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2023
02-14

情人節，你的細胞實驗找到心儀的激動劑了嗎？
科研汪土味情話篇~~A：“你最近是不是發大文章了？”B：“沒有啊，你聽誰說的？”A：“那為什么你在我心里的影響因子越來越高呢？”A：“你能好好跑電泳嗎？”B：“怎么了？”A：“不要總是跑到我心里來。”A：“師妹，你細胞養得真好呀！”B：“謝謝！”A：“。。。。。。。。。。”（如果你是A，你會怎么答呢？）注：以上來源于網絡言歸正傳篇激動劑（agonist）是指能增強另一種分子活性、促進某種反應的藥物、酶激動劑和激素的一類分子。其與受體有高親和力、高內在活性，能與受體結合產生最大效應[1]。圖1小分
2023
02-13

如何用類器官技術解決藥物篩選問題？
一、目前藥物研發的痛點數據顯示腫瘤新藥開發占全球新藥開發的50%以上，2020年中國腫瘤臨床試驗數量高達722個，但是腫瘤新藥失敗率高達96%。主要原因是：（1）2D細胞/細胞系模型不能真實反應體內情況；（2）動物模型和人的種屬差異，最后一批動物實驗結果與第一批患者臨床試驗結果差別很大；（3）臨床入組病人缺乏靶向，藥物有效率不過關。圖1常規藥物研發思路因此，需要一個能接近人的疾病模型，降低新藥研發的成本和時間。類器官模型來源于人自身，能夠實現在實驗室開展患者臨床試驗，提高研發成功率、縮短研發周期
2023
02-09

SARS-CoV-2抗體檢測，愛必信想你所想
想必在新冠疫情趨勢下，小伙伴們都已經完成了疫苗的接種，那么SARS-CoV-2是如何運行的呢？簡言之就是機體在感染新冠或接種SARS-CoV-2后，會發生免疫應答，并產生抗體來對抗病毒。近日，多地發布建議加強SARS-CoV-2抗體檢測的建議，多位專家形成共識，衛生部門加強對人群抗體水平的持續監測，有利于通過人群的新冠抗體水平對疫情流行趨勢做科學研判。疫情放開給大家一種錯覺，就是身邊感染新冠的人都“消失”了。主要在于現階段感染SARS-CoV-2確實癥狀很輕，很多患者無癥狀，正所謂“不檢測，就不
2023
02-07

組織消化專題——酶的選擇
酶解法作為單細胞懸液制備常用方法之一，通過利用特定酶進行相應的化學反應除掉一些特定結構，適合將小塊組織消化成為單個細胞。膠原酶是單細胞組織消化的重要酶種。膠原酶消化在單細胞樣本制備過程中，是不能缺少的一步。另外，組織解離常見的消化酶還有胰蛋白酶、脫氧核糖核酸酶Ⅰ、透明質酸酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、彈性蛋白酶，不同酶適用于不同的組織類型。一、膠原酶膠原酶（Collagenase）主要水解結締組織中膠原蛋白成分。目前商用膠原酶是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等不同類型，
2023
02-06

IHC專題——抗原修復
在樣本制備的過程中，往往會應用一些試劑（如多聚甲醛、福爾馬林等）對新鮮組織進行處理，這個過程可能導致抗原位點被封閉，為了避免影響后續免疫染色的效果，我們需要先對切片進行抗原修復。對于石蠟切片來說，抗原修復是必須的步驟，常用的方法有酶消化法和熱修復法。1、酶消化法作為最早的抗原修復方法，常用的消化酶有三：胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K。但酶的作用極易受溫度影響，如果消化不足，則無法充分暴露出抗原位點，過度的消化又會破壞組織結構，影響最后陽性信號的判讀，因此在后續的發展中，酶消化法漸漸被熱修復技術所替
2023
02-03

類器官技術或將成為最大“潛力股”？
2023年1月10日，《Science》發文，FDA不再要求新藥研制進行動物實驗。2022年12月底，美國總統簽署法案，新藥無需在動物身上進行測試也可獲得美國食品和藥物管理局(FDA)的批準。對于動物福利組織來說這一轉變無疑是重大的。該法案代替了1983年的規定，要求新藥與化妝品產品開發，皆需進行動物試驗。Drake的團隊和一些非營利性的動物健康組織認為在批準藥物進行人體試驗時，FDA應更多地依靠計算機建模、"器官芯片"和其他在過去10至15年中開發的非動物方法。這一舉措是否給其他技術帶來新的發
2023
01-31

mRNA技術應用——傳染病疫苗
早在30多年前，科學家們就構思出基于mRNA的核酸疫苗，能夠開發出安全和多功能的核酸疫苗。如今隨著mRNA技術的不斷發展，這一愿望終于照進現實，新冠mRNA疫苗開發成功并投入生產，推動了mRNA疫苗在他傳染病領域、癌癥、罕見病等領域的研發進展。2021年8月25日，NatureReviewsDrugDiscovery發表了一篇深度綜述，詳細介紹了mRNA疫苗的技術基礎，以及傳染病mRNA疫苗開發的最近進展和關鍵問題。圖1在這篇綜述中，作者描述了mRNA疫苗的技術基礎，包括mRNA設計和合成，以及
2023
01-29

