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BY-1221 RMC大鼠腎系膜細胞系

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RMC大鼠腎系膜細胞系
RMC大鼠腎系膜細胞系作為源自大鼠腎小球系膜區的功能細胞模型,因保留腎小球系膜細胞te有的收縮、增殖及基質分泌功能,在腎小球疾病機制研究中占據重要地位,成為探究系膜增生性腎炎及糖尿病腎病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠正常腎小球系膜組織,經原代培養和純化建立。細胞形態在靜息狀態下呈星狀或多角形,胞體伸展充分,具有多個細長突起,細胞核呈橢圓形,核仁清晰;受刺激后細胞收縮,突起縮短,體積縮小 20%,呈現梭形化改變。生長方式為貼壁生長,呈放射狀排列,形成網絡樣結構,接觸抑制較弱,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數表現出系膜細胞特征:倍增時間約 60 小時,連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型(染色體數 42 條);系膜細胞標志物肌動蛋白(α-actin)、結蛋白(Desmin)免疫熒光陽性率分別為 97% 和 89%,不表達上皮細胞標志物 CK18;基礎狀態下膠原蛋白 IV(Col IV)分泌量達 18μg/10?細胞 / 24h,是腎成纖維細胞的 1.7 倍,硫酸ruan骨素蛋白聚糖表達豐富;無微生物污染,細胞純度達 96%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在腎小球疾病機制研究中,RMC 細胞經高糖(30mM)處理 7 天后,細胞增殖活性提升 45%,Col IV 表達量增加 3.2 倍,血小板衍生生長因子(PDGF)受體磷酸化水平升高 2.8 倍,可模擬糖尿病腎病中系膜細胞增生及基質積聚過程,為解析代謝性腎損傷機制提供理想模型。藥物干預研究方面,該細胞在血管緊張素 II 受體拮抗劑處理下,Ang II 誘導的細胞收縮率下降 58%,細胞外基質分泌量減少 42%,能很好地反映腎臟保護藥物的作用效果,助力靶向治療研究。在腎小球炎癥研究領域,該細胞與巨噬細胞共培養時,脂多糖(LPS)刺激可使 RMC 的腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)分泌量增加 6.3 倍,白細胞介素 - 1β(IL-1β)釋放量上升 4.8 倍,激活的系膜細胞進一步促進巨噬細胞浸潤,形成 “炎癥放大循環” 模型,適用于研究腎小球腎炎的免疫病理過程。此外,將該細胞接種于腎小球基底膜支架上,可構建體外腎小球模型,用于評估藥物對腎小球濾過功能的影響。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,添加 1% 抗生素混合液及 5ng/ml 胰島素,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。誘導病理模型時,高糖處理采用含 30mM D - 葡萄糖的培養基,炎癥模型采用 1μg/ml LPS 刺激,處理時間根據實驗需求設定為 24-168 小時。培養基需每 3 天更換一次,避免代謝廢物堆積。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理,37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞突起回縮后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:2-1:3,每 5-6 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 92% 以上,3-4 代內可恢復正常的收縮與分泌功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞突起形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。
RMC 大鼠腎系膜細胞系以其穩定的腎小球系膜細胞功能、明確的病理反應特性及易于培養的優勢,在腎小球疾病基礎研究與藥物開發中發揮著重要作用,為揭示腎臟濾過單位損傷機制和開發新型腎臟保護策略提供了可靠的實驗平臺。

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