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BY-1209 RTE大鼠氣管上皮細胞系

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RTE大鼠氣管上皮細胞系
RTE大鼠氣管上皮細胞系在呼吸系統研究領域意義重大,憑借其保留氣管上皮細胞的典型功能,成為探究氣道屏障功能、氣道炎癥機制及呼吸系統藥物篩選的重要實驗模型,為呼吸道相關疾病研究提供了可靠的細胞平臺。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠氣管黏膜上皮組織,經原代培養和永生化處理建立。細胞形態呈典型的上皮樣,多為柱狀或立方狀,排列緊密呈單層鋪路石樣,部分細胞可見纖毛結構,約占細胞總數的 25%,細胞核呈橢圓形,位于細胞基底部,核仁清晰。生長方式為緊密貼壁生長,傳代后 24 小時貼壁率達 95%,顯著高于其他上皮細胞系。核心參數表現穩定:倍增時間約 60 小時,連續傳代 45 次后仍保持正常二倍體核型(染色體數 42 條);氣管上皮特異性標志物如細胞角蛋白 14(CK14)、黏蛋白 5AC(MUC5AC)免疫熒光染色陽性率達 96%,黏液分泌功能維持在原代細胞的 85%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,細胞純度達 98%,保障實驗結果的準確性。
科研應用價值:在氣道屏障功能研究中,RTE 細胞可形成完整的單層上皮屏障,跨上皮電阻(TEER)值穩定在 350Ω?cm2 以上,經臭氧暴露后,TEER 值下降 42%,緊密連接蛋白 occludin 表達量減少 38%,能模擬氣道屏障損傷的病理過程,為解析氣道屏障破壞機制提供理想模型。氣道炎癥研究方面,該細胞在脂多糖(LPS)刺激下,24 小時內腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)分泌量增加 4.3 倍,白細胞介素 - 6(IL-6)釋放量上升 3.8 倍,可很好地模擬氣道炎癥反應,助力炎癥信號通路的探究。藥物篩選領域,該細胞對支氣管擴張藥物反應敏感,經沙ding胺醇處理后,細胞內 cAMP 水平升高 2.7 倍,適用于評估呼吸道藥物的療效及作用機制。此外,將該細胞與氣道平滑肌細胞共培養,可構建體外氣道微環境模型,用于研究氣道上皮與平滑肌細胞間的相互作用。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 Ham's F-12 培養基,添加 1% 表皮生長因子(EGF)、1% 胰島素 - 轉鐵蛋白 - 硒(ITS)混合液及 1% 抗生素,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,更換時動作輕柔,避免損傷細胞層。傳代時采用含 EDTA 的溫和消化液處理,37℃孵育 6-8 分鐘,待細胞間隙增大后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:2-1:3,每 4-6 天傳代一次,維持細胞融合度在 75%-85% 以保持其生物學功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 92% 以上,2-3 代內可恢復正常的分泌功能和屏障功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。

RTE 大鼠氣管上皮細胞系以其穩定的生物學特性、完整的氣道上皮功能及對刺激的良好反應性,在呼吸系統基礎研究和藥物研發中發揮著不可替代的作用,為揭示呼吸道疾病的發病機制和開發新療法提供了有力支撐。

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