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杭州仟諾生物科技有限公司

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  • 2019

    12-27

    HyClone液體培養基使用時應注意事項

    HyClone液體培養基在使用過程中應注意以下問題:1、運輸中要避光冷藏,瓶口保持向上,切勿劇烈振蕩。2、HyClone液體培養基開瓶后不要長時間暴露在空氣和強光下,以保持培養基的穩定性。3、開瓶后能在一周內用完,短時間內用不完可分裝冷藏保存,但PH值會在隨后的時間里慢慢變堿,屬于正?,F象,請放心使用。4、所有液體培養基均經100納米無菌過濾和出廠嚴格檢測,除非需要,請不要私自進行二次過濾和任何形式的無菌檢測。
  • 2019

    12-27

    細胞分離技術

    原代細胞的分離和制作人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密,不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖,即使采用1mm3的組織塊,也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長,若需獲取大量細胞,必須將現有的組織塊充分散開,使細胞解離出來,常采用的方法如下:一、懸浮細胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘,若懸液量大,可適當延長離心時間,但速度不能太高,延時也不能太長,以避免擠壓或機械損傷細胞,離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次,用培養基洗
  • 2019

    12-24

    轉染的選購指南

    1、質粒轉染ThermoFisher可提供種類齊全的陽離子脂質轉染試劑,產品性能出眾,可將質粒轉入多種細胞中。2、轉染試劑ThermoFisher可提供種類齊全的陽離子脂質體轉染試劑,產品性能出眾,可用于DNA、Sirna、寡核苷酸和RNA導入。下表列出了一小部分ThermoFisher提供的陽離子脂質體轉染試劑。3、RNAi轉染RNA干擾(rnai)技術在生物學發現和驗證領域掀起了一場革命。通過RNAI技術,可以“關閉”或降低基因表達,從而更好地了解該基因的功能及其在疾病中的作用。高效轉染是進
  • 2019

    12-24

    動物血清的常見問題及處理方法

    動物血清的常見問題及處理方法!近在培養細胞中使用胎牛血清,由于發現有沉淀,不知是否變質,在查閱相關文獻也沒有得到確切的答案.因此不敢再用原來的血清,導致浪費.在這提醒大家做細胞培養時,要注意血清的分裝.血清是細胞培養中重要的元素之一。在實驗室操作中要注意的事項及處理方法如下:1.血清保存:建議血清應保存在-5至-2O。然而,若存放于4時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。2.解凍血清的方法:建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8冰箱使之融解
  • 2019

    12-20

    小牛血清與胎牛血清有何區別?

    小牛血清與胎牛血清之間的區別:這兩種血清的成份,總體沒有什么明顯差別,只是有一些成分與其生存環境有關。此外,因生長發育的需要,有些成分在小牛出生后會發生一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別。有一點可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏
  • 2019

    12-17

    SCI期刊拒稿率高,寫作難,投稿難,那么發表文章應該注意哪些事項?

    SCI期刊拒稿率高,寫作難,投稿難,那么發表文章應該注意哪些事項?1.吸引力的題目,思路清晰的摘要,漂亮的圖大多數審稿人審稿的方法是快速看一下文章題目,摘要和圖,所以這三點一定要吸睛。2.標題要簡潔明確,有力字句要簡明扼要,用詞要準確恰當,多角度考量。3.摘要里不要充斥大量數字不要自以為或急于表達而犯錯,對審稿人而言那些可能都是無足輕重的。4.能用圖盡量用圖表示(包括各種統計圖)圖片可以很直觀的讓審稿人看到你想要表達的內容,有文字和表格代替不了的作用。SCI期刊一般要求圖片為TIFF格式,并存為
  • 2019

    12-16

    購買試劑時應注意事項

    1、購買后,請務必確認標簽上的注意事項。2、做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制。3、必須戴好防護用具,小心翼翼進行操作。4、在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策。5、對沒有標明其危險特性,有害特性的,也要慎重地進行操作。6、對于使用后的廢棄物,不要或舊的試劑,應按照相關法律法規正當處理。7、操作者并非專業技術人員,必須在專業人士的指導監督下進行操作。8、請參照相關法規,文獻,MSDS等信息,理解并掌握好其特性,再進行安全操作。9、通常購買試劑時要想到一次性用完,若估算不足有剩余的
  • 2019

    12-13

    干細胞的分類和不同功能

    細胞(stem-cell)即為起源細胞,是指尚未發育成熟的細胞,它具有多分化潛能和自我復制的功能,在特定條件下,可以分化成不同的功能細胞,形成多種組織和器官。這是繼藥物治療和手術治療后有又一場醫療革命,被稱之為醫學上的奇跡。根據其分化潛能不同,可分為全能干細胞、多能干細胞、單能干細胞。1、全能干細胞:具有自我更新和分化形成任何類型細胞的能力,有形成完整個體的分化潛能,如胚胎干細胞,目前許多研究工作都是以小鼠胚胎干細胞為研究對象展開的,在生產克隆動物、轉基因動物、等方面都有重要意義。國內對于人類胚
  • 2019

