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細胞培養(yǎng)那點事兒.....2021/11/12

細胞培養(yǎng)做為生物學研究最基礎的技術之一，可以說是滲透科研界的方方面面。工欲善其事，必先利其器。細胞好不好，就看你懂不懂細胞培養(yǎng)的各種技術了。?原代培養(yǎng)從原代組織中分離細胞的常用的方法是酶解法（胰蛋白酶和膠原酶）。用無菌的解剖刀和剪子將組織剪成3~4mm小片，用平衡液（無鈣鎂離子）清洗組織碎片后去除上清液，并加入0.25%的胰蛋白酶（Trypsin，100mg組織加入1ml胰蛋白酶）或者膠原酶（Collagenase，50~200單位/ml），孵育4-18h。離心取上清后，用平衡液清洗幾次后，用*

細胞培養(yǎng)問題----沉淀2021/11/11

細胞培養(yǎng)問題----沉淀當排除了污染后，細胞培養(yǎng)基的渾濁通常可以解釋為金屬、蛋白質(zhì)和其他培養(yǎng)基成分的沉淀。沉淀物可能對細胞健康有害，因為他們可能通過整合作用等過程去除營養(yǎng)物質(zhì)和其他需要的成分，從而改變培養(yǎng)基成分。沉淀的原因溫度變化溫度是細胞培養(yǎng)中沉淀的主要原因之一。當暴露于端溫度變化時，高分子量的血漿蛋白會從溶液中沉降。熱失活和凍融循環(huán)會促進蛋白質(zhì)的變性和沉淀。由于液體或復溶培養(yǎng)基在每次使用之間保持冷藏狀態(tài)，鹽可能會沉淀出來，特別是10倍或其他濃縮液中析出。失水引起的濃度變化如果培養(yǎng)基存在蒸發(fā)，

細胞培養(yǎng)及操作步驟2021/11/10

一、原代培養(yǎng)及其操作步驟原代分離細胞培養(yǎng)是指從供體內(nèi)取出組織后，經(jīng)機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群，使之在體外模擬人體生理環(huán)境，在無菌、適當溫度和一定的營養(yǎng)條件下，生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分，生長緩慢，但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養(yǎng)做各種實驗，如藥物測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。其操作步驟如下。1.剪切組織先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所

27個細胞傳代培養(yǎng)常見問題2021/11/09

1、一般拿到細胞后，應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。2、何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。3、細胞何時進行傳代較好?一般情況下細胞生長至*匯合后就應該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說

細胞生長不良常見原因及解決方案2021/11/08

細胞生長不良常見原因及解決方案儲存物解凍后無活細胞或活細胞少原因解決方案儲存培養(yǎng)物質(zhì)量不佳確保正確識別了用于儲存的起始培養(yǎng)物，該培養(yǎng)物是健康的，無微生物污染的，并且處于生長的對數(shù)階段后期（80-90%匯合度）儲存物冷凍不當在液氮中冷凍細胞時2，請確保細胞、培養(yǎng)基和其他實際的濃度以及冷凍方案遵循供應商的建議。通常，應以每分鐘約1至3℃的速度緩慢凍結(jié)，以大程度地減少冰晶的形成。為細胞選擇最合適的冷凍保護劑。如果使用甘油，請勿將其儲存在光線下，因為光照會使甘油轉(zhuǎn)化為具有細胞毒性的烯醛。儲存物保存不當存

細胞生長緩慢的原因分析2021/11/04

轉(zhuǎn)載：細胞生長緩慢的原因分析：一.個別人的培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題1.檢查你所培養(yǎng)的細胞是否存在污染。(a)如果培養(yǎng)細胞未添加抗生素(必須添加!),細胞污染則是不可避免的。1)用肉眼和顯微鏡進行檢查2)如果細胞被污染則要棄掉。(b)由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測(c)檢測可能污染的途徑和原因2.檢查你用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基和血清(例如:是否批次不同或廠商不同)。如果你常規(guī)使用的是粉劑或10X儲存液，而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1X液體，而隨后證明問題就出自于此，處理方法請參見下則分享內(nèi)容。3.如

