。這些昂貴的試劑濃度一旦計算錯誤，不僅挑燈夜戰得來的數據毀于一旦，早日發文的愿望也隨之破滅，可謂一失足成千古恨。今天小愛就為大家解決這一難題，讓我們學會快速換算試劑濃度，擺脫科研失誤。案例一抑制劑儲存液配制我們買來的小分子抑制劑一般是凍干粉，需要把它配制成溶液。首先，我們應該知道藥物的分子量、溶解度以及規格。如果是毫克級小包裝，一般不需要稱量
2023
03-23

脂質封裝編碼的mRNA可選擇性激活擴增調節性T細胞
2022年7月5日，Moderna公司的EricHuang等人在NatureCommunications期刊發表了題為：SelectiveactivationａndexpansionofregulatoryTcellsusinglipidencapsulatedmRNAencodingalong-actingIL-2mutein（使用脂質封裝的編碼長效IL-2突變蛋白的mRNA可選擇性激活和擴增調節性T細胞）的研究論文。圖1調節性T細胞(Treg)在各種人類自身免疫疾病（如系統性紅斑狼瘡、類風濕
2023
03-23

細胞爬片抗原修復液的儲存要注意的事項
細胞爬片抗原修復液是一種用于實驗室細胞學研究中的重要試劑。它的主要作用是將細胞樣本中的抗原損傷修復，以便進一步的免疫染色或其他免疫學實驗。此外，該試劑還可以增強抗原與抗體的結合，提高免疫染色的靈敏度，從而幫助科學家們更好地研究細胞結構和功能。該試劑的原理是通過一系列化學反應，將已經被破壞或損傷的細胞抗原恢復到其原本結構和功能。即通過加入復原液，使原本不能固定的細胞抗原固定下來，使得細胞膜透性增高，某些親水性的細胞內抗原突出也容易易于固定。該試劑需要被存儲在-20°C以下的低溫環境。在儲存時，需要

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