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酶聯免疫吸附實驗 ELISA2020/03/15

酶聯免疫吸附實驗ELISA一．實驗目的酶聯免疫吸附測定（enzyme-linkedimmunosorbentassay簡稱ELISA）是在免疫酶技術（immunoenzymatictechniques）的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術,ELISA過程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測抗體（抗原）,再加相應酶標記抗體（抗原）,生成抗原（抗體）--待測抗體（抗原）--酶標記抗體的復合物，再與該酶的底物反應生成有色產物。借助分光光度計的光吸收計算抗體（抗原）的量。待測抗體（抗原）

蘇州千舍生物 ELISA試劑盒樣本處理方法2020/03/15

樣品前處理：a)對于貼壁細胞：去除培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。c)對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-

蘇州千舍生物提示細胞培養需注意哪些細節2020/03/13

蘇州千舍生物提示細胞培養需注意哪些細節養細胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細對待，愛護她，呵護她。如果你照顧的時候能注意這些問題，會讓你的細胞養的更好。下面就將養細胞的注意事項跟大家交流一下。一、細胞培養前的準備在您帶上手套開始細胞培養之前,先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風險。細胞培養基也應先預熱,選擇只預熱部分培養基而非整瓶加熱,不但可以節約實驗時間,而且可以避免因反復加熱培養基而造成的蛋白質降解。結束操作后,別忘了培養

蘇州千舍生物教你如何挽救細胞污染2020/03/13

蘇州千舍生物教你如何挽救細胞污染以自建細胞系(laryngealsquamouscarcinoma-1，LSC-1)第12代的某一被細菌污染的細胞株采取救治，比較效果并分析細胞生物學特性。一、實驗方法1、抗生素法：細菌培養：用無抗生素*培養液培養細胞3d，收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養基，35e培養。所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素，抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據細菌藥敏實驗結果選出敏感抗生素，每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個濃度梯度。將LSC-

蘇州千舍生物教你如何解決“細胞空泡化”2020/03/13

蘇州千舍生物教你如何解決“細胞空泡化”“細胞空泡化”在細胞培養中也是一個常見問題，它的出現原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼。在文章中小給列舉出了可能出現這種情況的原因，方便大家進行分析選擇解決的方法。一、可以引起細胞空泡化出現的原因有哪些？1.細胞老化原代細胞培養的過程中經常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。傳代細胞出現這種狀況比較少見，出現的原因一般都是因為細胞傳代次數過多，老化嚴重。2.PH值培養液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。3.

蘇州千舍生物教你如何選擇培養基和血清2020/03/13

蘇州千舍生物教你如何選擇培養基和血清細胞培養是實驗室里常規和基礎的實驗了，但卻不是簡單的。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，讓我們先從培養基和血清說起。經典的培養基有很多種，GIBCO、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養?！鬗EM是由Eagle’s基礎培養基(BME)發展而來的

蘇州千舍生物提示細胞培養需注意事項2020/03/13

蘇州千舍生物提示細胞培養需注意事項細胞培養在生命科研的地位舉足輕重。實驗君的很多成果可謂是成也細胞培養，敗也細胞培養。然而細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀！科研人是不會這么被輕易打敗的。1.新買的細胞如何處理？細胞剛拿到手應趕緊做這幾件事：檢測瓶子是否破裂；培養基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴增凍存。2.能否使用與原先培養條件不同的培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。3.購買的細

蘇州千舍生物教你如何培養細胞之細胞消化2020/03/12

蘇州千舍生物教你如何培養細胞之細胞消化細胞培養，尤其是細胞系的培養，就細胞消化而言，多做、善于總結，就可以把細胞養的越來越好。絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可：吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞（絕大部分1min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37度消化。怎樣算是消化好了呢？不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你

蘇州千舍生物教你如何更好的培養細胞2020/03/12

蘇州千舍生物教你如何更好的培養細胞在細胞培養過程中會出現這樣或那樣的問題，這些問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養細胞不貼壁可能原因：●胰蛋白酶消化過度；●支原體污染；●培養基pH值過堿（NaHCO3分解）；●細胞老化；●接種細胞起始濃度太低或太高。解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度；●分離培養物，檢測支原體。清潔支架或培養箱。如發現支原體污染，丟棄培養物；●使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌

蘇州千舍生物SBI無外泌體血清50ml品牌介紹2020/03/12

蘇州千舍生物SBI無外泌體血清50ml品牌介紹英文名稱：Exosome-depletedFBSMediaSupplementEXO-FBS-50A-1FBS產品規格：50ml保存溫度：-20℃用途：適用外泌體研究特點：無支原體，無內毒素說明：該產品僅供科研使用庫存狀態：常備現貨。EXO-FBS-50A-1FBS,無外泌體血清,50ml胎牛血清（FBS）已在真核細胞培養中使用了幾十年了。然而，很少有人關注FBS的RNA對培養的細胞會產生什么樣的生物學效應。來自哈佛醫學院的研究人員用RNA測序，證明

蘇州千舍生物阿根廷NTC 胎牛血清品牌介紹2020/03/11

蘇州千舍生物阿根廷NTC胎牛血清品牌介紹產品：SFBE，NTC特級胎牛血清名稱：NTC特級胎牛血清品牌：Natocor貨號：SFBE產地：Argentina數量：大量（常備庫存）保質期：5年保存條件：-20°規格：500mlNatocor-IndustriaBiológica（簡稱NTC）公司位于阿根廷科爾瓦多的卡洛斯帕斯鎮，其公司擁有30年的動物血清生產歷史，占有阿根廷當地80%的血清市場，該公司一貫堅持從原料采集到生產包裝都在該領域zui高標準下進行。1、低內毒素內毒素≤5EU/ml為目前z