培養(yǎng)RAW264.7細胞常見問題及原因分析2021/11/02

在日常培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)RAW264.7細胞容易出現(xiàn)的問題主要為以下幾種：1.復蘇不易成功2.細胞形態(tài)變異明顯3.消化困難4.細胞生長緩慢，當你的細胞培養(yǎng)遇到上述瓶頸，不妨試一試以下幾種解決辦法。1、復蘇難以成功原因：RAW264.7對空間十分敏感，復蘇密度太高，細胞增殖太快，加劇細胞營養(yǎng)缺失，加速細胞老化。解決辦法：T75培養(yǎng)瓶復蘇細胞數(shù)量控制在104~1052、細胞變異明顯原因：細胞吞噬抗原過多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會促使該細胞呈現(xiàn)梭形、長梭形解決辦法：改善細胞培養(yǎng)環(huán)境，例如與細胞接觸的玻璃器皿均高溫

對于無外泌體血清你真的了解嗎？2021/09/16

胎牛血清(FBS)是大多數(shù)細胞培養(yǎng)的重要生長支持物，來自天然來源的FBS將包含大量囊泡，例如外泌體。由于FBS的外分泌經(jīng)驗對研究結(jié)果有很大干擾，因此外泌體研究中必須使用去除外泌體后的FBS進行細胞培養(yǎng)。無外泌體血清專為外泌體研究而設計；通過過濾無菌收集的健康胎牛血清去除外泌體；胎牛血清中內(nèi)源性外泌體去除率為97%；過濾可有效保護FBS中重要的細胞營養(yǎng)因子；exoFBS和普通FBS在細胞生長速率和形態(tài)上沒有差異。無外泌體血清不含多種由蛋白質(zhì)編碼和調(diào)控的RNA，包括mRNA、miRNA、rRNA和s

無外泌體血清|*|春節(jié)不打烊2021/07/02

無外泌體血清|*|春節(jié)不打烊★外泌體簡介外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡，其內(nèi)部包裹了多種蛋白質(zhì)、mRNA、non-codingRNA等分子。外泌體主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。目前大量文獻報道，幾乎所有類型的細胞都可以產(chǎn)生并釋放外泌體，不同的生物體液(血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、腹水)中都發(fā)現(xiàn)有大量外泌體存在，外泌體由細胞分泌釋放后，通過個種體液在體內(nèi)傳播，被靶細胞攝入后，釋放內(nèi)部的生物分子，參與細胞間的通訊，調(diào)節(jié)細胞功能。對于大多數(shù)細胞

SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明2020/12/15

SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明產(chǎn)品名稱：無外泌體血清|去除外泌體胎牛血清貨號：EXO-FBS-50A-1規(guī)格：50ml備注：少量現(xiàn)貨，干冰運輸......一、外泌體的基本信息⊙外泌體的大小：外泌體的直徑約40-150nm⊙從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體（exosomes）或微泡（microvesicles）⊙外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡⊙外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm⊙外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎

挑選 ELISA 試劑盒，必須了解的 12 個妙招2020/11/19

挑選ELISA試劑盒，必須了解的12個妙招ELISAKit的誕生，是為了幫助科研工作者省掉繁瑣的實驗過程，提高科研效率。如果選對了試劑盒，用對了實驗技巧，就會讓您的實驗效率事半功倍。市場上各種廠家、品牌，各種種屬、因子，質(zhì)量良莠不齊，如何浪里淘金，選擇既符合研究需求，又品質(zhì)上乘的ELISA試劑盒呢?大師兄教你12招，挑選合適ELISA試劑盒1、查找待測樣本的蛋白濃度可以通過NCBI的文獻，uniprot，pax-dab上給出的蛋白表達量參考值來比較ELISA試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致2

ELISA試劑盒的方法種類以及它們各自的優(yōu)勢和用途2020/11/19

ELISA試劑盒的方法種類以及它們各自的優(yōu)勢和用途買國產(chǎn)ELISA試劑盒，選擇DECO，免費代測，靈敏度高！ELISA大致分為五種類型：直接法、間接法、競爭法、夾心法、捕獲包被法。在商品化試劑盒中用得比較多的是雙抗體夾心法、競爭法和間接法。雙抗體夾心法是夾心法中的一種主要形式，我們先談談夾心法吧：夾心法（SandwichELISA）分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法：雙抗體夾心法中抗原的2個不同的抗原表位被兩個抗體-捕捉抗體和檢測抗體，分別結(jié)合。捕捉抗體固定于載體即酶標板上，檢測抗體通過結(jié)合抗原進行