    12-12

    澳洲源胎牛血清質量檢定指標

    1、澳洲源胎牛血清內毒素檢測:凝膠法和動態濁度法要求內毒素含量≤10EU/ml。2、化學檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白(≤0.02%)。3、澳洲源胎牛血清微生物檢查:細菌和真菌——直接培養法、噬菌體——噬斑法和增殖法支原體——培養法和DNA染色法、牛病毒——細胞培養法。要求均為陰性。4、促細胞生長測定:(SP2/0-Ag14標準規定)a.大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時克隆率=(陽性孔平均數/培養孔總數)
  • 2019

    12-02

    貼壁/懸浮細胞瞬時轉染-RFect質粒DNA轉染操作步驟和注意事項

    本文以RFectPlasmidDNATransfectionReagent(RFect質粒DNA轉染試劑盒),作為攜帶質粒穿膜的載體物質,具體介紹DNA轉染方法。圖.用本產品4ul轉染1ugpEGFP-C2質粒到293T細胞后,綠色熒光蛋白的表達情況。貼壁/懸浮細胞瞬時轉染-RFect質粒DNA轉染方法步驟:一、貼壁/懸浮細胞瞬時轉染操作流程(以24孔板轉染為例)A.細胞接種:1.轉染前24小時左右對細胞進行轉接,接種密度約為每孔0.3~1×105個細胞;2.過夜培養。B.RFect/DNA復合
  • 2019

    11-23

    細胞培養中如何防止黑點生成,如果生產如何處理!

    1、盡可能地減少血清凍融次數。2、培養基無需37℃水浴。3、培養基保持PH值7.0-7.2。4、嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。5、掌握細胞傳代的時機,細胞切勿生長過老。6、一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁。7、然后,在鏡下觀察細胞培養生長的狀態,黑點是否游動。8、如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。9、如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:1)細胞生長過
  • 2019

    11-22

    細胞轉染:脂質體轉染的幾個實驗方法

    實驗原理脂質體(LR)試劑是陽離子脂質體DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前條件下方面的轉染方法之一。轉染率高,優于磷酸鈣法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA轉染到各種細胞。用LR進行轉染時,首先需要優化轉染條件,應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等,對每批LR都要做。先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間,DNA可從1-5ug和孵育時間6h,開始,按這兩個參數繪出相應LR需用量的曲線,再選用L
  • 2019

    11-21

    細胞計數與存活測試實驗介紹

    實驗材料0.4%w/vtrypanblue(GibcoBRL15250-061)Erythosinbluishstain取0.1gramErythrosinbluish(SigmaE-9259)及0.05grampreservativemethylparaben(SigmaH-3647)溶于100mlCa/Mgfreesaline血球計數盤及蓋玻片(Hemocytometerandcoverslip)計數器(counter)低倍倒立顯微鏡粒子計數器(Coultercounter,CoulterE
  • 2019

    11-20

    細胞轉染實驗介紹

    一、實驗目的學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖,它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入;磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞;病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染
  • 2019

    11-19

    細胞株與細胞系的區別介紹

    一、細胞株細胞株(CellStrain):也就是說,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系(cellline),由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限,可稱為有限細胞系(finitecellline),如可以連續培養,則稱為連續細胞系(continuouscellline),培養50代以上并無限培養下去。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物
  • 2019

    11-18

    IPS細胞操作方法

    操作規程一、復蘇1、事先用Matrix進行培養皿/板的包被處理。平時Matrix保存在-20℃,使用之前放在4℃冰箱或冰上進行解凍。待Matrix解凍后,按1:100的比例迅速用PBS液體稀釋。按6孔板每孔加1ml,150px皿加2ml,250px皿加3ml的量加入,加入后迅速搖動皿/板,使加入的Matrix*覆蓋整個皿底。放到37℃培養箱中4小時,使用前去掉包被液(如果暫時不使用,用封口膜密封,在4℃冰箱能保存一周)。2、復蘇前準備iCell解凍*培養基(iCell解凍液基礎培養基以及iCel
  • 2019

    11-12

    體外細胞原代培養和傳代培養實驗步驟(1)凍存和復蘇

    一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行培養為原代培養;當原代培養的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養,即將培養的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養,為傳代培養,傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或DMSO作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰
  • 2019

    11-11

    小鼠子宮頸癌細胞胞培養步驟說明

    小鼠子宮頸癌細胞胞培養步驟培養基及培養凍存條件準備1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37C,培并箱濕度為709%-80%。凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存有1mlL細抱縣液的凍存管迅速放入37C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖売解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹
  • 2019

    11-09

    如何操作可避免血清中產生沉淀!

    按以下操作可避免血清沉淀的產生:1、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。2、血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。3、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。4、勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。5、勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。6、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并
  • 2019

    11-08

    大鼠原代細胞分離與培養

    一、大鼠神經元細胞(酶消化法)簡述:新生24h或E18胎鼠,取腦,剝離海馬,剪碎,木瓜酶消化,清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。二、大鼠雪旺細胞(植塊法)簡述:新生24h大鼠,取坐骨神經,剝去外膜和束膜,剪成1mm3的小塊,均勻鋪于培養皿內,加少量血清,37℃CO2培養2h后,再加入培養基,24-48h后有細胞爬出。三、大鼠胰島(酶消化加密度梯度離心)簡述:SD大鼠,常規麻醉、固定、消毒、進腹、膽總管插管,逆行注入預冷的1mg/ml膠原酶P溶液10ml。迅速取下胰腺,38℃水浴消化10分鐘
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