蘇州千舍生物PAA胎牛血清品牌介紹2020/03/11

蘇州千舍生物PAA胎牛血清品牌介紹血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞的起到某些保護作用。類別有胎牛血清PAA胎牛血清、透析型胎牛血清、天然低IGG胎牛血清、干細胞培養胎牛血清、特殊用途胎牛血清、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清、胎牛血清替代物、小牛血清、新生牛血清、供體馬血清、兔血清、雞血清、豬血清、馬血清、其他動物血

蘇州千舍生物教你如何查詢細胞資料和培養基相關知識2020/03/10

蘇州千舍生物教你如何查詢細胞資料和培養基相關知識培養基是細胞培養中*的營養成分，但是基礎的培養基卻給實驗者帶來了一系列的問題。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。1.怎樣查到一個特定細胞株的相關知識和培養條件？ATCC（AmericanTypeCultureCollection）收集了絕大多數細胞的詳細資料。打開ATCC網頁的Cellsａndhybridomas鏈接，輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數據庫。數據庫中有每一種細胞的詳細描述，包括細胞的來源，培養和凍存條件，以及相關文獻等資料?；?

蘇州千舍生物教你如何判斷細胞活力2020/03/10

蘇州千舍生物教你如何判斷細胞活力正如人有喜怒哀樂，細胞也是如此，細胞的活力和狀態是不斷變化的，而非一成不變的。在細胞體外培養的過程中，離開機體保護的細胞是很脆弱的，在陌生的生長環境下即便是培養條件的輕微改變，也可能對細胞產生無法預估的影響。在原代細胞培養過程中，即使保持培養條件*一致，在傳代過程中，細胞的存活質量也是逐漸下降的。以人臍靜脈內皮細胞（HUVEC細胞）為例，HUVEC細胞是研究內皮細胞功能的經典體外細胞模型。在心血管疾病的研究中，主要用于研究內皮細胞功能改變或損傷后其衍生細胞因子對血

PAN胎牛血清有哪些優勢？2020/03/03

PAN胎牛血清產品說明PAN胎牛血清,貨號:ST30-3302\ST30-3302P\ST30-2602，年初大促！終端客戶買任意一款PAN胎牛血清，一送一（雙抗胰酶或者培養基1瓶）*時間：2020年3月3-2020年5月1德國PAN公司的優級胎牛血清是經過嚴格工藝篩選出來的優級系列，嚴格的質量控制，批間差異較小，質量穩定性好，內毒素含量低，無病毒、支原體，具有較高安全性。細胞培養測試顯示多種細胞系更好的生長特性，適用于品種繁多的細胞培養。德國PAN胎牛血清詳細描述：1）內毒素含量極低2）具有歐

PAN胎牛血清該如何保存，這些問題要注意2020/02/24

1、問：2019年6月到期的PAN胎牛血清到2020年5月還能用嗎？答：只要試試了，如果一直在-20℃凍著，應該還能夠，先少用點看看。養細胞系應該沒問題，原代不可。2、問：請問天然溶化好的胎牛血清和1640培育基今天用不上，明天用，不想放到冰箱里，放在室溫下一晚行嗎？100毫升培育瓶加多少培育基呢？答：能夠放4℃。4-5ml。3、問：4℃冰箱內保存3個月的胎牛血清，能否繼續運用？相關細胞和其它試劑的代價比較高，不敢容易嘗試。答：需求長期保存的PAN胎牛血清必需要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中

Bovogen胎牛血清使用和保存方法2020/02/21

Bovogen胎牛血清、Bovogen澳洲胎牛血清、Bovogen新西蘭胎牛血清、Bovogen南美胎牛血清，為蘇州千舍生物常備現貨產品，歡迎廣大師生咨詢購買！一、Bovogen胎牛血清使用方法在細胞培養過程中，經常加入5%-20%的胎牛血清，常使用的Bovogen胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續實驗的結果，我們在實驗中使用10%的Bovogen澳洲胎牛血清培養293T細胞，效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的BovogenFBS或者20%的Bovogen胎

三步法解凍胎牛血清，好處多？2020/02/17

解凍血清時，推薦我們總結出來的三步法（見下表），可預防沉淀發生。不推薦血清4℃過夜融化，更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中。因為血清在融化時，蛋白先融，冰塊后融，局部蛋白濃度過高，易發生沉淀。血清在解凍后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。步驟：溫度100ml血清500ml血清一步室溫35分鐘90分鐘或15-20℃水浴5分鐘18分鐘第二步20℃水浴15分鐘25分鐘第三步37℃水浴20分鐘35分鐘注意：在水浴過程中，血清的液面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動，使血清混勻，

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區別？2020/02/17

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區別？1、采血時間不同胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。3、用途與

細胞系和細胞株大不相同！細胞株購買要注意什么？2020/02/17

原代培育物經*傳代成功即稱為細胞系，因而細胞系可泛指一般可能傳代的細胞。其間可以連續傳代的細胞叫做連續細胞系或無限細胞系，不能連續培育的稱為有限細胞系。大多數二倍體細胞為有限細胞系。原代培育的細胞一般傳至10代左右就不簡單傳下去了，細胞的成長就會出現阻滯，大部分細胞變老死亡。但是有極少數的細胞可以度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般可以傳到40--50代，這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株(細胞株購買價格)的遺傳物質沒有發生改變。當細胞傳至50代今后又會出現“危機”，不能再傳下去。但是有部分