關于胎牛血清的沉淀，如何避免？2020/10/16

關于胎牛血清的沉淀，如何避免？1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨

胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?2020/10/16

血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?近期，有些客戶再使用我司胎牛血清過程中，發(fā)現(xiàn)血清融化后有些許沉淀（類似頭皮屑的東西），擔心影響質(zhì)量，不敢使用！莫怕，莫怕，小編搜集了些資料，供大家參考！血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400轉(zhuǎn)/分離心1-2分鐘,上清液即可接

PLC/PRF/5細胞（STR鑒定）2020/08/19

PLC/PRF/5細胞（STR鑒定）細胞英文(簡稱）PLC/PRF/5(已通過STR鑒定）細胞名稱PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞【已通過STR鑒定】背景資料該細胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。細胞來源ATCCCRL-8024代次P3規(guī)格T25細胞數(shù)1x10^6cells價格￥1480生物安全級別2組織來源肝癌細胞形態(tài)貼壁；上皮細胞樣細胞活力95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）細胞檢測細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌培養(yǎng)

PANC10.05細胞，人胰腺癌細胞2020/08/19

PANC10.05細胞，人胰腺癌細胞含STR鑒定，千舍生物，現(xiàn)貨供應！PANC10.05細胞，人胰腺癌細胞特性1）來源：胰腺2）形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長3）含量：1x1064）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。收到細胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)

細胞培養(yǎng)2020/07/15

在培養(yǎng)細胞的過程中，你是否遇到：應該貼壁的細胞，某次傳代后出現(xiàn)不貼壁了？細胞養(yǎng)不起來，生長速度緩慢，或突然停滯生長？細胞狀態(tài)不好，視野中總是存在較多死細胞？除了良好的細胞來源，嚴謹?shù)膶嶒灢僮鳎_的培養(yǎng)體系外，還有許多人為的不可控制的因素。作為細胞培養(yǎng)體系中不是人工合成的胎牛血清，也成為了不可控的小惡魔因素！選擇合適的血清也成為了細胞培養(yǎng)成功與否的決定性因素之一。根據(jù)采血時機的不同，牛血清可分為胎牛血清、新生牛血清和小牛血清，我們細胞培養(yǎng)中一般使用的是胎牛血清，也是“干凈”、營養(yǎng)豐富的血清。·來

Cegrogen Biotech GmbH （A0500-3010）2020/07/03

德國CegrogenBiotechGmbH（A0500-3010）產(chǎn)品名稱：德國CegrogenBiotechGmbH貨號：A0500-3010規(guī)格：500ml備注：少量現(xiàn)貨，-20度保存國外市場的長期壟斷在無血清培養(yǎng)基市場，有三大國外*長期“稱霸”。三大培養(yǎng)基公司美國賽默飛（Thermofisher/Gibco）、美國默克（Merck/SAFC/JRH）、美國GE（GEHealth/Hyclone），占有市場90%左右的份額。三大家均擁有成熟的研發(fā)和客戶體系，業(yè)務穩(wěn)定性強。而且細胞培養(yǎng)基行業(yè)的

SIGMA現(xiàn)貨試劑，S0130-1G2020/07/03

SIGMA現(xiàn)貨試劑，S0130-1GSIGMA的生命科學產(chǎn)品線面向?qū)W術和制藥領域的生命科學研究,專注于提供一系列高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務。SIGMA的產(chǎn)品被廣泛應用于基因組學、蛋白質(zhì)組學和細胞生物學研究，通過樣品制備、研究試劑、直觀檢測平臺及服務提供相關支持，幫助客戶更深入地理解生物學功能和疾病。蘇州千舍生物擁有SIGMA現(xiàn)貨試劑近萬種，品質(zhì)可靠，低的折扣；產(chǎn)品信息及質(zhì)檢COA均可查詢下載；有現(xiàn)貨的次日發(fā)貨，售后負責到底！ABCAMCST（行貨防偽碼）M4287-2MGS0130-1G鏈脲佐菌素I55

SIGMA試劑，大量現(xiàn)貨,SIGMA期貨短2020/07/03

SIGMA試劑，大量現(xiàn)貨,SIGMA期貨短蘇州千舍生物，SIGMA試劑，我司常備現(xiàn)貨千余種，*。更多SIGMA試劑直接國外訂貨，周期短、安全、可靠、方便、快捷！為廣大科研院校及醫(yī)院藥廠提供極大的方便。部分現(xiàn)貨試劑如下：常賣貨號清單常賣貨號清單常賣貨號清單185310-5GI4381467871-250GC4642-25GG4410SML0223-10MG229520-10GC6780V900471-25G482315-1GC8356V900922-100G429732-1GV1255L9283-