新冠藥品納醫保，技術路線知多少？
2019年底爆發的SARS-CoV-2，隨著疫情的放開，感染人數激增，尤其是老年患者，新冠口服藥的需求愈發旺盛。根據媒體報道，2023年1月8日，新冠治療藥品阿茲夫定片、清肺排毒顆粒經過談判納入國家醫保目錄，而輝瑞的Paxlovid因報價高談判失敗。為保障新冠用藥，國家醫保局醫藥服務管理司的副司長黃心宇在1月11日的新聞發布會上表示，按現行的新冠藥品報銷政策，Paxlovid仍可臨時報銷至2023年3月31日。當前，全球新冠口服藥的研發分為兩大技術陣營：以輝瑞Paxlovid為代表的3CL蛋白酶
2023
01-29

開工大吉 | miRNA引物狂送不停！
RNA可以通過它是否編碼為蛋白質被分為編碼RNA和非編碼RNA。編碼RNA主要是mRNA，而在非編碼RNA這一塊，我們今天的主角microRNAs（miRNAs）主要屬于非編碼RNA中的短鏈非編碼RNA。miRNA大小長約20-25個核苷酸，由高等真核生物基因組編碼，通過和靶基因mRNA堿基配對引導沉默復合體（RISC）降解mRNA或阻礙其翻譯。圖1RNA的分類雖然第一個miRNA早在1993年被發現，一直到最近幾年這類基因的多樣性和廣泛性才被揭示出來。目前，已有大量的研究結果表明，miRNA在
2023
01-19

SH-SY5Y細胞培養攻略
人神經母細胞瘤細胞（SH-SY5Y）是于1970年建自骨瘤轉移灶的神經母細胞瘤SK-N-SH細胞系經3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞的密度可高達106cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。基本形態上皮樣，多數貼壁，少數懸浮；營養體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）。表1SH-SY5Y細胞基本信息SH-SY5Y（人神經母細胞瘤細胞）形態上皮樣生長特性多數貼壁，少
2023
01-19

多色文獻解讀：病理性神經疼痛調控新機制
病理性神經（neuropathicpain）是由軀體感覺系統的損害或疾病導致的疼痛，患者的臨床癥狀表現為各種各樣的疼痛。它的成因和發病機制都十分復雜，外傷、感染、中毒、腫瘤、神經壓迫、免疫與遺傳等多種病因均可導致神經損傷，發病機制包括外周敏化、中樞敏化、下行抑制系統的失能、脊髓膠質細胞的活化、離子通道的改變等。近日，浙江大學醫學院腦科學與腦醫學學院高志華團隊聯合浙江大學醫學院附屬第一醫院骨科王躍團隊在JCIINSIGHT在線發表題為“mTOR-neuropeptideYsignalingsens
2023
01-18

類器官實操大本營——HE staining
1.實驗材料蘇木精染液、伊紅染液、乙醇、二甲苯、中性樹膠、培養瓶、培養皿、眼科鑷、蓋玻片、載玻片、顯微鏡。2.實驗步驟（1）石蠟切片脫蠟至水依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min；二甲苯Ⅱ10min；無水乙醇Ⅰ5min；無水乙醇Ⅱ5min；95%酒精5min；90%酒精5min；80%酒精5min；70%酒精5min；蒸餾水洗。（2）蘇木素染細胞核切片入Harris蘇木素染3-8min，自來水洗。（3）伊紅染細胞質切片入伊紅染液中染色1-3min，自來水洗。（4）脫水封片將切片依次放入95%酒精I5m
2023
01-18

你做的抗原是怎么出現兩條杠的？需要的原材料有哪些？
自2019年新冠大流行以來，我們用三年的時間習慣了核酸檢測，在國家嚴格高效的防控政策下，居民的生命安全得到了保障，但同時全國經濟也出現了無法避免的停滯，社會層面生活壓力壓力漸大。目前，突變后病毒毒性降低、癥狀漸輕，國家適時調整了疫情防控政策：出行不再落地核酸，不進行全面核酸檢測，不再掃碼。但是，對于廣大民眾來說，防護的壓力反而越來越大了，大部分家庭都面臨著老人及小孩這樣免疫力較弱的成員需要照顧，身邊的感染人群越來越多，不知道身邊誰是陽性。同時春節將近，或出現數以億計的人員流動，感染人數將呈幾何增
2023
01-13

類器官實操大本營之——固定包埋
Q1、類器官收集A收集生長至較大尺寸類器官：96孔板，生長密度較大時，使用移液槍取半孔以上，清洗1至3遍，洗去大部分基質膠，離心沉淀，棄除大部分上清。Q2、瓊脂糖固定槽制備（可一次制備一批，溫密閉保存）A1）稱量0.2至0.4g瓊脂糖，加入至燒杯或者小試劑瓶內；2）加入10mL左右PBS；3）微波爐高火融化，每隔5s暫停打開，觀察，重復數次至瓊脂糖融化；4）取約200uL融化瓊脂糖，加入至600uLEP管內；5）在盛有瓊脂糖的小EP管內插入一小PCR管，使瓊脂糖形成一圓尖底凹槽，室溫或者4℃冰箱
2023
01-13

HUVEC細胞培養攻略
人臍靜脈內皮細胞（HumanUmbilicalVeinEndothelialCells，HUVEC）是臍靜脈的重要構成細胞之一。當進行血管內皮細胞實驗時，通常使用人臍靜脈內皮細胞，而非靜脈內皮細胞或動脈內皮細胞。永生化的HUVEC會通過慢病毒轉染的方式攜帶RFP基因或GFP基因。表1HUVEC細胞基本信息名稱HUVEC（人臍靜脈內皮細胞）形態上皮樣生長特性貼壁接種密度8.0x103-3.0x104viablecells/cm2傳代比率1:2-1:3圖1HUVEC（人臍靜脈內皮細胞）首先要討論的是
2023
01-12

新發現！CDK抑制劑有望被用作抗SARS-CoV-2藥物
SARS-CoV-2感染從2019年底爆發至今仍在全球肆虐，給人類身體健康帶來極大損害。隨著SARS-CoV-2的大規模流行，新的病毒突變株不斷出現（Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron等），其中一些突變株具有更強的感染能力或更強免疫逃逸能力。由于病毒的變異能力強，給現有的疫苗帶來壓力和挑戰。確定SARS-CoV-2RNA復制所必需的關鍵宿主因子有望找到細胞的作用靶標，以開發廣譜抗病藥物。圖片來源于百科星圖2022年12月27日，中國醫學科學院&北京協和醫學院岑山等研究團
2023
01-11

qPCR反應之你問我答
實時定量PCR技術（real-timePCR）也叫qPCR（QuantitavePCR），是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，最后通過特定數學原理對未知模板進行定量分析的方法。它是一項臨床上非常成熟的技術，目前在分子生物學領域，qPCR核酸定量好方法。目前仍在全球肆虐的SARS-CoV-2鑒定的“金標準”——核酸檢測就是通過qPCR原理進行的。圖1qPCR技術原理簡圖（圖片來自henrik'slab）那么拿到一個樣本，需要經過以下多項操作流程才能定量檢測到
2023
01-10

RAW 264.7細胞培養攻略
RAW264.7細胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；在正常培養中，細胞會出現多邊形和不規則形狀，并伴有許多偽足的生成，細胞貼壁能力很強。RAW264.7細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。呈不規則形，貼壁；細胞生長速度快，2-3天即可傳一代；營養體系是DMEM+10%FBS。表1RAW264.7細胞基本信息名稱RAW264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）形態不規則形生長特性貼壁；細胞生長速度快，2-3天即可傳一代營養體系DMEM（abs948
2023
01-06

新冠不是大號流感，警惕肺靜脈栓塞！
2022年的最后一個月，奧密克戎以迅雷不及掩耳之勢席卷了我國各地，來得快走得也快，大多數患者挨過一禮拜就活蹦亂跳，一時之間人人自封大俠——“陽過”、“陽康”。然而，就是這樣看似已經不足為懼的病毒，依舊奪去了許多老弱患者的生命，如果新冠在體質虛弱的人身上，沒有得到有效控制，就容易轉變成重癥。2022年4月，來自瑞典等國家研究機構在頂級醫學期刊BritishMedicalJournal（BMJ）上發表了一項研究稱，感染SARS-CoV-2的人在感染后數月內深靜脈血栓形成和肺栓塞的風險明顯增加。而SA
2023
01-03

植物提取物抗SARS-CoV-2研究進展
植物提取物是以植物為原料，通過物理化學等方式獲取植物中的某一種或多種有效成分所形成的天然產品。其應用領域非常廣泛，包括食品、醫藥、飼料、化妝品等，植物提取物的分類見表1。表1植物提取物分類按照有效成分分類按照形態分類按照有效成分的含量分類按照用途分類多酚植物油有效單體提取物天然色素制品類多糖浸膏標準提取物中藥提取物制品酸粉狀比率提取物提取物制品類萜類晶狀體濃縮制品類甙黃酮生物堿由于天然植物提取物具有較強的生物活性，如免疫調節、抗感染、增強抗氧化能力、抗炎等作用[1]，對其藥用價值的探究也一直受到

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